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CÓDIGO: FO-DOC-112

UNIVERSIDAD DE LOS LLANOS VERSIÓN:


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PROCESO GESTION DE APOYO A LA ACADEMIA FECHA: 02/09/2016
FORMATO GUÍA PARA PRÁCTICAS DE LABORATORIO VIGENCIA: 2016

LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA
UNIDAD
ACADEMICA: PROGRAMA DE ENFERMERIA
CURSO: MICROBIOLOGIA Y PARASITOLOGIA
OTROS MICROORGANISMOS DE IMPORTANCIA CLINICA -
PRACTICA Nº 8: IDENTIFICACIÓN DE HONGOS DIRECTA Y EN CULTIVO

1. OBJETIVOS

 Identifica las características morfológicas de los hongos.


 Describir como es el comportamiento de los hongos en los medios de cultivo.
 Conocer los hongos ambientales que se aíslan con mayor frecuencia a partir de diferentes
ambientes.
 Diferenciar las colonias de hongos levaduriformes de las de los hongos filamentosos.
 Realizar montajes microscópicos a partir de colonias de Agar PDA.
2. CONSULTA PREVIA
 Que son hongos unicelulares, filamentosos y dimorfos?
 Como es el aspecto macroscópico de las colonias de hongos?
 Cuáles son las sustancias químicas o compuestos químicos más utilizados en el montaje de
micología? y cuál es su fundamento?
 Defina que es: micelio, hifa, espora, conidia, hifa septada, hifa cenocítica, esporangio,
conidióforo, blastoconidias.
 Cuál es la importancia de conocer los hongos contaminantes del ambiente y cuáles son los
más conocidos.

3. FUNDAMENTO TEORICO
En biología, el término Fungi (latín, literalmente "hongos") designa a un grupo de
organismos eucariotas entre los que se encuentran los mohos, las levaduras y las setas. Se han
descrito más de 80.000 especies de ellos, pero poseen importancia médica menos de 400 y
menos de 50 especies son las encargadas de más del 90% de las micosis de humanos y
animales. Muchos hongos son aerobios obligados o facultativos.

Los hongos pueden ser unicelulares (como las levaduras), o multicelulares (hongos filamentosos); sin
embargo, existen hongos pleomórficos, que de acuerdo al medio en el cual se encuentren, desarrollan un
crecimiento filamentoso o un crecimiento de tipo levadura. Estos últimos son principalmente hongos
patógenos.

Las levaduras son hongos unicelulares de forma esférica, alargada u oval y con diferentes colores (blanco, rosado,
beige o rojo). Su tamaño oscila entre 2,5–10 x 4,5-21 µm. Son anaerobios facultativos, siendo las levaduras
aeróbicas productoras de CO2, agua y biomasa relativamente alta y las levaduras anaerobias, fermentadoras de
azúcar en alcohol, CO2 y menos biomasa. La mayoría son mesófilas, con una temperatura máxima de crecimiento

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entre 24 y 48ºC, crecen en un rango amplio de pH entre 2,5 y 8. No presentan mecanismos de locomoción, por
lo que únicamente pueden ser transportadas a través de corrientes de aire, fluidos o por insectos

En comparación con las levaduras, los hongos filamentosos (mohos), presentan un desarrollo de estructuras
denominadas talo, que está compuesto a su vez por hifas ramificadas y que en su total, conforman el micelio del
hongo (que es macroscópicamente observable). Estas hifas, a su vez, pueden presentar septos o tabiques
transversales, conformando el micelio tabicado o septado (las hifas septadas a su vez, pueden contener un núcleo
o varios núcleos formando células multinucleadas). De forma contraria, en algunas Clases de hongos, las hifas son
continuas (sin ningún tipo de separaciones), denominándose hifas cenocíticas, como en los hongos de la Clase
Zygomycetes.

4. EQUIPOS, MATERIALES Y REACTIVOS


Equipos Materiales Sustancias y/o Reactivos
Aguja de disección recta y
curva
pinzas
Azul de Lactofenol
Gasa
Microscopio KOH
Algodón
Alcohol al 70%
Laminas
Laminillas
Cultivo de Hongos

5. PROCEDIMIENTO O METODOLOGÍA

 Desinfectar el área de trabajo, encender el mechero.

 Observar las diferentes colonias presentes en el agar PDA y describirlas.

◦ Proceder a hacer montajes de las diferentes colonias (de acuerdo a las indicaciones de la
docente).

Montaje en portaobjetos:
◦ Depositar una gota de azul de Lactofenol en una lámina.
◦ Tomar el cultivo y cortar con aguja de disección estéril, en un lugar intermedio entre el
centro y el borde de la colonia, efectuando dos cortes en cuña, sin importar que se tome
parte del agar.
◦ Tomar el fragmento de colonia y colocar sobre la gota de azul de Lactofenol, abrir el
fragmento con ayuda de la aguja de disección, para dejar más delgada la preparación.

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◦ Cubrir con una laminilla, si se ha incluido agar, tomar la laminilla con unas pinzas y
calentarla suavemente para difundirlo, evitando romper la laminilla; luego ajústela con el
mango de la aguja.

Preparación en cinta engomada o impronta:

Se coloca una gota del colorante Azul de Lactofenol sobre la superficie de un portaobjeto. Utilizando cinta
trasparente, presionar suavemente la parte adhesiva sobre la superficie de la colonia, procurando adherir una
porción de micelio aéreo a esta. Pegar un extremo de la cinta sobre la superficie del portaobjetos, a un lado de la
gota del colorante y con cuidado pegar la cinta con la muestra sobre la gota del colorante, para que el micelio
aéreo se impregne con éste. Durante el procedimiento debe evitarse la acumulación de burbujas de aire, para
evitar la aparición de estructuras que dificulten la observación. Llevar al microscopio hasta objetivo 40x.

 Observar al microscopio en objetivo de 10x y luego 40x. Observar el aspecto general, ancho
del micelio, septos, y posible presencia de conidios.

6. RESULTADOS

 Observe en un atlas de micología las estructuras estudiadas en clase, despeje dudas y


escriba los nombres científicos de cada estructura observada, y perfeccione los dibujos
realizados en clase, regístrelo en su cuaderno. No olvide que estos resultados también hacen
parte de los resultados del proyecto de aula.

7. BIBLIOGRAFIA

 Arenas, Roberto. Micología Medica Ilustrada. Edicion: 3ª. Año: 2008.


 Jawetz, Melnick y Adelberg. Microbiologia medica. Ed. Mc Graw Hill. 25 ed. 2010.
 Lennette, Balows y otros. Manual de microbiología Clínica. Ed. Médica panamericana.
 www.bact.wisc.eduu/Bact330/Bact330homepage
 www.altillo.com/medicina/microbiologia/bacterias.asp
 www.microbiol,org/vlmicro/index.html
 www.microbiol,org/vlmicro/index.html

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