Laboratorio #1: Uso de micropipetas (QM250)

Reporte de Laboratorio 1.
Profesor: Dr. José Renán García M.
Integrantes: Fecha de entrega: 04-09-23
1. Degracia, Sheryll ID: 4-824-1332
2. Pérez, Eylin ID: 4-823-702
3. Serrano, Stephanie ID: 4- 821-320
Objetivos.
1. Conocer los pasos correctos par el uso de la micropipetas.
2. Conocer algunos usos de las micropipetas en el laboratorio de bioquímica.
3. Aprender la manera correcta de utilizar la micropipeta de repetición.
4. Diferenciar los diferentes tipos de puntas que se pueden utilizar con cada
micropipeta.

Preguntas de utilización de micropipetas

1. ¿Hasta qué cantidad de volúmenes de líquido pueden dispensar micropipetas con las
denominaciones P2, P10, P100, P1000?
P2= 0, 1 a 2 μl
P10= 1 a 10 μl
P100= 10 a 100 μl
P1000= 100 a 1000 μl

2. ¿Cuál es el volumen máximo que pueden usarse con las puntas de color azul,
amarillas y transparentes?
1. Puntas azules: Por lo general, las puntas azules suelen tener una capacidad de
retención de líquido de 1000 μL (microlitros) o 1 mL (mililitro).
2. Puntas amarillas: Las puntas amarillas a menudo tienen una capacidad de
retención de líquido de 200 μL.
3. Puntas transparentes: Las puntas transparentes a menudo son utilizadas para
volúmenes más pequeños, y su capacidad de retención de líquido puede variar.
Pueden estar disponibles en diferentes tamaños, como 10 μL, 20 μL, 50 μL, 100
μL, etc. Se debe verificar la capacidad indicada en el paquete o las
especificaciones de las puntas transparentes que se están utilizando.

3. Describa la función de los dos “topes” que tiene el émbolo de las micropipetas.
R: El émbolo de la micropipeta normalmente tiene dos topes, el primer tope es para
aspirar el líquido, se debe presionar el émbolo hasta el primer tope, luego sumergir la
punta en el líquido que desea aspirar, soltar el émbolo lentamente, asegurándose de que
la punta permanezca dentro del líquido hasta que el émbolo vuelva a su posición original.
El segundo tope es para dispensar la muestra, insertar la punta de la micropipeta en el
recipiente donde pretende dispensar la muestra y presionar el émbolo hasta el primer
tope y hacer una breve pausa. Luego, presionar el émbolo hasta el segundo tope para
expulsar completamente el líquido de la punta.

4. Ordene el procedimiento correcto para tomar un volumen de 8.5 μL y dispensarlo en

un microtubo (indique el orden con la secuencia de letras correctas), indicando primero
que micropipeta escogería:
A) Volver a soltar suavemente la perilla para que regrese a su posición.
B) Colocar la micropipeta en su correspondiente soporte y cerrar la caja de puntas
C) Presionar hasta el primer tope.
D) Para dispensar el volumen.
E) Presionar la perilla lateral o eyector de puntas.
F) Sumergir la punta en el líquido.
G) Identificar claramente la micropipeta, su capacidad de volumen y las graduaciones
que posee
H) Soltar el émbolo suavemente para evitar salpicaduras
I) Apretar suavemente el émbolo hasta el segundo tope.
J) Colocar la correspondiente punta firmemente.
K) Ubicar un recipiente adecuado y debidamente rotulado para descartar las puntas
usadas.
L) Establecer el volumen a dispensar, ajustando mediante la perilla de ajuste hasta 8.5
μL.

R= La micropipeta sería la P10 que es de 1 a 10 μl

G, L, J, C, F, A, I, D, H, K, E, B

5. Coloque tres ejemplos de micropipetas de distintas marcas (colocar imágenes y

establezca diferencias si las tienen) disponibles en el comercio general (por ejemplo:
Ependorf, BioRad, etc).

Imagen Marca Diferencias

 Micropipeta Manual.
de la marca
Mettler. De canal simple.

Apta para autoclave.

Micropipeta Pipeta codificada por colores

de la marca y etiquetada con volumen
Eppendorf. para una identificación rápida
del tamaño del
volumen/tamaño de la punta.

Puede ser monocanal o

multicanal.

Micropipeta Exactitud y Precisión de clase

de la marca mundial.
Nichiryo.
Es Esterilizable.

Fácil dispensación.

Pesa sólo 70 g, siendo la

más ligera del mundo.

6. Para que se utilizan las puntas con filtro.

R: Las puntas con filtro están diseñadas para su empleo en la rutina diaria donde se
necesite pipetear sustancias que podrían contaminar la micropipeta o sus muestras.
Estos agentes contaminantes pueden ser productos químicos volátiles, corrosivos o
viscosos.

7. ¿Para qué se puede utilizar la micropipeta de repetición y qué punta utiliza?

R: Se pueden utilizar como en la preparación diluciones seriadas, en la preparación de
placas de ensayo o en laboratorios para transferir volúmenes de líquidos de manera
precisa y repetitiva. Son ideales para experimentos que requieren la transferencia de un
volumen específico de líquido varias veces. Utilizan una punta llamadas puntas de jeringa
las puntas de jeringa contienen un émbolo de plástico interno que se extiende a lo largo
de toda la punta. Cuando el volumen es 0, en el extremo del émbolo interno se bloquea
el extremo abierto de la punta.

8. Describa el procedimiento que usaría para medir 500 μL en una micropipeta de

repetición.
R: 1. Primero se selecciona la punta adecuada para la micropipeta de repetición, como
en este caso se necesita medir 500 μL se va a utilizar una punta que en su extremo diga
250 μL.
2. Luego, se procede a ajustar el indicador de volumen en la parte superior de la
micropipeta de repetición y se coloca en el número 2 (ya que se multiplica el 250 μL de
la punta por 2) y así darían los 500 μL.
3. Se procede a insertar la punta en el líquido o solución a medir y se aspira lentamente
utilizando el botón de aspiración.
4. Como último paso se dispensa el líquido en los recipientes a colocar, presionando
el botón de la parte superior para así dispensar repetidamente varios volúmenes iguales.

9. Mencione dos aplicaciones en las que se requieren usar micropipetas

R: Imprescindible para tomar y dispensar pequeños volúmenes de líquidos de manera
precisa.
Permite emplear distintos líquidos sin tener que lavar el aparato: para ello, se emplean
puntas desechables

10. En las pipetas P10, P20, P100 a) ¿En cuál hay más tolerancia de error, b) ¿En cuál
hay menos error?
a. Hay más tolerancia de error en la P10
b. Hay menos tolerancia de error en la P100
11. Presente la tabla #1 con sus respectivos datos y calcule la desviación estándar y el
porcentaje de error?
R:
Tabla 1: Mediciones de volumen con la micropipeta.
Mediciones Masa (g) (𝑋𝑖 − 𝑥̅ ) (𝑋𝑖 − 𝑥̅ )2
(µL)
1 1000 µL 1,00 0 0

2 1000 µL 1,01 0,01 0,0001

3 1000 µL 1,00 0 0

4 1000 µL 0,99 -0,01 0,0001

 Promedio (𝑥̅ ) ∑(𝑋𝑖 − 𝑥̅ )2
1,00
0,0002

Cálculos.
Porcentaje del error experimental:
%EE= ((Valor teórico – Valor experimental) / Valor teórico)) x 100
%EE= (1000 – 1,00 / 1000) x 100 = 99,99%

Desviación estándar:

∑(𝑋𝑖− 𝑥̅ )2 0,0002
𝑆=√ =√ = 0,0081649 = 8,1649𝑥10−3
𝑛−1 3

Coeficiente de variación:
C.V (%)= 100*(STD/promedio)
C.V (%)= 100 x (0,0081649 / 1,00) = 0,81%