Informe Técnico #3 ACOMPAÑAMIENTO Y SEGUIMIENTO EN EL MONTAJE DE

FOTOBIORREACTORES A ESCALA LABORATORIO PARA BIOAUMENTACIÓN

ALGAL.

Proyecto: Remoción de sabor asociado a las algas perifíticas en la plata Bosconia

del Acueducto Metropolitano de Bucaramanga.

Elaborado por: Paola Reyes, Ingeniera Ambiental

Fecha: 26 de Octubre del 2017

Orden de servicio: Orden de prestación de servicios número 0056 del 28 de julio del
año 2017 suscrita entre el amb S.A E.S.P y Paola Andrea Reyes Zambrano

Objetivo: Realizar actividades de apoyo en campo y laboratorio incluidas en el

proyecto POIR 17.1 Implementación de proyectos para remover sabor del agua en
la planta Bosconia, participar en acciones definidas por el biólogo y los
coinvestigadores de la Universidad Pontificia Bolivariana y los profesionales del
amb, enfocados en el muestreo del ecosistema acuático, ensayos y elaboración
de protocolos para optimizar los procesos de potabilización en la planta.

RESUMEN

Para dar continuidad al desarrollo del proyecto de investigación “Remoción de sabor

asociado a las algas perifíticas en la planta Bosconia del acueducto metropolitano de
Bucaramanga”, se dio inicio a la tercera fase: Montaje de Fotobiorreactores a escala de
laboratorio, con el objeto de Bioaumentar las microalgas identificadas en la etapa
anterior como generadores de mal sabor al agua. Se utilizaron como fotobiorreactores,
cilindros de vidrio translucido de 10x25 cm, con un sistema de aireación conectado a
filtros de aire, utilizando como dispersión del aire difusores plásticos, fueron ubicados
en módulos de iluminación con lámparas fluorescentes de luz blanca, con fotoperiodos
de 12h: 12h y temperatura ambiente. El cultivo de microalgas se realizó en una
relacion1:1 con medio de cultivo Cianofílico. La velocidad de crecimiento y proliferación
del alga problema (Cyanophytas) fue media, debido a la condición inicial de muestreo,
a causa de las circunstancias climáticas. Adicionalmente, se observó que el crecimiento
de las Cyanophytas, se da sobre sustratos sólidos.
 1. METODOLOGIA

1.1 Definición de la Unidad Experimental

La unidad experimental consistió en, Cilindros de vidrio translucido de 10x25 cm, con un
sistema de aireación conectado a filtros de aire, para evitar la entrada de material
particulado al sistema, utilizando como dispersión del aire difusores plásticos, que
permitía la salida de burbujas gradualmente. Los fotobioreactores se ubicaron en
módulos de iluminación de 4700 lux con lámparas fluorescentes de luz blanca, con
fotoperiodos de 12h: 12h y temperatura ambiente. El esquema en la unidad
experimental, se visualiza en la imagen 1.

Imagen 1. Esquema en la unidad experimental

Fuente: Autora

1.2 Aislamiento y Cultivo de Microalgas

La toma de muestras se llevó a cabo en el punto denominado como BOCATOMA sobre

el río Suratá, el cual presentaba mayor densidad de Phormidium (Cyanophytas). Se
tomó muestra de medio líquido, sustrato lodoso y microalgas adheridas. Posteriormente
se llevaron al laboratorio de Agua Potable de la Universidad Pontificia Bolivariana, donde
se acondicionaron en relación 1:1 con medio Cianofílico, tabla 1 (Adaptación del medio
de cultivo Cianofílico (UTEX, 2017)).

Tabla 1. Medio de Cultivo Cianofílico

Componente Cantidad Concentración
Final
KNO3 – Nitrato de Potasio 5 g/l 50 mM
K2HPO4 – Fosfato Monopotásico 0.039 g/l 0.28 mM
MgSO4.7H2O – Sulfato de Magnesio heptahidratado 0.05 g/l 0.2mM
Solución de Metales 6 ml/l -
Na2EDTA.2H2O 0.15 g/l 2 mM
FeCl3.6H2O – Cloruro de Hierro hexahidratado 0.097 g/l 0.36 mM
MnCl2.2H2O - 0.033 g/l 0.21 mM
ZnSO4. 7H2O 0.016 g/l 0.05 mM
CoCl2.6H2O 0.002 g/l 0.0084 mM
MoO3 0.002 g/l 0.014 mM
Fuente: Adaptación (UTEX, 2017)).

Para la realización del medio de cultivo se utilizó agua destilada, se esterilizado en

Autoclave y fue refrigerado finalmente.
1.3 Variables de Respuesta

Las variables que se midieron u observaron durante esta etapa de bioamentación

fueron: pH, OD, Temperatura (Medición diaria) y Microscopia (Medición cada 2 días).

Tabla 2. Monitoreo realizado en el mes de Octubre

Octubre 2017
L M X J V S D
101 11 12 132 14 15
16 173 18 19 204 21 22
235 24 25 266 27 28 29
Fuente: Autora

2. RESULTADOS

2.1 Montaje y Cultivo de Microalgas

Los resultados presentados a continuación corresponden al avance de la
bioaumentación, que dio inicio el 10 de Octubre del 2017 y avanza aun hasta la fecha
del presente informe.
La presencia de microglas Phormidium, en las muestras tomadas para el montaje,
fueron muy insipientes debido a las condiciones climáticas del momento. La
bioaumentación se inició con 3 fotobioreactores con 200 ml en promedio de volumen
utilizado (relación 1:1 de muestra y medio de cultivo), en la imagen 2 se evidencia el
montaje realizado:
Imagen 2. Montaje de fotobiorreactores inicial

2-Sustratos 1-Lavado
3-Lodo con alga de Rocas

Fuente: Autora
Primer Muestreo Microscópico
La presencia alga inicial fue muy baja, el fotobiorreactor número 2 (medio de cultivo +
sustrato con alga + lodo + agua de río), tuvo mayor presencia que los fotobiorreactores
1 (medio de cultivo + Lavado de roca con algas + agua de río) y 3 (medio de cultivo +
lodo + agua de río), la imagen 3 evidencia la presencia de Phormidium en el montaje.
Imagen 3. Microalga Phormidium

Fuente: Autora
Adicionalmente a las Cyanophytas, se observó presencia de Bacillariophyta, o diatomea
y Chlorophyta o algas verdes, también con baja presencia.
Segundo Muestreo Microscópico
En la segunda revisión (3 días de cultivo) de Microscopia, no se observó variaciones
significativas en el crecimiento microalgal.
Imagen 4. Montaje fotobiorreactores de 3 días de cultivo

Fuente: Autora
Tercer Muestreo Microscópico
En la tercera revisión (7 días de cultivo), la presencia algal había aumentado
considerablemente en el fotobiorreactor 2 (medio de cultivo + sustrato con alga + lodo
+ agua de río), observándose, que su crecimiento se desarrollaba sobre los sedimentos
lodosos y sobre un sustrato vegetal, recolectado en el muestreo (imagen 5).
Imagen 5. Crecimiento algal – fotobiorreactor 2 – día 8

Fuente: Autora
La imagen 6 evidencia microscópicamente, que la Microalga que está creciendo sobre
esos sustratos principalmente es Phormidium.
Imagen 6. Muestra microscópica de alga sobre sustrato vegetal
 Fuente: Autora

Imagen 7. Muestra microscópica de alga sobre sustrato lodoso

Fuente: Autora
La presencia de Cianobacterias, sigue siendo muy baja en el fotobiorreactor 1 y en el
fotobiorreactor 3 es casi nula.
Cuarto Muestreo Microscópico
El crecimiento algal en el fotobiorreactor 2, siguió creciendo a baja velocidad, sin
embargo, los fotobiorreactores 1 y 3 no mostraron avance alguno (Imagen 8). En la
imagen 9 se evidencia microscópicamente la presencia algal, las muestras
corresponden a película algal sobre el lodo, el difusor y el sustrato natural presente en
el fotobiorreactor 2. Adicionalmente a la Cianobacteria, se observó presencia de
Bacillariophyta o diatomea y en menor presencia Chlorophyta o algas verdes.
 Imagen 8. Montaje fotobiorreactores de 10 días de cultivo

Fuente: Autora

Imagen 9. Muestra microscópica de alga sobre sustrato

Fuente: Autora

De acuerdo a la forma de crecimiento evidenciado de las Cianobacterias (adheridas a

sustratos), se realizó una modificación del montaje de los fotobiorreactores, que
consistió, en introducir láminas de malla de polietileno, las cuales aportarían mayor
superficie de contacto.

Quinto Muestreo Microscópico

A los trece días de cultivo, se observó una variación cualitativa sobresaliente. El
fotobiorreactor 1 (medio de cultivo + Lavado de roca con algas + agua de río), evidencio
un cambio de color significativo del medio líquido, de una color café claro paso a un
verde oliva (imagen 10).
El fotobiorreactor 2 (medio de cultivo + sustrato con alga + lodo + agua de río), evidencio
mayor presencia algal, creciendo sobre el material de soporte adicionado, el lodo
sedimentado y sobre el difusor. Por el contrario el fotobiorreactor 3 (medio de cultivo +
lodo + agua de río), no muestra algún avance del crecimiento algal.
 Imagen 10. Montaje fotobiorreactores de 13 días de cultivo

Fuente: Autora

Microscópicamente, el fotobiorreactor 1 evidencio un crecimiento masivo de

Chlorophyta o algas verdes, específicamente Chlorelas, acompañados de pequeños
fragmentos de Cyanophyta o algas verde azules, en etapa inmadura de crecimiento, en
el medio liquido circundante (imagen 11).
Imagen 11. Muestra microscópica de alga en el medio liquido Fotobiorreactor

Fuente: Autora
La muestra microscópica del fotobiorreactor 2, se registra en la imagen 12,
evidenciándose crecimiento continuo, de las Cyanophyta o algas verde azules y en
menor cantidad de las Bacillariophytas (a). Las muestras correspondiente a lodo, se
caracterizó en esta ocasión por una proliferación considerable de algas Bacillariophytas
o diatomeas con baja presencia de Cyanophytas (b).
 Imagen 12. Muestra microscópica de alga - Fotobiorreactor 2 (a)

b. Muestra de Lodo al Microscopio

Fuente: Autora

El fotobiorreactor 3 no mostro presencia algal significativa, motivo por el cual, se

descartó. Al fotobiorreactor 1 se añadió nuevamente medio de cultivo Cianofílico al doble
del volumen, esperando con esto, que el crecimiento de las Cyanophytas sobresalga
sobre el crecimiento de Bacillariophytas o diatomeas y al fotobiorreactor 2, el cual ha
mostrado mejores resultados en cuanto al crecimiento de Cyanophytas, se le realizaron
3 réplicas, estas estaban compuestas de medio de cultivo Cianofílico con tres
volúmenes diferentes: 200, 400 y 500 ml y 0.26 g de biomasa algal limpia (del
fotobiorreactor 2), respectivamente (Imagen 13).
 Imagen 13. Montaje de réplicas de fotobiorreactor 2

Fuente: Autora

2.2 Resultados de las variables de respuesta

Los resultados promedio de las variables de respuesta tomadas, se registran en la tabla
3. El pH fue la variable con mayor desviación entre los fotobiorreactores, dando indicios
que es una variable que influye significativamente en el crecimiento microalgal.
Tabla 3. Resultados de las variables de respuesta
Parámetro/Reactor Reactor 1 Reactor 2 Reactor 3
pH 7.52+/-0.8 8.03+/-0.9 6.8+/-0.9
T° 25.35+/-2.2 25.25+/-2.3 25.6+/-2
OD 6.4+/-1.3 5.9+/-1.8 6.2+/-1.4

3. CONCLUSIONES

 La velocidad de crecimiento y proliferación del alga problema (Cyanophytas) es

media, debido a la condición inicial de muestreo, a causa de las circunstancias
climáticas.

 La proliferación de las Cyanophytas, se da sobre sustratos sólidos, motivo por el

cual es necesario, proporcionarle medios de soporte, para adquirir mayor
superficie de contacto.

 Las variables Temperatura del agua y Oxígeno disuelto, no representan

diferencias significativas entre los reactores, por el contrario, el pH es la variable
con mayor cambio entre fotoreactores, afectando significativamente el
crecimiento microalgal en los respectivos Fotobiorreactores.
 ANEXO

Cronograma
Tabla 4. Cronograma de actividades
Descripción de Actividades Ago Sep Oct Nov Dic Ene Fecha
Acompañamiento y seguimiento en el diagnóstico y geo-
referencia de la zona susceptible de afloramientos de  18/08/2017
algas.
Acompañamiento y seguimiento de la medición de
parámetros Fisicoquímicos y muestras algales de los  05/10/2017
puntos seleccionados.
Acompañamiento y seguimiento en el montaje de 26/10/2017
biorreactores a escala de laboratorio para la bio - 
aumentación
Realización de ensayos preliminares de: tratabilidad, /11/2017
parámetros fisicoquímicos y organolépticos del agua
Realización de la curva de relación entre la cantidad de /12/2017
algas, medida a través de clorofila vs la formación de
Geosmina y 2-Metilisoborneol – MIB
 Realización de ensayos de tratabilidad para la /01/2018
optimización de procesos en eventos de mal sabor
en el agua tratada.
 Evaluación de una técnica no convencional
reportada en la literatura para tratamiento del mal
sabor en el agua
 Realización de protocolos de control y tratamiento
para la estandarización de los procesos
Fuente: Autora