MANEJO DE MICROPIPETAS

A. OBJETIVOS

1. Conocer las micropipetas, su rango de operación y su utilidad en los procedimientos de laboratorio.

2. Realizar diferentes mediciones prácticas con el fin de experimentar el funcionamiento de cada micropipeta.

B. MARCO TEÓRICO

Las micropipetas son básicas en el laboratorio y el rango de operación puede variar de un modelo a otro. Son
extremadamente útiles, permiten medir con precisión volúmenes pequeños como 0.1 µl. Existen micropipetas de
volumen fijo, pipetas con ajuste variable de volumen y multicanal de 8 y 12 canales, igualmente con ajuste variable
de volumen. Aunque las características especificas de cada micropipeta estarán relacionadas con la marca, en
términos generales se pueden reconocer las siguientes partes: botón de mando, ajuste, botón expulsor, display o
tablero, entre otros.

El más importante hecho de diseño de una micropipeta autómatica es que el botón tiene dos posiciones. El primer
tope es aquel que se encuentra realizando una ligera presión sobre el botón de mando, este sirve para tomar el
líquido de interés. El segundo tope, se alcanza ejerciendo mayor presión sobre el botón y es utilizado para depositar
el líquido.

C. RECOMENDACIONES

 Usar todas las micropipetas sólo con puntas puestas. Nunca use la micropipeta sin punta.
 No dejar las micropipetas con las puntas llenas.
 Si se usan disolventes orgánicos y productos químicos agresivos, controlar la compatibilidad con las puntas y
las pipetas (polipropileno).
 Evitar diferencias de temperatura entre las pipetas y las puntas, así como del líquido usado, pues ello podría
llevar a dosis de volumen erróneas. Igual al usar líquidos con una alta presión de vapor.
 Nunca mueva el ajustador de volumen, arriba o abajo del rango de la micropipeta.
 Nunca invierta la posición de la micropipeta.
 Nunca flamee las puntas.
 Nunca deje penetrar líquido alguno a la micropipeta.
 No limpiar la micropipeta con acetona o soluciones agresivas.

D. MANEJO

Ajuste del volumen: Girar el anillo, ajustar volumen en forma continua. Las cifras de la indicación digital se leen de
arriba hacia abajo. Se recomienda ajustar desde el valor superior al inferior, es decir, girar si es necesario, primero
más allá del valor deseado y después reducir.
Ubicación de las puntas: Recuerde que la micropipeta sólo funciona con la punta puesta. Acople la punta,
asegurando que esta quede bien ajustada. Es importante tener en cuenta el color de referencia de acuerdo a la casa
comercial.
Aspiración del líquido: Se tiene listo el líquido a aspirar, se inserta la punta verticalmente en la solución (aprox. 3
mm.), soltar poco a poco la presión del botón de mando.
Dosificación del líquido: Colocar la punta indicada en la pared del recipiente (vaso, probeta, tubo, etc.), apretar el
botón de mando hasta el segundo tope para vaciar completamente la punta y sin soltar sacar hacia arriba la punta.
Soltar poco a poco la presión del botón de mando.
Descarte de puntas: La punta se expulsa apretando el botón expulsor, en el recipiente destinado para tal función.

E. MATERIALES QUE DEBEN TRAER AL LABORATORIO

Guantes de nitrilo o látex (individuales).

F. MATERIAL DEL LABORATORIO

Tubos eppendorf (1.5/2.0 ml)

Micropipetas y puntas
Gradillas
Soluciones: Agua destilada. Azul de metileno al 5%., orceina y lugol

G. PROCEDIMIENTO

 Utilizar elementos de protección personal.

 Evaluar y revisar el material del trabajo asignado, confirmando que esté en buen estado.
 Cada grupo debe realizar el siguiente cálculo:
¿Qué cantidad de azul de metileno se necesita para completar el volumen final?

Tubo Agua destilada Azul de metileno Total

1 1850 µl 150 µl 2000 µl
2 1928 µl 2000 µl
3 1950 µl 2000 µl
4 1980 µl 2000 µl

Tubo Agua destilada Azul de metileno Total

1 170 µl 30 µl 200 µl
2 185.2 µl 200 µl
3 190 µl 200 µl
4 130 µl 200 µl

 Con que micro pipeta mide cada cantidad?

 Dividirse en 3 grupos para trabajar con cada micropipeta

Grupo 1

Preparar las siguientes soluciones:

Solución Tomar de la solución 1 Tomar de la solución 2 Tomar de la solución 3

A 5 microlitros 2 microlitros 3 microlitros
B 6 microlitos 2 microlitros 2 microlitros
C 4 microlitros 1 microlitro 5 microlitros

Revise el volumen final con la micropipeta adecuada

Grupo 2

Preparar las siguientes soluciones:

Solución Tomar de la solución 1 Tomar de la solución 2 Tomar de la solución 3

A2 50 microlitros 20 microlitros 30 microlitros
B2 60 microlitos 20 microlitros 20 microlitros
C2 40 microlitros 10 microlitro 50 microlitros

Revise el volumen final con la micropipeta adecuada

Grupo 3

Preparar las siguientes soluciones:

Solución Tomar de la solución 1 Tomar de la solución 2 Tomar de la solución 3

A3 500 microlitros 200 microlitros 300 microlitros
B3 600 microlitos 200 microlitros 200 microlitros
C3 400 microlitros 100 microlitro 500 microlitros

Revise el volumen final con la micropipeta adecuada