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UNIVERSIDAD INTERAMERICANA DE PUERTO RICO

RECINTO DE ARECIBO
DEPARTAMENTO DE CIENCIAS Y TECNOLOGIA
LABORATORIO CONCEPTOS BASICOS DE BIOLOGíA
BIOLOGÍA 1006
LABORATORIO 3: EL MICROSCOPIO

OBJETIVOS

1. Nombrar y describir la función de las partes básicas de un microscopio compuesto.

2. Describir el concepto de profundidad de foco e inversión de imagen que ocurre al utilizar


el microscopio.

3. Calcular la magnitud total utilizando los lentes de rastreo,baja, alta potencia e inmersión
de aceite.

INTRODUCCION

Muchos organismos vivientes o partes importantes de estos son muy pequeños e imposibles de
observar a simple vista. Por tal razón, muchos hallazgos biológicos se han realizado gracias a la
invención del microscopio.

Existen distintos tipos de microscopio, entre los que se encuentran el microscopio de luz, de
electrones, de contraste de fases, de ultravioleta, de fluorescencia y otros. El microscopio de luz
es el más común en los laboratorios.

El microscopio de luz aumenta y enfoca los rayos de luz por medio de lentes. Los rayos de luz
pueden ser naturales (del sol) o artificiales (luz fluorescente). Tenemos dos microscopios de
luz, el de disección (esteroscopio) y el microscopio compuesto. El microscopio de disección se
usa para estudiar especímenes a baja magnificación. Permite observar el objeto en su totalidad.
El microscopio compuesto, utiliza dos o más lentes y se usa para estudiar estructuras pequeñas,
ya que éstas se pueden aumentar aún más. El microscopio compuesto se puede utilizar a varias
magnificaciones y se puede apreciar más detalles de la muestra.

La resolución es la capacidad del microscopio de distinguir algún detalle de la muestra como dos
puntos separados aunque estos se ubiquen relativamente cerca el uno del otro. Esta capacidad de
resolución es la diferencia principal entre el microscopio de luz y el de electrones. Este último
tiene una mejor resolución y por lo tanto se pueden observar estructuras aún más pequeñas.
PARTES DEL MICROSCOPIO COMPUESTO

1. Lente ocular
Es un lente de aumento con una potencia de 10x por donde se mira directamente en el
microscopio. Algunos oculares tienen un indicador que facilita la localización de algún
punto específico bajo observación. Este indicador se mueve haciendo girar el lente ocular.

2. Objetivos:

a. Objetivo de rastreo (4X): Se usa para rastrear y centralizar un objeto o para examinar
especímenes grandes. Permite una mayor cobertura del área bajo investigación.

b. Objetivo de baja potencia (10x) - lente de aumento con una potencia de 10X, o sea,
que aumenta 10 veces el tamaño de la imagen.

c. Objetivo de alta potencia (40x) - lente de aumento con una potencia de 40X, o sea ,
que aumenta 40 veces el tamaño de la imagen.

d. Objetivo de inmersión de aceite (100x) - se utiliza para examinar especímenes


sumamente pequeños tales como bacterias. Hay que colocar una gota de aceite especial
sobre la laminilla y luego enfocar con este lente sumergido en el aceite. El aceite evita la
dispersión de la luz, produciendo una imagen más definida.

3. Brazo
Columna inclinada en la parte central posterior del microscopio. Para mover el microscopio
de un lugar a otro se debe sujetar el brazo y la base del microscopio. Siempre debe sujetar
el microscopio con ambas manos, y nunca debe arrastrarlo sobre la mesa de trabajo, ya que
se pueden desalinear los lentes.

4. Base
El soporte del microscopio en la parte inferior del mismo.

5. Platina o Plataforma
Base cuadrada donde se coloca la laminilla para su estudio . Tiene un orificio en el centro
que permite el paso de la luz. Para poder ver la imagen, la luz tiene que pasar por esa
apertura, iluminando la laminilla.

6. Agarraderas
Piezas metálicas sobre la platina que sostienen la laminilla en posición. Las agarraderas
pueden estar controladas por dos tornillos que permiten mover la laminilla vertical y
horizontalmente, para ayudar en la búsquda de estructuras microscópicas.
7. Revólver
Pieza giratoria que sostiene los lentes objetivos y permite el intercambio de los mismos.

8. Tornillo de ajuste macrómetro


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Tornillo más grande al lado de la platina y pegado al cuerpo del microscopio. Mueve la
platina o tubo que sostiene los objetivos para localizar y enfocar la imagen. Este tornillo
realiza movimientos amplios.

9. Tornillo de ajuste micrómetro


Tornillo más pequeño que permite producir un enfoque preciso de la imagen. Se usa con
los
objetivos de mayor potencia. Al haber una distancia mucho más reducida entre el objetivo
y la laminilla es importante evitar quebrar o romper la laminilla.

10. Fuente de luz


Usualmente es una pequeña bombilla localizada sobre la base. Algunos microscopios
antiguos tienen un espejo movible para reflejar la luz solar en la laminilla.

11. Diafragma
Disco achatado debajo de la platina que regula la cantidad de luz que pasa hacia la
laminilla. Para graduar la luz se da vueltas al disco o se mueve la palanca hasta que se
obtenga la intensidad de luz apropiada para la muestra bajo observación.

12. Condensador
Lente localizado debajo del diafragma que concentra la luz antes de llegar a la muestra.

INSTRUCCIONES PARA USAR EL MICROSCOPIO

1. Los lentes del microscopio se deben limpiar siempre antes y después de usarse con papel de
lente.
2. La laminilla a examinarse debe colocarse sobre la platina, centralizando el área del
cubreobjetos en la abertura de la misma. Se coloca el objetivo de rastreo (4X) en posición y
se mira por el ocular para localizar la imagen en el área observada, la cual llamamos el
campo visual. Tan pronto se localice algo en el campo visual se debe enfocar usando el
tornillo de ajuste macrométrico hasta obtener una imagen clara.
3. La luz se debe ajustar a tono con el tamaño y espesor del espécimen observado y la potencia
en uso. Gradúe la intensidad de la luz y el área iluminada con el diafragma y el condensador
hasta lograr la mejor visión posible del objeto bajo observación.
4. Cuando vaya a usar el objetivo de alta potencia debe tomar en consideración el tipo de
microscopio que esté usando. En un microscopio parafocal todo lo que hay que hacer es
girar el revólver hasta que el objetivo de alta potencia esté en posición y la imagen queda
enfocada automáticamente. Tal vez haya que hacer pequeños ajustes en el enfoque con el
tornillo de ajuste micrométrico y la iluminación con el diafragma.
5. Al finalizar sus observaciones debe entregar su laminilla al instructor, apagar el microscopio,
enrollar el cable, bajar la platina y colocar el objetivo de rastreo en posición.

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TÉRMINOS DE INTERÉS

1. Distancia de Trabajo
Cuando vemos un espécimen a través del microscopio compuesto, el objetivo debe estar
localizado a una distancia adecuada para que se vea en foco. Esta distancia entre el lente
objetivo y el espécimen se conoce como distancia de trabajo y es constante para cada
objetivo.

Objetivos Distancia de Trabajo (mm)


4x 25 - 55
10x 5 - 10
100x 0.15 - 0.60

Aunque cada objetivo tiene una distancia de trabajo diferente, estos se han alineado en el
revólver de forma que el espécimen quede enfocado al intercambiar objetivos.

2. Profundidad de Foco
Cualquier espécimen observado en una laminilla tiene profundidad, además de longitud y
ancho.
La distancia vertical en la que el espécimen permanece en foco se denomina profundidad de
foco. La profundidad de foco es constante para cada objetivo. Mientras mayor sea la
magnificación de un objetivo, menor será la capacidad de este para enfocar la profundidad de
un espécimen. Los objetivos de rastreo y baja potencia son mejores que el objetivo de alta
potencia para tener una idea general de la estructura tridimensional de la muestra, ya que se
puede ver mayor profundidad de foco al mismo tiempo.

3. Magnificación
El aumento es el producto de la magnificación del lente objetivo multiplicado por la del
lente ocular, según se indica en la tabla a continuación.

Lente Ocular Lente Objetivo Magnificación Total


10x 4x 40x
10x 10x 100x
10x 40x 400x
10x 100x 1000x

4. Inversiones
Fenómeno en el cual la óptica del lente cambia la posición original de la imagen.

MATERIALES

Laminilla de la letra "e" Pipeta Pateur


Laminilla de hilos coloreados Bulbos de látex o goma
4
Caja de laminillas con depresión o concavidad Vaselina y palillos de diente
Caja de laminillas planas Agua estancada
Caja de cubreobjetos Papel de lente

PROCEDIMIENTO

Parte I. Localice en la mesa del instructor una laminilla con la letra ‘‘e’’.

1. Observe la laminilla a simple vista y tome una foto de lo observado en el espacio siguiente:

2. Coloque la laminilla en la platina en la misma perspectiva y posición en que la observara.


Enfoque con el objetivo 4x y dibuje (Tome una foto) la imagen en el espacio siguiente.
Utilice el tornillo macrométrico y los tornillos laterales para localizar y enfocar la letra “e ”.

40x

Fíjese que la imagen del microscopio está invertida.

3. Mientras observa la imagen por el microscopio, mueva lentamente la laminilla hacia la


izquierda. ¿Hacia dónde se mueve la imagen?
_______________________________________________________________

5. Mueva la laminilla hacia usted. ¿Hacia dónde se mueve la imagen?

5
________________________________________________________________

6. Luego de enfocar la laminilla con la letra “e” utilizando el lente 4x, cambie el lente objetivo
al de 10x girando el revólver. La imagen debe permanecer enfocada. Si necesita aclarar la
imagen utilice el tornillo de ajuste macrométrico. Dibuje (Tome una foto) en el espacio
siguiente la imagen que observa en el campo visual.

100x

7. Cambie ahora del objetivo 10x al de 40x. La imagen debe permanecer en foco. Si necesita
aclarar más la imagen utilice solamente el tornillo micrómetro. Dibuje (Tome una foto)
en el espacio siguiente la imagen que observa en el campo visual.

400x

Parte II. Obtenga una laminilla con hilos a colores para estudiar la profundidad de foco.

Al examinar muestras en el microscopio no siempre se puede enfocar todo de una vez debido a
la profunidad del espécimen. Por lo tanto se hace necesario enfocar ciertas secciones a distintas
alturas.

1. Coloque la laminilla con hilos a colores en la platina de su microscopio. Usando el objetivo


de menor aumento, localice el punto donde los tres hilos se cruzan.

2. Determine el orden de los hilos de arriba hacia abajo utilizando el lente objetivo de 10x
(100x magnificación total) y enfocando con el tornillo micrométrico. Según vaya
enfocando, notará que los hilos enfocan a diferente nivel. Ya que los hilos están colocados
uno arriba del otro, en conjunto son más gruesos que la profunidad de foco del lente
objetivo. Un hilo o parte de éste estará en foco mientras que los otros se verán borrosos.
Enfocando hacia arriba y hacia abajo sobre los hilos, usted puede percibir la profundidad de
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foco que no es evidente cuando el enfoque se deja en un mismo punto. De no estar seguro,
confirme su observación con el lente de 40x (magnificación total 400x).

POSICION COLOR DEL HILO


Superior
Central
Inferior

III. Ahora que ya sabe como operar un microscopio, examine la laminilla preparada de uno
de los de los siguientes protistas: Paramecium o Amoeba. Dibuje (Tome una foto) la
imagen a 40x, 100x y 400x.

100x

400x

El organismo observado ¿es eucariota (con núcleo) o procariota (sin núcleo)?


_________________

7
¿Es unicelular o multicelular? __________

Parte III: Técnica de Montaje Húmedo

1. Transfiera una gota de la muestra a una laminilla plana usando una pipeta Pasteur. La
gota debe contener del fondo del envase.
2. Coloque un cubreobjetos evitando formar burbujas de aire.
3. Examine la muestra de agua con los objetivos de baja y alta potencia.
4. Dibuje (Tome una foto) lo observado.

400x
T

Parte IV: Técnica de la Gota Colgante

1. Coloque vaselina en los bordes de la depresión en la laminilla.


2. Coloque una gota de la muestra de agua en el centro de un cubreobjetos.
3. Cubrir el cubreobjetos con la lamilla. La depresión debe quedar sobre la muestra de agua.
4. Rápidamente invierta la laminilla.
5. Examine la preparación con los objetivos de alta y baja potencia.
6. Dibuje (Tome una foto) lo observado.

400x

Hoja para entregar

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Ejercicio de Laboratorio # 3 del Microscopio

NOMBRE______________________________ FECHA______________________

1. Observación a simple vista de la laminilla de la 3. Observación Protista


letra e Género: ___________________

Observación de la letra e por el microscopio Eucariota o Procariota ____________


40x Unicelular o multicelular___________

4. Observación de organismos en gota


montaje húmedo
400x

100x

6. ¿Qué pasó con la letra e a medida


que aumentaba la
magnificación?_____
_______________________________
_______________________________
7. ¿Qué pasó con el área observada o
campo visual?____________________

_________________________________
_______________________________
_
3. Observación de hilos de colores
8. ¿Cuándo movió la letra e hacia la
Posición Color del hilo izquierda, hacia donde se movió la
Superior letra e?
Central __________________________
Inferior 9. A qué se debe este fenómeno?
________________________________ 4. ¿Su
microscopio es parafocal? ________________________________
¿Por qué sí? ¿Por qué no? ________________________________
___________________________________
___________________________________
Identifique cada parte del microscopio: Para adjuntar junto a la hoja de entrega.

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1. _______________________________
2. _______________________________
3. _______________________________
4. _______________________________
5. _______________________________
6. _______________________________
7. _______________________________
8. _______________________________
9. _______________________________
10. _______________________________
11. _______________________________
12. _______________________________

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