Natalia Andrea Hernandez Benitez – A00368648

La técnica que utilizaría seria Southern blot utilizando las muestras de ADN extraídas de la sangre
de los buzos expuestos a el material radiactivo, debido a que como se expone en el caso cuando las
personas son expuestas a estas radiaciones se produce una inserción en 700-800 bases de adenina
por lo cual esta técnica nos permitirá a partir de la ADN extraído y previamente digerido con
enzimas de restricción determinar la presencia de fragmentos de ADN o la presencia de genes,
durante las diversas etapas de la expresión, las enzimas de restricción lo que van a hacer en este
proceso es que van a reconocer un punto especifico de la secuencia de ADN donde van a llegar y
eliminan un fragmento de ADN especifico mediante la metilación la cual sirve como marcaje, van a
cortar la secuencia que no esté marcada como de ellas, de esta forma el ADN es más manipulable
cuando es digerido por estas enzimas al obtenerse fragmentos más pequeños antes de realizarse la
electroforesis donde el ADN va a ser separado, posterior a las enzimas de restricción mediante la
técnica de Southern blot podríamos detectar estos fragmentos de ADN donde se produjo la
inserción de las bases de adenina, de esta manera si sabemos que la secuencia no mutada no posee
esta secuencia de bases de Adenina y la secuencia mutada si las posee entonces podremos
identificar los fragmentos mutados utilizando una sonda de ADN (moléculas marcadas con
radioactividad y una secuencia conocida) para identificar qué bandas del gel contienen secuencias
complementarias a la de la sonda, la cual al ponerse en contacto con la membrana de nitrocelulosa y
si se produce una hibridación en aquellos lugares en donde la sonda encuentre su secuencia
complementaria la sonda emitirá radiactividad que se observa mediante un proceso de revelado con
placas de rayos X y finalmente donde se produzca la emisión de la sonda corresponderá al
fragmento de interés para nosotros que será la fragmentos donde se produjo la inserción de bases.
Entonces si efectivamente hay una inserción de bases debido a la exposición a la radiación se espera
que al realizar la prueba Southern blot con el ADN extraído se produzca la emisión de la sonda que
correspondería al fragmento donde se encuentra la inserción de las bases de Adenina. Esta técnica
nos provee grandes ventajes con respecto a las otras ya que posee una alta especificidad,
reproducibilidad y el permite tambien la valoración del estado físico del ADN