Diagnóstico de

Laboratorio en Micología
Prof. Edgar Neyra
●Diagnóstico de Laboratorio en Micología
Las Enfermedades causadas por hongos pueden dividirse en Micosis superficiales, micosis
subcutáneas y micosis profundas.

El diagnóstico de las micosis se basa tanto en la información clínica, como la información

epidemiológica, sin embargo el diagnóstico definitivo se basa en la información que proporciona
el Laboratorio.
●Diagnóstico de Laboratorio en Micología

LA CALIDAD DE LA INFORMACIÓN
PROPORCIONADA POR EL
LABORATORIO DEPENDE EN GRAN
MEDIDA DE UNA APROPIADA TOMA DE
MUESTRA
●Diagnóstico de Laboratorio en Micología

LAS MUESTRAS INACEPTABLES NO DEBERIAN SER

PROCESADAS POR EL LABORATORIO Y EL
FACULTATIVO DEBERIA SER INFORMADO
INMEDIATAMENTE.

TODO LABORATORIO DEBE DISTRIBUIR POR ESCRITO

LAS NORMAS DE RECHAZO DE MUESTRAS.
●Diagnóstico de Laboratorio en Micología
¿En que casos una muestra debe ser rechazada por el Laboratorio?

Mentimenter:
https://www.menti.com/7md47n8vcp
●Diagnóstico de Laboratorio en Micología
Dentro de los métodos más usados tenemos el examen directo; el cultivo a partir de diferentes
especímenes con aislamiento del agente etiológico, y observación del organismo en los cortes
histopatológicos.
La eficiencia de estos métodos dependerá de una apropiada toma de muestra, envío y
procesamientos respectivos.
Además existen pruebas indirectas que proporcionan evidencia presuntiva de infección micótica,
tales como detección de anticuerpos por inmunodifusión en agar. Detección de antígenos por la
prueba de aglutinación en látex o pruebas inmunocromatrográficas, ELISA.
●Diagnóstico de Laboratorio en Micología
Procesamiento
Comprobar que el etiquetado de la muestra sea el correcto.
Registrar toda la información necesaria que pudiera afectar a la calidad de la muestra y que
represente interés diagnóstico (aspecto, color, olor, consistencia, coágulos, etc.), así como todo
lo relacionado con la recepción, transporte y conservación.
Durante el procesamiento, deben seguirse todas la medidas de bioseguridad necesarias, tanto
para el personal como para la muestra.
El tipo de procesamiento y los medios utilizados dependen de las características de cada
muestra.
El procesamiento debe llevarse a cabo tan pronto como sea posible para garantizar la viabilidad
del hongo, utilizando el medio de cultivo y la temperatura de incubación más adecuado.
La recuperación de los hongos es imprescindible para su identificación y la realización de pruebas
de sensibilidad.
●Diagnóstico de Laboratorio en Micología
Examen directo
Permite la observación microscópica de estructuras a partir de especímenes o muestras clínicas.
Proporciona información PRESUNTIVA o PRELIMINAR. El examen microscópico debe realizarse
en todas las muestras con alta sospecha de micosis.
Se emplean soluciones que disuelvan la queratina, disgregan células sin afectar la morfología del
hongo y/o colorantes.
Reactivos comunes: KOH 10%, azul de metileno, tinta china, etc. También se emplea las
Tinciones de Giemsa y de Gram.
Las dos formas observadas habitualmente son levaduras y/o hifas.
Recordar que un examen negativo no descarta una micosis.
●Diagnóstico de Laboratorio en Micología

Medios de Cultivo
El diagnóstico definitivo de la mayoría de las micosis requiere el aislamiento e identificación del
hongo a partir del cultivo, lo que supone, con frecuencia, varios días o semanas. (Cultivo)
La composición básica de un medio incluye nutrientes, agente solidificante, pH adecuado y
componentes específicos. En los medios de cultivo para el aislamiento de hongos, los
antimicrobianos se utilizan con frecuencia, tanto para inhibir el crecimiento bacteriano como el
de otros hongos ambientales.
●Diagnóstico de Laboratorio en Micología
Medios de Cultivo
Agar Sabouraud Dextrosa
Agar Sabouraud más Cloranfenicol (antibiótico)
Agar Mycosel o Agar Micobiótico: Medio más Cloranfenicol y Cicloheximida (antifúngico)
Agar Harina de Maíz (Cornmeal Agar)
Agar Extracto de Malta
Agar Papa-Dextrosa
Agar Cromogénico (ChromAgar Candida)
Agar Czapek (Aspergillus y Penicillium)
Agar Semillas de Girasol (Cryptococcus spp.)
●Diagnóstico de Laboratorio en Micología

Medios de Cultivo

Temperatura de incubación:
25-30 °C

37 °C

Tiempo de incubación:
Levaduras: 24-48 horas
Mohos: 15-30 días
● Micosis Superficiales
●Micosis Superficiales

INDICAR AL PACIENTE:
Suspender medicamento sistémico o tópico de carácter antimicótico. 3-7
días antes de obtener la muestra.
Suspender la aplicación de pomadas, cremas, polvos, esmaltes en las
uñas.
Evitar sustancias extrañas que interfieran en el examen microscópico.
●Micosis superficiales

Toma de muestra:
1.Seleccionar el sitio anatómico adecuado del cual se va a tomar la muestra.
2.Evitar la contaminación con flora endógena.
3.Tomar un volumen suficiente de muestra que permita la realización de todos los estudios. Un
material insuficiente puede dar falsos negativos.
4.Rotular la muestra con el nombre del paciente, origen de la muestra, fecha, etc.
5.Utilizar un recipiente para el transporte que permita la viabilidad del patógeno, que no pueda
sufrir fisuras o roturas y que cumpla con las normas de bioseguridad para el transporte y
procesamiento.
●Pitiriasis versicolor

Enfermedad micótica crónica de la capa córnea de la piel,

común en zonas tropicales. Distribución Cosmopolita, afecta
ambos sexos.

Se presenta como manchas finamente escamosas de

coloración variable. (hiperpigmentadas o hipopigmentadas)
Las lesiones prevalecen en el torax, hombros, brazos, cuello
y cara
●Pitiriasis versicolor

Toma de muestra
●Pitiriasis versicolor

Blastosporas e hifas sugestivas

del Complejo Malassezia spp. (Azul
de Metileno, 400X)
●Pitiriasis versicolor

Agente etiológico:
Levaduras lipofílicas, del Genero Malassezia, los cuales son
comensales normales de la piel.
Antiguamente llamadas Pityrosporum
En la actualidad han sido clasificadas bajo el Complejo
Malassezia en 8 especies: M. furfur, M. sympodialis, M.
globosa, M. restricta, M. obtusa, M. slooffiae, M. japónica y
M. yamatoensis.
●Pitiriasis versicolor
●Pitiriasis versicolor

Los principales medios de cultivo para el aislamiento e identificación del

complejo Malassezia: Medio de Dixon, CHROMagar-Malassezia, Agar Tween 60- Esculina.
●Piedra negra
• Es una micosis que afecta principalmente al pelo.
• Clínicamente se caracteriza por la presencia de nódulos de
consistencia dura, fuertemente adheridos y de color marrón
o negro.
• Asintomático, perduran por años.
• El agente causal es Piedraia hortae, un hongo demateaceo
queratinolítico.
• Se presenta en zonas tropicales. (Sudamérica)
• Mecanismos de infección: por contacto.
●Piedra negra

Los nódulos están compuestos de Ascostromatas, cuerpos

fructificantes del hongo conteniendo ascas y ascosporas.
●Piedra negra
Características de la colonia:
• Colonias de crecimiento lento, rugosas, aterciopeladas, de
color oscuro a negro.
Características microscópicas:
•Hifas septadas con presencia se clamidoconidias,
ascostromatas, ascas, ascosporas
Las ascostromatas son estructuras pseudoparenquimatosas,
subglobosas de forma irregular.
●Piedra blanca
• Es una afección micótica de los pelos de la cabeza, bigote,
barba o pubis.
• Agente causal: Trichosporon spp.
• Presencia de nodulaciones de 1.5mm a 3mm de diámetro.
• Color blanco amarillento.
• Nodulaciones que forman cadenas, son más abundantes en
zona distal.
• Se presenta en zonas tropicales y sub tropicales.
●Piedra blanca
●Piedra blanca
Trichosporon beigelii:
Características de la colonia:
Colonias de crecimiento rápido a 25°C- 30°C.
Color blanco - beige.
Inicialmente lisas y luego se tornan rugosas.
Fermentación ausente, algunas especies asimilan
carbohidratos.
No asimilan Nitrato, Ureasa +, Cicloheximida negativo
●Piedra blanca

Cultivo: Trichosporon spp.

●Piedra negra y Piedra blanca

Morales C, et al. Reporte de caso: Piedra negra y

piedra blanca. 2013. Infectio 17(2): 106-110.
●Tiña negra

Es una micosis superficial, caracterizada por la presencia de

maculas de color oscuro de bordes definidos con localización
palmar o plantar.
Agente causal Phaeoannellomyces (Exophiala) werneckii
Se presenta en zonas tropicales y subtropicales
●Tiña negra

El hongo afecta la capa cornea.

Afecta a todos los grupos sociales, sobre todo a las mujeres,
proporción mujer: varón de 4:1
Con mayor incidencia en menores de 20 años.
Phaeoannellomyces (Exophiala) wernecki es un hongo
levaduriforme demateaceo
●Tiña negra

En cultivo inicialmente es una levadura que se transforma a

hongo filamentoso.
Es un hongo saprofito del suelo y materia vegetal en
descomposición.
Micosis de baja frecuencia, sin embargo es importante el dx
diferencial con otras enfermedades tales como el melanoma
maligno.
●Tiña negra
●Tiña negra

Examen directo KOH

●Tiña negra

Cultivo de Exophiala werneckii

●Dermatofitosis o Tiñas

Las Dermatofitosis o Tiñas, son infecciones del tejido

queratinizado (piel y anexos como el cabello y las uñas).
Son ocasionados por hongos filamentosos pertenecientes a
especies de los géneros:
Trichophyton, Microsporum y Epidermophyton
●Dermatofitosis o Tiñas
Conejo A, Martinez A, Ramírez O, Álvez F,
Hernández A, Baquero F, et al. Documento de
consenso SEIP-AEPap-SEPEAP sobre la etiología,
el diagnóstico y el tratamiento de las infecciones
cutáneas Micoticas de manejo ambulatorio. Rev
Pediatr Aten Primaria. 2016; 18:e149-e172.
●Dermatofitosis o Tiñas
Los dermatofitos son:
Queratinofílicos
Queratinolíticos
Producción de macroconidiosy microconidiosen el Cultivo
Pueden ser Antropofílos, Zoofílos y Geofílos
Pueden ocasionar contagio, sea por transmisión directa de
persona a persona, entre animales o entre estos y el hombre
●Dermatofitosis o Tiñas
●Dermatofitosis o Tiñas
●Dermatofitosis o Tiñas
●Dermatofitosis o Tiñas
●Dermatofitosis o Tiñas
●Dermatofitosis o Tiñas

Presencia de hifas en KOH (400x)

●Dermatofitosis o Tiñas

Presencia de hifas en KOH (400x)

●Dermatofitosis o Tiñas
●Dermatofitosis o Tiñas
●Dermatofitosis o Tiñas

Artrosporas endotrix en el interior del cabello (400X)

●Dermatofitosis o Tiñas

Artrosporas Ectotrix, rodeando el cabello (400 X)

●Dermatofitosis o Tiñas

Cabello sano (400x)

●Dermatofitosis o Tiñas
Video de toma de muestra
https://www.youtube.com/watch?v=WyyjhA5gG7M
●Dermatofitosis o Tiñas

Medios de cultivo:
Agar Sabouraud más Cloranfenicol (antibiótico)
Agar Mycosel: Medio más Cloranfenicol y Cicloheximida (antifúngico)
Agar Papa-Dextrosa
Agar Arroz, Medio de Arroz
●Dermatofitos en Cultivo

Trichophyton rubrum (Cultivo)

●Dermatofitos en Cultivo

Trichophyton rubrum, macroconidios y microconidios (400X)

●Dermatofitos en Cultivo

Trichophyton mentagrophytes
●Dermatofitos en Cultivo
●Dermatofitos en Cultivo
●Dermatofitos en Cultivo

Trichophyton tonsurans
●Dermatofitos en Cultivo

Microsporum canis (reverso del cultivo)

●Dermatofitos en Cultivo

Microsporum canis, Macroconidios (400X)

●Dermatofitos en Cultivo
●Dermatofitos en Cultivo

Microsporum gypseum, macroconidios (400X)

●Dermatofitos en Cultivo
●Dermatofitos en Cultivo

Epidermophyton floccosum, macroconidias (400X)

●Dermatofitos
●Dermatofitos Baert, F., Stubbe, D., D’hooge, E. et al. Updating the Taxonomy of Dermatophytes of
the BCCM/IHEM Collection According to the New Standard: A Phylogenetic Approach.
Mycopathologia 185, 161–168 (2020). https://doi.org/10.1007/s11046-019-00338-7
●Dermatofitos Baert, F., Stubbe, D., D’hooge, E. et al. Updating the Taxonomy of Dermatophytes of
the BCCM/IHEM Collection According to the New Standard: A Phylogenetic Approach.
Mycopathologia 185, 161–168 (2020). https://doi.org/10.1007/s11046-019-00338-7
●Dermatofitos

Postępy Mikrobiologii - Advancements of

Microbiology. 2019. Volume 58, Issue 1, Pages 49-
58, DOI: https://doi.org/10.21307/PM-2019.58.1.049