Las sondas

moleculares y sus
aplicaciones en
biomédicina

Mirella Lozano Álvarez y

Miruna Nicoleta Nedelcu
¿Qué es una sonda
molecular?
Las sondas moleculares son pequeños fragmentos de ADN o ARN que
se utilizan en biología molecular como herramientas para detectar la
presencia de ADN o ARN con secuencias complementarias similares o
idénticas.

En uso, la sonda se une a una secuencia diana monocatenaria (la única

cadena que queda cuandose aísla el ADN o el ARN) mediante un
mecanismo de hibridación que forma una estructura de doble cadena,
una cadena que pertenece a la sonda y la otra a la secuencia objetivo.
Esta asociación se forma porque tanto la sonda como la diana tienen
secuencias parcial o totalmente complementarias que forman pares de
bases complementarios.
Empleo de la sonda Extraemos muestras de ADN de los
sujetos que queremos analizar y

molecular: realizamos una sonda molecular con

la misma base nitrogenada (adenina
(A), citosina (C), guanina (G) y timina
(T))

Se separan las fibras del ADN con

calor o encimas y luego se adhiere la
sonda a una de las fibras.

Más tarde se realizará un lavado para

eliminar la fibra de ADN. Si luego la
hebra presenta una fluorescencia
significa que el ADN coincide y los
sujetos están emparentados.

Si no se observa nada significa que el

ADN no coincide y los sujetos no
están emparentados.
Tipos de sonda molecular:
SONDAS DE MARCAJE:
Las sondas marcadas (radiomarcadas o
inmunomarcadas) se utilizan para visualizar
las moléculas diana. Para usar con ADN de
doble cadena, primero debe
desnaturalizarse por calor o alta
alcalinidad. Esta sonda monocatenaria
marcada se une al objetivo; y el sitio de
unión se determina porque el método de
marcaje deja una señal que puede
detectarse mediante fotografía. En los
métodos modernos, las etiquetas
fluorescentes se utilizan para emitir una
señal que es detectada por un láser, como
las que se utilizan en la PCR en tiempo
real.
RADIOCTIVAS ANTICUERPOS:
Aunque el marcaje radiactivo es muy
Las sondas se pueden sensible, implica los peligros asociados con
radiomarcar usando el uso de radiactividad. Se han desarrollado
nucleótidos con átomos otros métodos de marcaje basados en
anticuerpos para evitar este peligro. Usando
específicos de un una sonda marcada con nucleótidos unida a
isótopo radiactivo la molécula, se agregan a la solución
(generalmente 32P), anticuerpos específicos que se unen a la
molécula; estos anticuerpos están ligados a
pero también se usa un compuesto luminiscente o fluorescente
tritio. que deja una huella fotográfica.