PRACTICA # 15

ACCION DE ANTIOXIDANTES: VALORACION DE VITAMINA C

RELACIÓN DE EXPERIMENTOS

1. Determinación cuantitativa de vitamina C en jugos de frutas cítricas.

OBJETIVOS

1.Cuantificar el contenido de vitamina C en diferentes frutos

Interpretar el fundamento de la determinación de vitamina C.

INTRODUCCION

Las vitaminas son compuestos orgánicos de estructura química diversa, que

cumplen destacada función, en el mantenimiento de la salud y que al no poder ser
sintetizadas por el organismo, deben ser ingeridas necesariamente en la
alimentación no obstante sólo se requiere de ellas, cantidades muy pequeñas.

Las vitaminas no tienen roles plásticos, ni energéticos y su mecanismo de acción

es básicamente regular el metabolismo directamente o a través de la constitución
de coenzimas y/o grupos prostéticos. No obstante, algunas vitaminas cumplen
además roles específicos.

El indicar la incapacidad de la síntesis de las vitaminas, por los animales

superiores, no es del todo cierto, ya que está demostrado que el ácido nicotínico
(niacina) puede ser sintetizado a partir del aminoácido triptófano. De otro lado,
existen otras vitaminas (ácido pantoténico, biotina) cuyas manifestaciones
carenciales en el hombre, no han podido ser detectadas adecuadamente.
EXPERIMENTO Nº 1

DETERMINACIÓN CUANTITATIVA DE LA VITAMINA C EN PLASMA

SANGUINEO O EN FRUTOS CÍTRICOS

La vitamina C pura (ácido I-Ascórbico) es una sustancia blanca cristalina, de sabor

ácido, insoluble en la mayoría de solventes orgánicos; en el agua su solubilidad es
de 1 g en 3 ml. Tiene un fuerte poder reductor, que deriva de la facilidad con que
puede perder los átomos de hidrógeno que constituyen los grupos hidroxilo unidos
a los átomos de carbono que conforman el doble enlace (eneidiol).

Su función mejor conocida corresponde a su participación en la producción de los

tejidos de origen mesenquimatoso, como el colágeno, dentina, etc. aunque su
mecanismo de acción aún no está aclarado; no obstante se piensa que la síntesis
de hidroxiprolina está perturbada cuando hay un déficit de vitamina C. también se
ha postulado la participación del ácido L. ascórbico en otras reacciones de
hidroxilación, como la conversión del triptófano en serotonina. También se ha
reportado la intervención de la vitamina C en la absorción del Fe en el intestino de
humanos.

Experimentalmente es factible producir escorbuto en el hombre, primates y en el

cobayo. En cambio en otros animales resulta dificultoso en razón a la capacidad
que tienen éstos de poder sintetizar la vitamina. A las manifestaciones clínicas
propias del escorbuto y que se observan muy bien en cobayos, se suman otras
alteraciones bioquímicas, como un metabolismo anormal de la tirosina. En este
sentido la administración de tirosina o fenilalanina, determinan una considerable
excreción urinaria de p-hidroxifenilpirúico. Se asume que la actividad de la p-
hidroxifenilpirúico hidroxilasa que cataliza la transformación del p-
hidroxifenilpinivico en ácido homogentísico, está disminuida en animales
escorbutícos.

La determinación de la vitamina C en líquidos biológicos (suero o plasma

sanguíneo, jugos de frutas) se funda en la reducción del 2, 6 dicloofenolindofenol
en presencia de ácido acético y ácido metafosfórico los que previenen la oxidación
aeróbica de la vitamina y además precipitan a las proteínas.

PROCEDIMIENTO

a) A 2 ml de plasma (o jugo de frutas), añadir un volumen igual de solución

acéticametafosfórica (ácido acético al 8% (p/v) y ácido metofosfórico al 2% (p/v).

b) Titular con una solución 0.05% 2, 6 diclorofenolindofenol, hasta una

coloración rosada débil y persistente durante 5 segundos.

c) Titular un blanco como control (agua en lugar de muestra).

d) Para efecto de los cálculos asuma que cada 1ml de 2. 6

diclorofenolindofenol equivale a 0.12 mg de ácido L-ascórbico.
EXPRESIÓN DE RESULTADOS

En un cuadro anote la concentración de vitamina C en el plasma o las diferentes

soluciones problema (jugos) en mg%.

Muestra 2,6 diclorofenol indofeno9l gastados (ml) Mg. De Ac.

Ascórico/100 ml de jugo

Naranja

Limón

Mandarina

INTERROGANTES

1. Comente brevemente la síntesis de vitamina C en otros animales.

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2. ¿Cómo se explica que la vitamina C no se tal para la rata?

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3. ¿Qué propiedad del ascorbato se utiliza para su determinación?

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4. ¿Cómo determinaría colorimétricamente la vitamina C?

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5. Cite usted las funciones que cumple la vitamina C en humanos.

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6. Explique el fundamento en que se basa la determinación de la vitamina C

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