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MANEJO DE MICROPIPETAS

A. OBJETIVOS

1. Conocer las micropipetas, su rango de operación y su utilidad en los procedimientos de

laboratorio.
2. Realizar diferentes mediciones prácticas con el fin de experimentar el funcionamiento de
cada micropipeta.

B. MARCO TEÓRICO

Las micropipetas son básicas en el laboratorio y el rango de operación puede variar de un modelo
a otro. Son extremadamente útiles, permiten medir con precisión volúmenes pequeños como 0.1
µl. Existen micropipetas de volumen fijo, pipetas con ajuste variable de volumen y multicanal de
8 y 12 canales, igualmente con ajuste variable de volumen. Aunque las características especificas
de cada micropipeta estarán relacionadas con la marca, en términos generales se pueden
reconocer las siguientes partes: botón de mando, ajuste, botón expulsor, display o tablero, entre
otros.

El más importante hecho de diseño de una micropipeta automática es que el botón tiene dos
posiciones. El primer tope es aquel que se encuentra realizando una ligera presión sobre el botón
de mando, este sirve para tomar el líquido de interés. El segundo tope, se alcanza ejerciendo
mayor presión sobre el botón y es utilizado para depositar el líquido.

C. RECOMENDACIONES

 Usar todas las micropipetas sólo con puntas puestas. Nunca use la micropipeta sin punta.
 No dejar las micropipetas con las puntas llenas.
 Si se usan disolventes orgánicos y productos químicos agresivos, controlar la compatibilidad
con las puntas y las pipetas (polipropileno).
 Evitar diferencias de temperatura entre las pipetas y las puntas, así como del líquido usado,
pues ello podría llevar a dosis de volumen erróneas. Igual al usar líquidos con una alta presión
de vapor.
 Nunca mueva el ajustador de volumen, arriba o abajo del rango de la micropipeta.
 Nunca invierta la posición de la micropipeta.
 Nunca flamee las puntas.
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 Nunca deje penetrar líquido alguno a la micropipeta.

 No limpiar la micropipeta con acetona o soluciones agresivas.

D. MANEJO

Ajuste del volumen: Girar el anillo, ajustar volumen en forma continua. Las cifras de la
indicación digital se leen de arriba hacia abajo. Se recomienda ajustar desde el valor superior al
inferior, es decir, girar si es necesario, primero más allá del valor deseado y después reducir.
Ubicación de las puntas: Recuerde que la micropipeta sólo funciona con la punta puesta. Acople
la punta, asegurando que esta quede bien ajustada. Es importante tener en cuenta el color de
referencia de acuerdo a la casa comercial.
Aspiración del líquido: Se tiene listo el líquido a aspirar, se inserta la punta verticalmente en la
solución (aprox. 3 mm.), soltar poco a poco la presión del botón de mando.
Dosificación del líquido: Colocar la punta indicada en la pared del recipiente (vaso, probeta,
tubo, etc.), apretar el botón de mando hasta el segundo tope para vaciar completamente la punta y
sin soltar sacar hacia arriba la punta. Soltar poco a poco la presión del botón de mando.
Descarte de puntas: La punta se expulsa apretando el botón expulsor, en el recipiente destinado
para tal función.

Código de color
 100 a 1000 microlitros punta y embolo azul
 10 a 100 microlitros punta y embolo amarillo
 0 a 10 microlitros punta y embolo blanco
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E. MATERIALES QUE DEBEN TRAER AL LABORATORIO

Guantes de nitrilo o látex (individuales).

F. MATERIAL DEL LABORATORIO

Tubos eppendorf (1.5/2.0 ml)

Micropipetas y puntas
Gradillas
Soluciones: Agua destilada. Azul de metileno al 5%., orceina y lugol

G. PROCEDIMIENTO

 Utilizar elementos de protección personal.

 Evaluar y revisar el material del trabajo asignado, confirmando que esté en buen estado.
 Cada grupo debe realizar el siguiente cálculo:
¿Qué cantidad de azul de metileno se necesita para completar el volumen final?

Tubo Agua destilada Azul de Total

metileno
1 1850 µl 150 µl 2000 µl
2 1928 µl 72 µl 2000 µl
3 1950 µl 50 µl 2000 µl
4 1980 µl 20 µl 2000 µl
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Tubo Agua destilada Azul de Total

metileno
1 170 µl 30 µl 200 µl
2 185.2 µl 14.8 µl 200 µl
3 190 µl 10 µl 200 µl
4 130 µl 70 µl 200 µl

 Con que micro pipeta mide cada cantidad?

 Dividirse en 3 grupos para trabajar con cada micropipeta

Grupo 1

Preparar las siguientes soluciones:

Solución Tomar de la solución Tomar de la solución Tomar de la solución

1 2 3
A 5 microlitros 2 microlitros 3 microlitros
B 6 microlitos 2 microlitros 2 microlitros
C 4 microlitros 1 microlitro 5 microlitros

Revise el volumen final con la micropipeta adecuada

Grupo 2

Preparar las siguientes soluciones:

Solución Tomar de la solución Tomar de la solución Tomar de la solución

1 2 3
A2 50 microlitros 20 microlitros 30 microlitros
B2 60 microlitros 20 microlitros 20 microlitros
C2 40 microlitros 10 microlitro 50 microlitros

Revise el volumen final con la micropipeta adecuada

Grupo 3

Preparar las siguientes soluciones:

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Solución Tomar de la solución Tomar de la solución Tomar de la solución

1 2 3
A3 500 microlitros 200 microlitros 300 microlitros
B3 600 microlitros 200 microlitros 200 microlitros
C3 400 microlitros 100 microlitro 500 microlitros

Revise el volumen final con la micropipeta adecuada

 En un correo a jeferuco@yahoo.com conteste la pregunta ¿con cuál punta se hace la

actividad de cada grupo anterior?

Respuesta:

 El grupo 1 debe usar la micropipeta de punta y embolo blanco.

 El grupo 2 debe usar la micropipeta de punta y embolo amarillo.

 El grupo 3 debe usar la micropipeta de punta y embolo azul.