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Práctica N°2 de laboratorio

USO DEL MICROSCOPIO

Estudiante: Dariam Guerrero, Yomalis Sánchez, Esther de la Cruz y Solani Aybar

Asignatura: Biología general

Profesora: Mercedes Acosta

31 de mayo del 2022

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Introducción:
El microscopio es un instrumento que permite magnificar el tamaño de muestra, por lo que
es imprescindible en el laboratorio de biología, ya que permite observar organismos y
estructuras que a simple vista serían invisibles. Dependiendo del principio en que se basa
la ampliación existen diferentes tipos de microscopios.

Tipos de microscopio:
Existen varios tipos de microscopios, dependiendo de las características de las muestras o
especímenes a estudiar. Entre los principales, podemos encontrar el microscopio óptico o
de luz y el microscopio electrónico.

Microscopio óptico o de luz

Este tipo de microscopio utiliza un rayo de luz para iluminar los objetos, que son
magnificados y enfocados por lentes de cristal. Los microscopios de luz más comunes son
el estereoscopio (microscopio de disección o lupa) y el microscopio compuesto.

El estereoscopio se utiliza para observar objetos de aproximadamente 0,05 a 20 milímetros.

El microscopio compuesto se utiliza para estudiar objetos o secciones finas, entre
aproximadamente 0,2 a 100 micrómetros. Para observar los detalles celulares, se usan
tinciones que resaltan las partes de lo que deseamos estudiar.

Existen distintos tipos de microscopios compuestos especializados, como son los

siguientes:

Microscopio de campo claro: El nombre se refiere al tipo de iluminación que se emplea

para observar un espécimen, para así formar una imagen a partir de un corte histológico
con luz visible. En general, con este microscopio se pueden alcanzar los 1.000 aumentos,
pudiéndose llegar con ciertas modificaciones a 2.000 y 3.000 aumentos.

El microscopio de fluorescencia: es una variación del microscopio de luz ultravioleta en el

que los objetos son iluminados por rayos de una determinada longitud de onda. La imagen
observada es el resultado de la radiación electromagnética emitida por las moléculas que
han absorbido la excitación primaria y reemitido una luz con mayor longitud de onda. Para
dejar pasar sólo la emisión secundaria deseada. La microscopía de fluorescencia se utiliza
para detectar sustancias con autofluorescencia como la vitamina A o sustancias marcadas
con fluorocromos.
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Microscopio electrónico:

El microscopio electrónico es aquél que utiliza electrones en lugar de fotones o luz visible
para formar imágenes de objetos diminutos. Los microscopios electrónicos permiten
alcanzar ampliaciones hasta 5000 veces más potentes que los mejores microscopios
ópticos, debido a que la longitud de onda de los electrones es mucho menor que la de los
fotones "visibles". Existen dos tipos de microscopios electrónicos:

Microscopio electrónico de transmisión (MET): trabaja “iluminando” un ejemplar en la

platina con un haz de electrones, los cuales atraviesan la muestra (debidamente
deshidratada), enfocando y aumentando la “imagen” con lentes magnéticas. Esta imagen
electrónica, que es invisible, se transforma en una imagen digital, visible en una pantalla de
un monitor.

Microscopio electrónico de barrido (MEB): trabaja examinando la superficie de un objeto

con un delgado haz de electrones (sirve para examinar la superficie de los objetos) y
observar la ultraestructura.

Objetivos:

1. Conocer las funciones de las distintas partes del microscopio óptico.

2. Realizar enfoques con el microscopio.

3. Diferenciar un microscopio óptico de un estereoscopio

Materiales:

Laboratorio: Portaobjeto, cubreobjetos, tijeras, goteros, pinzas, rojo de metilo, cebolla,

papel periódico y agujas. Microscopio óptico y microscopio estereoscópico.

Procedimiento:

A. Tome un microscopio de campo claro y localice, siguiendo la figura anexa, las

siguientes partes:

1. Base: Sostén del instrumento.

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2. Columna o brazo: Sostiene los lentes oculares y los lentes objetivos.

3. Platina: Superficie para colocar la laminilla.

4. Ajuste mecánico de la platina o carro de la platina: Ajuste para mover la laminilla de

arriba hacia abajo y de izquierda a derecha.

5. Revólver: Contiene los lentes objetivos.

6. Lentes objetivos: Lentes principales del microscopio. Estos lentes son parafocales
porque permiten que la imagen quede casi enfocada al cambiar de objetivo.

Usualmente hay cuatro lentes objetivos:

a. Rastreo o explorador
b. – magnifica cuatro veces (4x)
c. b. Baja potencia – 10x c. Alta potencia – 40x
d. d. Inmersión de aceite – 100x

7. Cabezal: Contiene los lentes oculares.

8. Lentes oculares: El microscopio es monocular si tiene un ocular y binocular si tiene
dos oculares. Los oculares magnifican diez veces (10x) y uno de ellos puede tener un
puntero.
9. Anillo de enfoque del lente ocular izquierdo: Se usa para enfocar bien la imagen
con el ojo izquierdo luego de haber enfocado con el ojo derecho; este ajuste compensa
por la diferencia entre la agudeza visual de ambos ojos.
10. Ajuste de distancia interpupilar: Aumenta o disminuye la distancia entre los lentes
oculares para compensar por diferencias en la distancia entre los dos ojos.
11. Tornillo macrométrico o ajuste grueso: Sube y baja la platina rápidamente; sólo se
usa con los lentes objetivos de 4x y 10x.
12. Tornillo micrométrico o ajuste fino: Sube y baja la platina muy lentamente; se usa
con todos los lentes objetivos para perfeccionar el enfoque de la imagen.
13. Iluminador o lámpara: Provee una intensidad variable de iluminación.
14. Interruptor: Prende y apaga el iluminador.
15. Indicador de encendido.
16. Ajuste de iluminación: Controla la intensidad de la iluminación.
17. Condensador: Enfoca la luz en el plano de la laminilla.
18. Ajuste del condensador: Sube y baja el condensador, aunque éste siempre debe
quedar un poco por debajo de su posición más alta.
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19. Diafragma: Controla el diámetro del rayo de luz que llega a la laminilla (no debe
usarse para aumentar o disminuir la intensidad de la iluminación). Al disminuir la
apertura del diafragma, se aumenta el contraste de la imagen y la profundidad del foco,
pero se disminuye la resolución. Para obtener la mejor imagen posible hay que
cambiar la apertura del diafragma cada vez que cambia el lente objetivo.

Nota: Nunca mueva el microscopio mientras esté encendido porque puede dañar la
lámpara.

No olvide que antes de guardar el microscopio debe: limpiarlo, colocar el objetivo de

menor aumento y enrollar el cable.

Ocular

Cabezal

Portaobjeto

Objeto

Platina

Base

Figura 1 Partes del microscopio (propia del autor)

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Brazo
Diafragma

Tornillo
micrométrico y Condensador
macrométrico

Figura 2

Partes del microscopio (propia del Tornillo

autor) condensador

Tornillo carro
móvil

Figura 3

Partes del microscopio (propia del

autor).
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B. Diferencias entre un microscopio de campo claro y un estereoscopio.

Tome un estereoscopio y distinga sus partes. Compare el estereoscopio con un microscopio
de campo claro. Escriba las diferencias entre ellos.

Ocular

Mando de Objeto
enfoque

Platina

Luz

Base

Figura 4

Partes del microscopio (propia del autor).

Pinzas

C. ¿Cómo hacer un enfoque en el microscopio?

Ubique el objetivo de menor aumento en posición de enfoque. Luego, ponga una muestra
de epidermis de cebolla en un portaobjetos, junto con una gota de agua destilada y tape con
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el cubreobjetos. Seguidamente, coloque el portaobjetos en el área de la platina de manera

que la muestra quede justo arriba del orificio de la platina. Mirando por el ocular, mueva el
tornillo macrométrico hasta que no pueda bajar más sin forzarlo, luego en sentido contrario
(hacia arriba), mueva el tornillo macrométrico hasta que localice la imagen. Ya localizada
la imagen, si no se ve con claridad, utilice el tornillo micrométrico. Dibuje lo observado.
Usando los tornillos del carro de la platina, mueva la muestra en varias direcciones. Si necesita
hacer enfoques, use el tornillo micrométrico.

D. Poder de magnificación:
El aumento final conseguido en la muestra observada en el microscopio es igual al
producto de los aumentos del objetivo por los del ocular. Cualquier microscopio tiene un
límite de magnificación, que se denomina "poder de magnificación". Para saber cuántas
veces está aumentada la imagen observada realice la siguiente operación:

𝑨𝒖𝒎𝒆𝒏𝒕𝒐 𝒅𝒆𝒍 𝒐𝒄𝒖𝒍𝒂𝒓 × 𝑨𝒖𝒎𝒆𝒏𝒕𝒐 𝒅𝒆𝒍 𝒐𝒃𝒋𝒆𝒕𝒊𝒗𝒐 = 𝑨𝒖𝒎𝒆𝒏𝒕𝒐 𝒕𝒐𝒕𝒂𝒍 𝒅𝒆 𝒍𝒂 𝒊𝒎𝒂𝒈𝒆𝒏

1) Coloque nuevamente la muestra de epidermis de la cebolla en el área de la platina,

ajuste el enfoque en el objetivo explorador 4x. ¿Cuánto es el aumento total de esta imagen?

2) Proceda ahora a cambiar al objetivo 10X. Ajuste el enfoque con el tornillo

micrométrico. ¿Cuánto es el aumento total de esta imagen? Repita la misma operación con
el objetivo 40X. ¿Cuánto es el aumento total de esta imagen?

E. Características de la imagen al microscopio

1) Recorte la letra e del periódico, colóquela en un portaobjetos y tape con el cubreobjetos.
Ubique el portaobjeto en la platina del microscopio. Enfóquela de acuerdo con lo
aprendido. ¿Cómo se observa la imagen? Dibújela.
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2) Ahora, manteniendo el enfoque con el objetivo de menor aumento (4X) y sin despegar
los ojos de los oculares, mueva los tornillos de la platina hacia la izquierda y hacia la
derecha ¿Hacia dónde va la imagen en ambos casos? Haga un dibujo y señale el
movimiento de estas con flechas

Movimiento hacia la izquierda Movimiento hacia la derecha

3) Tome un fragmento de una hoja de mango (Mangifera indica) y colóquela en el

microscopio estereoscópico o lupa. Utilice el mando de enfoque para ajustar la imagen.
Dibuje lo observado.

Resultados:
 Dibujo de la epidermis de la cebolla, observado con el objetivo explorador (4X) y
con el ocular de 10X. Indique el aumento total de esta imagen.

4X * 10X= 40X

Figura 5

Partes del microscopio (propia del autor).

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 Dibujo de la epidermis de la cebolla, observado con el objetivo de 10X y con el

ocular de 10X. Indique el aumento total de esta imagen.

10X * 10X= 100X

Figura 6

Partes del microscopio (propia del autor).

 Dibujo de la epidermis de la cebolla, observado con el objetivo de 40X y con el

ocular de 10X. Indique el aumento total de esta imagen.

40X * 10X= 400X

La célula
Figura 7

Partes del microscopio (propia del autor).

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 Dibujo de la letra e observada en el microscopio. ¿Cómo se observa la imagen?

La foto se observa al revés

Figura 8

Partes del microscopio (propia del autor).

 Dibujo que indique el desplazamiento de la letra e al mover la platina del

microscopio hacia la izquierda y hacia la derecha.

A la derecha A la izquierda

Figura 9 Figura 10

Partes del microscopio (propia del autor). Partes del microscopio (propia del autor).
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 Dibujo del fragmento de la hoja de mango observado en el microscopio

estereoscópico o lupa.

Figura 11

Partes del microscopio (propia del autor).

Ejercicios:

¿Qué partes conforman el sistema óptico del microscopio de

campo claro?

Ocular: Lente situada cerca del ojo del observador. Su magnificación es

generalmente 10X.

Objetivo: Lentes situadas cerca de la preparación. Generalmente las

magnificaciones de los objetivos secos son de 4X (objetivo de rastreo), 10X
(objetivo de baja potencia) y 40 ó 45X ( objetivo de alta potencia). El objetivo de
inmersión en aceite es de 100X.

Diafragma: Utilizado para regular la cantidad de luz que entra en condensador.

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Condensador: Lente que concentra la fuente de luz sobre la preparación.

Foco o fuente de iluminación: Dirige los rayos luminosos hacia el condensador.

Nombre las partes que conforman un microscopio estereoscópico.

Pie
Tubo
Revolver
Columna
Platina
Carro
Tornillo macrométrico
Tornillo micrométrico

Bibliografía:

Introducción, I. (n.d.). Ejercicio 2. Uso y cuidado del microscopio Preparado por: Prof.

Ángel A. Ortiz-Vélez. Tripod.Com. Retrieved June 1, 2022, from

https://members.tripod.com/biol_uprponce/images/pdfs/ag04/Lab_02_3013_Micros

copio_bs.pdf

Partes del estereoscopio. (2017, April 17). Partesdel.com; Partesdel.com.

https://www.partesdel.com/estereoscopio.html