Aislamiento del glucógeno

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Milka Mojica; 2Nicolle Fuentes
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4-847-1628; 24-806-1856
Curso de Bioquímica (380 L), Escuela de Química, Facultad de Ciencias Naturales y Exactas,
Universidad Autónoma de Chiriquí. David, Chiriquí, Republica de Panamá. E-mail:
milka.mojica@unachi.ac.pa; nicolle.fuentes1@unachi.ac.pa

Resumen.
El presente informe se ejecutó con la finalidad de extraer el glucógeno presente en una muestra de
hígado de pollo, como también de caracterizar el glucógeno mediante pruebas químicas. Para lograr
los fines de este ensayo se realizó en primera instancia un corte de 10g de hígado de pollo. Posterior
a esto se realizó un tratamiento de la muestra con una base fuerte hasta extraer el glucógeno del tejido
de hígado y se llevó a baño maría por 40 minutos, con agitación cada que se requería. Culminado
este periodo se enfrió y se procedió a realizar los pasos necesarios para separar el glucógeno disuelto
en la solución con ayuda de etanol al 95 %. Seguidamente se centrifugo la muestra y se empleó una
prueba cualitativa para la identificación de carbohidratos, utilizando la prueba de Molish observamos
un cambio de color (Figura 1). Culminado esta experiencia pudimos comprobar la presencia de
carbohidratos en el hígado de pollo, ya que el glucógeno está compuesto de ramificaciones de glucosa.
Se recomienda que para la realización del laboratorio el hígado este fresco, ya que este tiene niveles
de glucosa más altos en comparación con uno que no este fresco, de esta forma se facilitara la
obtención del anillo violeta característico de los hidratos de carbono.
Objetivos. (glucogenólisis) Su duración en ayunas (del
glucógeno hepático) es de 24 horas
• Extraer el glucógeno presente en una aproximadamente (Méndez, 2020), a partir de
muestra de hígado de pollo. este momento, la concentración en sangre se
• Caracterizar mediante prueba química mantiene por síntesis de glucosa a partir de
el glucógeno. sustancias distintas a los carbohidratos
Introducción. (glucogénesis). En estos mecanismos de
control actúan la adrenalina y el cortisol.
El glucógeno es la forma de almacenamiento
de la glucosa en los tejidos animales. Se La eliminación del glucógeno del tejido se da
encuentra principalmente en el hígado y en el mediante calentamiento, empleando una base
músculo representando hasta un 10% y un 1- fuerte. La extracción de glucógeno indica un
2% de su peso húmedo, respectivamente proceso de homogenización del tejido y
(Peña, 2021). ruptura (Vásquez, 2020)

El glucógeno consta de cadena de glucosa Materiales y Reactivos.

unidas por enlaces glicosídicos α(1-4) y
ramificaciones, cada 8 unidades o 10 unidades,
de glucosa mediante enlace glicosídico α(1-6).
También actúa como regulador de la glucosa
sanguínea, almacenándola como glucógeno
durante una buena alimentación
(glucogenogénesis) y liberada por fosforólisis
KOH al 50 %, etanol al 95%, reactivo de
Molish, 50 g de hígado de pollo, cuchillo, 1
matraz Erlenmeyer de 250 ml y 500 ml,
probetas de 25 ml, 50 ml, 100 ml, baño maría,
plancha, centrifugadora, vasos químicos,
tubos de ensayo.
Metodología.
• Se corto en trozos pequeños 10 g de
hígado de pollo
• Calentamos en un vaso químico de
100mL 36 mL de KOH al 50 %
• Adicionamos inmediatamente los
trozos de hígado en el vaso químico
que contenía el KOH.
• Se calentó en un baño maria durante
40 min, agitando el vaso
• Después de calentar adicionamos 30
mL de agua y 70 mL de etanol.
• El floculado formado es
principalmente glucógeno.
• Tapamos y dejamos reposar por 10
min.
• Luego se adicione la mezcla en los
tubos de centrifugación y se
centrifugo por 5 min. a velocidad
máxima
• Recogimos el precipitado y
ensayamos la prueba de Molish.
Resultados.
Tabla 1. Datos Obtenidos
Compuesto Cantidad
Hígado de 10 g
pollo
Figura 1. Precipitado de glucógeno.
Discusión de resultados.
En esta experiencia de laboratorio se trabajó
con el glucógeno el cual es un polisacárido,
constituido principalmente por largas cadenas
de glucosa unidas por enlaces α(1-4), con
ramificaciones cada 8-10 unidades de tipo α(1-
6), las ramificaciones aumentan la solubilidad
del glucógeno en agua y además incrementan
la velocidad de síntesis y degradación debido
a los extremos no reductores con los que
cuenta (Lucaban, 2015), esta azúcar forma
parte de los hidratos de carbono, los cuales se
pueden diferenciar mediante el uso de pruebas
sencillas de adición de reactivo especifico el
cual nos indica si se trata de un carbohidrato y
de que tipo son. El punto uno fue extraer el
glucógeno de la célula hepática del hígado,
mediante la adición de una solución de
hidróxido de potasio y calor; esto permite
homogenizar la muestra, ya que rompe los
enlaces celulares, hidroliza las proteínas y los
lípidos, y facilita la extracción del glucógeno
del tejido. Posterior a esto se adicionó etanol y
agua, ya que esto disuelve los monosacáridos
que quedan libres y precipita los polisacáridos.
La centrifugación por su parte separa o
precipita el tejido fibroso no digeridos
(Moreno, 2020), para facilitar extraer el
sobrenadante que contiene polisacáridos y
monosacáridos solubles en medio alcalino.
Seguidamente realizamos la prueba con el
reactivo de Molish para comprobar la
presencia de carbohidratos en el hígado de
pollo. Agregamos gotas del reactivo de molish
al precipitado, después de esto se observó la
formación de un anillo morado en el tubo de
ensayo Figura 1, lo que indica que la prueba
dio positiva y que se trato de un hidrato de
carbono; según (Maraña, 2017) si el anillo
violeta se forma de manera inmediata en el
precipitado con el óxido cúprico (Cu2O),
nos demuestra que tenemos un
monosacárido y si se tarda un tiempo más
prolongado se trataría de un disacárido,
en nuestra experiencia la formación del anillo
no fue inmediata, lo que quiere decir que el
carbohidrato era un disacárido.
Conclusión.
 - Comprobamos cualitativamente la
presencia de carbohidrato en una
muestra de hígado de pollo mediante
la prueba de Molish.
- Demostramos mediante la aparición
de un anillo violeta la presencia de
glucógeno.
- Basados en la propiedades químicas
del glucógeno logramos realizar el
aislamiento del mismo.
Referencias
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quimica.es. Revisado junio 18, 2022, de
https://www.quimica.es/enciclopedia/Gluc
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Fernandes, A. Z. (2022, enero 13).
Carbohidratos: qué son, estructura y tipos.
Toda Materia. Revisado Junio 18, 2022, de
https://www.todamateria.com/carbohidrat
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BIOQUÍMICA. Google Sites. Revisado
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https://sites.google.com/site/laboratoriosbio
quimica/bioquimica-
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Patiño, R. (2018, diciembre 2). Aislamiento
de Glucogeno. PDFCOFFEE.COM.
Revisado Junio 18, 2022, de
https://pdfcoffee.com/aislamiento-de-
glucogeno-6-pdf-free.html