PRE CAPITULO 15

GENERALIDADES

Tres niveles principales de regulación: ocurre dentro y fuera de la célula

1. Disponibilidad de sustrato: nivel MAS inmediato. EN ambiente intracelular a [] cercanas al

Km de la enzima, pequeños cambios inducen grandes alteraciones en la velocidad de rx
2. Regulación alostérica: control metabólico rápido producido por un intermediario
metabólico o coenzima que sirve como señal que indica el estatus metabólico interno de la
célula.
3. En organismos multicelulares: la actividad metabólica de diferentes tejidos se regula e
integra por factores de crecimiento y hormonas que actúan desde fuera de la célula

😊 Las hormonas tiroideas y sexuales actúan desde dentro de la célula ya que tienen un anillo
esteroideo (Anfipático) pueden entrar al núcleo de la célula. La peptídicas no puede atravesar la
membrana celular, estas usan la transducción celular necesitan un receptor.

4 TIPOS GENERALES DE TRANDUCTORES DE SEÑALES

1. Receptores acoplados a proteína G

2. Receptores Tirosina quinasa
3. Canales iones activados por ligandos
4. Receptores nucleares: activan la expresión génica (esteroides, progesterona)

Regulación e integración del metabolismo por hormonas y factores de crecimiento

 Pueden ser instantáneas (menos de un milisegundo) a través de cambios en los niveles de

mensajeros intracelulares que modifican la actividad de moléculas enzimáticas existentes
por mecanismos alostéricos o modificaciones covalentes (Como fosforilación).
 Pueden tardar minutos u horas en producirse cuando la señal extracelular cambia la [] de
una enzima alterando su velocidad de síntesis (regulación genética) o degradación)

Anabolismo y catabolismo suceden simultáneamente en el organismo manteniendo un estado

estacionario dinámico que provee balance y equilibrio al metabolismo

Principios que determinan la organización del anabolismo y el catabolismo

1. Las biomoléculas son sintetizadas y degradadas en diferentes vías metabólicas y aunque

algunas vías opuestas (sintesis y degradación de un mismo compuesto) compartan
ALGUNAS reacciones reversibles, cada vía tiene AL MENOS una reacción enzimática única
que es irreversible. (RODEO METABÓLICO)
2. Las vías anabólicas y catabólicas de un mismo compuesto están reguladas en una o más
de las reacciones que son UNICAS para cada vía. Usualmente estas son catalizadas por
enzimas reguladoras que modifican su acción en respuesta a una señal.
 Regulación recíproca ocurre de forma coordinada en vías opuestas: la señal que
activa una vía desactiva simultáneamente la vía opuesta
  En vías pareadas anabólicas-catabólicas: La estrategia de control se emplea al
menos una reacción catabólica diferente a la usada en el paso homólogo en la vía
anabólica. Este paso es catalizado por enzimas diferentes: son los puntos de
regulación en donde la reacción es enzima-limitante e irreversible
 Ventaja: Se produce una regulación separada del flujo de la vía en cada dirección,
evitando los “ciclos fútiles”.
3. Las vías metabólicas pareadas usualmente suceden en diferentes compartimientos
celulares
 Las concentraciones de intermediarios, enzimas y reguladores pueden mantenerse
a diferentes niveles en cada compartimiento.
 El control metabólico está sujeto al control cinético por concentración de sustrato,
al estar en diferentes concentraciones en cada compartimiento, esto constituye una
forma de regulación de la actividad enzimática

Ciclo fútil o ciclo sustrato

Ciclo catalizado enzimáticamente que resulta en “desperdicio” de energía metabólica por la síntesis
y degradación simultánea del mismo metabolito. Ejemplo se sintetiza glucosa y se degrada

Factores que afectan la actividad de las enzimas:

1-6: Alterando el número de moléculas de una enzima dentro de la célula o su actividad efectiva
dentro de espacios subcelulares
7-10: Modulando la actividad de las moléculas que ya existen
Puede ocurrir que 1 enzima combine todos los factores para su regulación.
 4. Los procesos anabólicos que requieren energía se acoplan a los procesos de hidrólisis de
ATP (exergónicos), dando lugar a que el proceso sea irreversible (el ∆G de la reacción
anabólica total aun es negativo).

😊 Una rx que no esté catalizada por una enzima reguladora va estar muy cerca del equilibrio si
esta en medio de una vía metabólica. La rx catalizada por una enzima catalizada va a estar
alejada del equilibrio desplazada hacia los productos.
😊 ¿Qué tipo de enzimas responde a la concentración del sustrato?: todas las enzimas responder
a la concentración de sustrato (Enzimas reguladoras, enzimas que siguen la cinética de Michaelis-
Mente)

Nucleótidos de adenina juegan papeles especiales en la regulación metabólica

 Para la célula es excepcionalmente importante mantener sus niveles de ATP y NADH
constantes.
 Los niveles de ATP y AMP son indicadores muy sensibles del estatus energético de la célula.
 Cuando el radio ATP/AMP disminuye, la proteína quinasa activada por AMP (AMPK)
desencadena una variedad de respuestas celulares para elevar la concentración de ATP y
disminuir la de AMP
BIOSEÑALIZACIÓN EN EL METABOLISMO ENERGÉTICO: INSULINA,
GLUCAGÓN Y EPINEFRINA
El sistema exocrino del páncreas: libera enzimas para la digestión.
El sistema endocrino del páncreas: SECRETA HORMONAS
 islotes de Langerhans α: secreta glucagón
 islotes de Langerhans β: secreta insulina
 islotes de Langerhans δ: secreta somatostatina
o Hormona peptídica con efectos reguladores sobre varios tejidos
o Tiene dos isoformas principales.
o Produce efectos inhibitorios sobre secreción de glucagón y otras hormonas.
o Se une a receptores acoplados a proteína Gi (GPCR), por lo que produce
disminución del AMPc intracelular.

Receptores Tirosina quinasa (TKR): Insulina

Cascada de fosforilación
Ras: proteína G pequeña

PKB fosforila GLUT4

RECORDAR
 Hexoquinasa II: muscular
 Hexoquinasa IV: Hepática

Insulina no entra a la célula, inicia una señal que a través de varias vías regula
 1. En el citoplasma: enzimas del metabolismo sensibles a insulina (induciendo cascadas de
fosforilación). Ej. A través de PIP3 activa a PKB, que fosforila a GLUT4 (incrementando
ingreso de glucosa a la célula) y desactivando a la GSK3 (que deja activa al enzima glucógeno
sintasa, favoreciendo síntesis de glucógeno).
2. En el núcleo: transcripción de genes específicos, algunos de ellos inducen proliferación
celular. Ej: Elk-1 modula la transcripción de al menos 100 genes regulados por insulina,
algunos de ellos necesarios para la división celular).

😊 Principales situaciones que desencadenan la liberación de insulina y glucagón

La insulina se secreta cuando aumenta la glucosa sanguínea (>5 mM o 4.5 mM)
El glucagón se eleva cuando disminuye la [] de glucosa sanguínea (<4 mM)

La adrenalina
 se secreta en el momento de “Hit and Run”, secretada por la GLANDULAS SUPRARENALES
 También llamada EPINEFRINA

Receptor: Ligado a Proteína G (así se llama xd)

Subunidad activa: Gsα unida a GDP si la hormona no llega a el receptor esta INACTIVA
Hormona + Receptor = separación de GDP Gsα inactiva -> GTP Gsα activa
Segundo mensajero: cAMP quien activa a PKA (Proteína quinasa A)
Efector: PKA. PKA, fosforila a proteínas celulares blanco que causan la respuesta celular. 😊
 Gs: Estimulante
Gi: inhibitoria
PKA en el núcleo
 En algunos tipos celulares la subunidad catalítica de PKA puede entrar al núcleo, en donde
fosforila a la proteína de unión al elemento de respuesta a AMPc (CREB, cAMP response
element binding protein).
 Al fosforilarla CREB altera la expresión de varios genes regulados por AMPc
Proteínas acopladas a Gq: asociadas a 3 segundos mensajeros (Diacilglicerol, IP3, y Ca2+) para
activar PKC

Cascada de fosforilación de epinefrina mediada por PKA

Glucosa 1- fosfato ->fosfoglucomutasa ->Glucosa 6-fosfato ->glucosa 6- fosfatasa -> glucosa

CONCLUSION
Una señal extracelular que actúa sobre receptores ligados a proteínas G puede tener efectos muy
diferentes sobre diferentes tejidos o tipos celulares, dependiendo de tres factores
 El tipo de receptor en el tejido
 El tipo de proteína G al que está acoplado el receptor.
 El grupo de enzimas blanco de PKA o PKC

CAPITULO 15 PRINCIPIOS DE REGULACIÓN METABÓLICA

REGULACIÓN DE LAS VÍAS METABÓLICAS

Los cambios alostéricos rápidos (ms) para el cambio de actividad en las enzimas suelen ser
generados localmente por cambios de concentración de diversas sustancias (sustratos,
intermediarios, productos, cofactores claves) que indican el estado metabólico de la célula.
Segundos mensajeros (AMP, Ca2+) generados intracelularmente por señales externas median
cambios alostéricos, pero una escala de tiempo prolongada (relativo a las dadas en ms). Estas
señales pueden ser hormonales (insulina, epinefrina), neuronal (acetilcolina), GF o citoquinas.

La regulación puede ser afectando el número o la actividad de la enzima:

 Número: la cantidad de enzima depende su la tasa de síntesis y degradación, que se alteran

por la activación de factores de transcripción (luego de recibir una señal extracelular) que
se unen a elementos de respuesta (secciones específicas de ADN) cerca del gen promotor
(donde inicia la transcripción), con la consecuente activación o represión del gen
transcriptor que puede aumentar o reducir la síntesis del enzima. El transcrito, en forma de
ARNm, varía en cuanto estabilidad (resistencia a degradación), por lo que la cantidad de
ARNm depende también de su tasa de síntesis y degradación. La tasa a la que se traduce el
ARNm (conversión de ARN a aminoácidos) también puede ser regulada por otros factores;
esto deja claro que el incremento de ARNm en una célula no siempre significa un
incremento en la tasa de síntesis de proteínas (una mayor transcripción no siempre genera
una mayor traducción). La proteína sintetizada tiene tiempo de vida establecida (minutos
a días), cuya tasa de degradación varía según las condiciones de la célula y si son etiquetadas
para su degradación, como con ubiquitina para ser degradada en los proteasomas.
Las regulaciones en el número se dan en la señal extracelular, el factor de transcripción, la
estabilidad del ARNm transcrito, la tasa de traducción del ARNm, y la vida de la proteína
sintetizada.
La tasa de recambio es costosa energéticamente, pero se da porque se puede llegar a un
nuevo equilibrio dinámico más rápido que si las proteínas tuvieran vidas medias
prolongadas; beneficiando las respuestas rápidas generadas por los estímulos.
 Actividad: puede ser regulada secuestrando a la enzima y al sustrato en compartimientos
diferentes (como cuando la hexoquinasa está en el núcleo y la glucosa en el citosol). La
actividad del enzima también depende de la concentración del sustrato, por la presencia
de efectores alostéricos, por modificaciones covalentes o por la unión a proteínas
reguladoras; todas produciendo cambios de la actividad de forma individual en cada
enzima. La influencia de la concentración del sustrato se entiende con la cinética de
Michaelis-Menten, evidenciando que una enzima con concentración = Km trabaja a una tasa
de ½ de capacidad máxima, y cuando esta disminuye lo hace la actividad, y cuando aumenta
la reacción es dependiente de la concentración del sustrato (las concentraciones
intracelulares de un sustrato suelen ser = Km). Los reguladores alostéricos convierten
cinéticas hiperbólicas (como la de la Hb) en sigmoideas (como las de Michaelis-Menten), y
viceversa, teniendo en cuenta que, en las sigmoides en la parte más empinada de la gráfica
pequeños cambios en la concentración del sustrato, o del regulador alostérico, generan
cambios en la tasa de reacción. Las modificaciones covalentes (por señales extracelulares)
suelen ser fosforilaciones/desfosforilaciones, que genera cambios electrostáticos en el sitio
activo influyendo en el posición de una región inhibitoria, su interacción con otras enzimas,
dando cambios conformacionales (reflejados en la Vmax y Km). La unión a proteínas
reguladoras puede inactivarlas al estar unidas a sitios activos de la enzima.

La regulación metabólica se refiere al proceso para mantener la homeostasis a nivel molecular

para mantener un parámetro (como la concentración de un metabolito) y el control metabólico se
refiere al proceso que da un cambio en el rendimiento de una vía metabólica por diversos
estímulos (como la insulina que promueve exposición de GLUT4).

Para conocer las reacciones en equilibrio, se hace comparando su radio de acción de masas Q con
la constante de reacción en equilibrio Keq que, cuando están a 1-2 órdenes de magnitud de cercanía,
se dice que están en equilibrio, y las que son usadas para regulación son las que tienen lejanía del
equilibrio porque son exergónicas cuando siguen la dirección de formación de productos, y los
efectos en las concentraciones del sustrato y producto se limita a la actividad de la enzima, que se
puede regular en número y actividad. La célula no permite que esas reacciones alcancen el
equilibrio, por eso se dan los cambios en las tasas de reacciones, para mantener a los sustratos,
intermediarios y productos a la misma concentración.

Si el radio [ATP]/[ADP] cambia, afectaría las reacciones que utilicen estos cofactores, lo mismo
con los cofactores NAD(P)H/NAD(P)+; por lo que se han dado mecanismos que regulen y mantengan
este radio, siendo AMP el indicador más sensible para la célula, que se debe a la baja concentración
de AMP en la célula, a comparación del ATP. En procesos de contracción se usa ATP, que genera
ADP, que reacciona con otro ADP para formar ATP + AMP, siendo el AMP indicador de un elevado
uso de ATP (pues la [ADP] se mantiene sin cambios).
Reguladores como la proteína quinasa activada por AMP (AMPK) que responde a este incremento,
que es activada alostéricamente por el AMP, y hace a la AMPK buen sustrato para que la fosforile
LKB1; cuyo efecto es el incremento del transporte de glucosa, y activación de la glucólisis y
oxidación de ácidos grasos (por la demanda energética que indica el AMP), mientras se suprime la
síntesis de glucógeno, ácidos grasos, colesterol y proteína. La AMPK ralentiza la síntesis de
glucógeno al fosforilar e inhibir la glucógeno sintasa (aumentando el ATP y disminuyendo el AMP).
El cerebro no cuenta con reservas de energía, siendo dependiente de la glucosa en sangre, por eso
se secreta insulina y glucagón, para regular la elevada o baja glucosa en sangre, respectivamente.

Otros mecanismos de regulación son para maximizar la eficiencia de los combustibles, repartir
metabolitos apropiadamente entre las vías metabólicas, proveer el combustible más adecuado,
reducir la biosíntesis cuando se acumulan los productos.

Los parámetros que indican la respuesta de una vía bajo distintos cambios metabólicos son:

 El coeficiente del control de flujo cuantifica el efecto de un cambio en la actividad enzimática

en el flujo de metabolitos a través de una vía, por el coeficiente de control de flujo (C) siendo
negativo cundo ralentiza, cero cuando no influye, y positivo cuando promueve la reacción;
siendo 1 la suma de todos los coeficientes de una vía.
 El coeficiente de elasticidad (ε), que expresa cuantitativamente la respuesta individual de
una enzima a cambios por la concentración de un metabolito o el regulador; siendo función
intrínseca de las propiedades cinéticas.
 Se puede cuantificar el impacto de un factor externo, que no es metabolito o enzima de la
vía metabólica, que mide con coeficiente de respuesta (R), que indica el cambio en el flujo
de la vía cuando algún parámetro (v.g.: hormona) cambia.

Los tres coeficientes se relacionan: R (un factor externo) afecta a un enzima según la sensibilidad de
la vía a cambios en la actividad de la enzima (C) y que tan sensible es la enzima a cambios del factor
externo ε.
El análisis del control metabólico sugiere que cuando la glucosa en sangre aumenta, la insulina actúa
en el musculo para aumentar el transporte de glucosa al aumentar el transporte de GLUT4 a la
membrana plasmática, induciendo la síntesis de la hexoquinasa y activando la glucógeno sintasa por
alteración covalente. Los primeros dos efectos aumentan el flujo de glucosa (control) y el tercero
sirve para adaptar la actividad de la glucógeno sintasa para que los niveles del metabolito (v.g.: G-
6-P) no cambien dramáticamente por el cambio de flujo (regulación).

Regulación coordinada de la glucólisis y la gluconeogénesis

Glucólisis Gluconeogénesis
Citosol Citosol, mitocondria y RE
Oxidación de glucosa Síntesis de glucosa
Liberación de energía metabólica Gasto de energía
Generación de metabolitos intermediarios Proveer glucosa en casos de déficit de este
para otras rutas de oxidación de glúcidos (ciclo combustible; contrarrestar oscilaciones en []
de Krebs) de glucosa entre comidas
*los ciclos sustratos pueden ser utilizados para generar calor y controlar rutas metabólicas

La gluconeogénesis ocurre en el hígado, cuyo rol del mismo es proveer glucosa para la exportación
a otros tejidos cuando las reservas de glucógeno están agotadas y no hay glucosa de la dieta
disponible de la sangre. La gluconeogénesis y la glucólisis usan siete mismas enzimas, y son tres las
que son altamente exergónicas (irreversibles) las que son diferentes: la hexoquinasa, PFK-1 y la
piruvato quinasa. Si se dieran las tres reacciones irreversibles de la glucólisis simultáneamente con
las tres reacciones irreversibles de la gluconeogénesis, se consumiría ATP sin lograr trabajo químico
o biológico.

Si sucede esto, se disiparía la energía química como calor y generaría los ciclos fútiles; que
pueden ser útiles y son llamados ciclos de substratos.
Musculo: busca producción de ATP
Hígado:
1. mantiene el nivel de glucosa sanguínea constante
2. producir y exportar glucosa a tejidos dependiendo de la demanda
 3. Importa y almacena glucosa cuando hay exceso en la dieta

ISOZIMAS: diferentes proteínas que catalizan la misma reacción

 Pueden tener secuencias aminoacídicas similares, pero no idénticas. En algunos casos
pueden compartir un origen evolutivo común.
 En tejidos mamíferos una misma reacción puede ser catalizada por 2 o más formas
moleculares de una enzima
 Estas proteínas se llaman isozimas o isoenzimas.
 Pueden encontrarse en la misma especie, en el mismo tejido o aún en la misma célula.
 Las formas diferentes de la enzima difieren generalmente en:
 Propiedades cinéticas
 Propiedades reguladoras
 En los cofactores que usan
 Distribución subcelular

Hexoquinasa
Tiene isozimas hepáticas y musculares, es una enzima reguladora.
 Hay cuatro isozimas se numeran de I-IV, cada una codificada por un gen diferente
 En los miocitos (MUSCULO) la hexoquinasa predominante es la hexoquinasa II (½ saturada
a 0,1 mM); la glucosa entra a los mismos a concentración de 4-5 mM, produciendo una
saturación de la hexoquinasa II para que actúe cerca de su tasa máxima. Esto asegura que
la glucosa se quede dentro de la célula.
 La hexoquinasa I y II son inhibidas alostéricamente por su producto G-6-P, lo que mantiene
en balance la tasa de formación y utilización, y se reestablece su equilibrio dinámico.

 Isoenzima Hepática hexoquinasa IV (glucoquinasa) tiene una Km de 10 mM, activa sobre

todo después de una comida alta en carbohidratos. Los hepatocitos tienen transportadores
de glucosa eficientes, GLUT2, que equilibra la concentración en el citosol y la sangre. Su
elevado Km permite su regulación directa según la glucosa en sangre. La hexoquinasa IV no
 se inhibe por la G-6-P y así puede seguir operando cuando la G-6-P inhibe a las hexoquinasas
I-III. La hexoquinasa IV es inhibida por una proteína específica en el hígado, cuya unión es
más fuerte en presencia del efector F-6-P
Glucosa compite con la fructosa-6-fosfato por la proteína reguladora, por lo que al elevarse la
concentración de glucosa produce que se disocie de la hexoquinasa IV, y esta puede empezar a
actuar

*La fructosa 6- fosfato es el efector alostérico que aumente la [] cuando la glucosa sanguínea es
menor de 5 mM

La hexoquinasa IV también se regula por la su síntesis, bajo ATP y alto AMP, causa la transcripción
del gen de la hexoquinasa IV.

La glucosa-6-fosfatasa (opuesta a la hexoquinasa) está regulada transcripcionalmente por factores

que incrementan la necesidad de producción de glucosa (como por la degradación de glucógeno
que necesita fosforilar a la glucosa para ser liberada antes de su hidrólisis).

😊 ¿El propósito del secuestro nuclear de la glucoquinasa? Evitar que el Hígado consuma glucosa
para que se aprovechen en otros tejidos, escondiendo a la enzima en el núcleo

😊 ¿Cuál será la principal consecuencia biológica de la diferencia de afinidad (Km distintas) de las
isozimas hexoquinasa y glucoquinasa por el sustrato? Depende del uso y del tejido que necesite la
glucosa, que la hexoquinasa tenga una Km alta asegura que el hígado no utilizara glucosa a menos
que haya altas cantidades de glucosa, mientras que las hexoquinasas de I – III tenga un Km bajo
asegura que todos los tejidos del cuerpo, los músculos tengan glucosa y puedan producir ATP
(energía)

Regulación recíproca PFK-1 FBPasa-1 y síntesis de fructosa 2,6 bifosfato

Fosfofructoquinasa-1 (PFK-1)
tiene diversos sitios de regulación alostérica de activadores e inhibidores. ATP, un producto final de
la vía glucolítica, al aumentar inhibe a la PFK-1 al unirse a un sitio alostérico que disminuye su
afinidad por el sustrato F-6-P. El ADP y el AMP actúan alostéricamente para aumentar su actividad.
El citrato, una intermediario clave en la oxidación aeróbica, es un inhibidor alostérico. Los
inhibidores indican que hay suficiente energía producida, los activadores lo contrario. El acetil-CoA
también la inhibe.
 Tetrámero (unidades idénticas)
 Cada subunidad tiene su propio sitio catalítico .
 La enzima tiene multiples sitios reguladores para la union de sus moduladores alostéricos
(Ej. ATP)

La fructosa-1,6-bifosfatasa-1 (FBPasa-1), que cataliza la reacción contraria, es inhibida

alostéricamente por el AMP, que es señal de la necesidad de energía.

El glucagón señala al hígado que debe producir y liberar glucosa, mientras detiene el consumo de
glucosa para su uso; una fuente de glucosa es el glucógeno almacenado en el hígado, otro es el
uso de piruvato, lactato, glicerol y aminoácidos como fuente de producción. Cuando la glucosa en
la sangre esta elevada, la insulina indica al hígado que use la glucosa como combustible y como
precursor para la síntesis y almacén de glucógeno y triacilglicerol. Esta regulación hormonal es
mediada por la fructosa-2,6-bifosfato, un efector alostérico de la PFK-1 y la FBPasa-1; cuando se
une al sitio alostérico de la PFK-1 aumenta su afinidad por su sustrato F-6-P y reduce su afinidad por
el su inhibidor ATP/citrato, y tiene el efecto opuesto en la FBPasa-1, que reduce su afinidad por su
sustrato, así disminuyendo la gluconeogénesis. La F-2,6-BP activa la PFK-1 y promueve glucólisis.
Secreción de insulina
Secreción de Glucagón

😊 ¿Cómo regula simultáneamente el glucolisis y la gluconeogénesis? Por medio del metabolito

FRUCTOSA 2,6- BIFOSFATO
😊 ¿Qué hace este metabolito? Actuar sobre dos enzimas reguladoras clave de las vías metabólicas:
PFK-1 (como activador) y FBPasa-1(como represor)
Regulación de concentracion de fructosa 2,6- bifosfato (pelota amarilla)
1. Ocurre en el hígado.
2. Actividades diferentes de una misma proteína bifuncional hepática (PFK-2/FBPasa2).
3. Favorece la síntesis la fosfofructoquinasa-2 (PFK-2) y eliminado por la fructosa-2,6-
bifosfatasa (FBPasa-2). Estas tienen actividades enzimáticas separadas en una proteína
bifuncional. El nivel de la F-2,6-BP es regulada por el glucagón e insulina.
4. Es una enzima bifuncional, sintetiza y degrada.
  El glucagón estimula la síntesis de AMPc, que activa la proteína quinasa dependiente de
AMPc, que transfiere un fosfato de un ATP a la PFK-2/FBPasa-2, cuya fosforilación promueve
a la FBPasa-2 e inhibe a la PFK-2, por tanto, el glucagón disminuye el nivel de la F-2,6-BP e
inhibe la glucólisis y estimula la glucogenogénesis para suplir a la sangre con glucosa
 La insulina tiene el efecto contrario al promover la actividad de la fosfoproteína fosfatasa
que remueve el grupo fosfato de la proteína bifuncional y promueve a la PFK-2, que
aumenta el nivel de F-2,6-BP y estimula la glucólisis, mientras inhibe la gluconeogénesis.

El glucógeno indica hipoglicemia, que induce al hígado a dejar de consumir glucosa y exportarlo a la
sangre, que se da por la generación de AMPc, que estimula la PKA que fosforila y forma FBPasa-2
que disminuye la F-2,6-BP y estimula gluconeogénesis para su transporte a la sangre y otros tejidos;
la insulina lo contrario por la PP1 que hidroliza el fosfato para formar la PFK-2 y aumentar la F-2,6-
BP y estimular a la PFK-1 e inhibir la FBPasa-1 para promover la glucólisis y glucogenogénesis.

La fructosa-2,6-bifosfato también es regulada por los niveles de la xilulosa-5-fosfato, de la vía de

las pentosas fosfato. La X-5-P activa la fosfoproteína fosfatasa 2A (PP2A) que desfosforila la
proteína bifuncional, promoviendo la PFK-2, aumentando los niveles de F-2,6-BP, que estimula la
glucólisis. La X-5-P también promueve la síntesis de las enzimas requeridas para sintetizar ácidos
grasos porque se genera NADPH y acetil-CoA.
  Aumento de Acetil-CoA (por glucólisis) y NADPH (por vía de pentosas-fosfato) después de
comidas altas en carbohidratos favorece la síntesis de ácidos grasos.
 Xilulosa 5-fosfato también incrementa la síntesis de todas las enzimas requeridas para la
síntesis de ácidos grasos.

Piruvato quinasa es inhibida alostéricamente por ATP

 Hay al menos tres isozimas de la piruvato quinasa en vertebrados que difieren en
distribución y respuesta a moduladores.
 Elevadas concentraciones de ATP, acetil-CoA y ácidos grasos de cadena larga, inhiben
alostéricamente las isozimas de la piruvato quinasa.
  Esta la isozima L está en el hígado; solo la isozima L del hígado está sujeta a regulación por
fosforilación a través de una proteína quinasa dependiente de AMPc (debido hipoglucemia
que causa la liberación del glucagón), y cuando se reduce el estímulo del glucagón una
proteína fosfatasa hidroliza el grupo fosforilo. Provocando que el hígado no utilice más
glucosa y puedan usarla otros órganos como el cerebro y los riñones. 😊
 En el músculo esta la isozima L y la isozima M; mientras que en el músculo el incremento
de AMPc (en respuesta a la epinefrina) se activa la glucólisis y la degradación del
glucógeno (glucogenólisis) para su uso energético. La F-1,6-BP estimula la piruvato quinasa
y la alanina la inhibe.

😊 el musculo no tiene receptores de glucagón por lo cual NO puede responder ante esta señal, el
único que tiene receptor de glucagón es el HIGADO.
😊 la glucosa 6- fosfatasa esta casi únicamente en el hígado por lo cual al gluconeogénesis solo
ocurre en el hígado

La conversión gluconeogénica de piruvato a fosfoenolpiruvato está bajo múltiples formas de

regulación
 La conversión de piruvato a PEP tiene múltiples regulaciones. El primer punto de control
determina el destino del piruvato en la mitocondria
 Ya sea su conversión a acetil-CoA (por el complejo de piruvato deshidrogenasa)
para ser enviado al ciclo de Krebs
 o a oxaloacetato (por la piruvato carboxilasa) para iniciar el proceso de
gluconeogénesis
  La regulación de la enzima clave PEP carboxiquinasa ocurre principalmente a nivel de
transcripción genética en respuesta a señales hormonales y de la dieta.

Cuando se necesita energía el [NADH]/[NAD+] aumenta, se acumula el acetil-CoA (por inhibición del
ciclo del ácido cítrico) e inhibe la piruvato deshidrogenasa, que estimula la gluconeogénesis al
activar la piruvato carboxilasa que transforma el piruvato a oxaloacetato y luego a glucosa. El acetil-
CoA inhibe su propia ruta de síntesis.
El oxaloacetato formado es convertido a PEP por la fosfoenolpiruvato carboxiquinasa; cuya
regulación del enzima se da a través de la tasa de recambio en respuesta a la dieta y señales
hormonales. La inanición y el glucagón actúa por el AMPc que incrementa la transcripción y
estabiliza el ARNm; la insulina e hiperglicemia tiene efectos contrarios.

 La regulación de la expresión de un gen produce cambios en el número de moléculas de la

enzima (por la cual codifica) en la célula.
 Regulación en el balance entre los procesos de síntesis y degradación de una enzima
también produce cambios en el número de moléculas de dicha enzima dentro de la célula.

La insulina regula la transcripción de más de 150 genes (factores de transcripción importantes)

actúa activando proteínas quinasas. La MAP quinasa (MAPK) ERK fosforila los factores de
transcripción SRF y Elk1 que estimulan la síntesis de enzimas necesarias para el crecimiento de
células y su división. La proteína quinasa B (PKB o Akt) fosforila factores de transcripción como PDX1
que estimula la síntesis de enzimas para el metabolismo de carbohidratos y ácidos grasos, en las
células β del páncreas el PDX1 estimula síntesis de insulina. Estimula la transcripción de genes que
codifican para las hexoquinasas II y IV, PFK-1, piruvato quinasa y PFK-2/FBPasa-2 (que intervienen
en la glucólisis), enzimas para la síntesis de ácidos grasos, y glucosa-6-fosfato deshidrogenasa y 6-
fosfogluconato deshidrogenasa (de la pentosa fosfato que generan NADPH necesarios para la
síntesis de ácidos grasos); mientras disminuye la expresión de la PEP carboxiquinasa y la glucosa-6-
fosfatasa. Estimula las vías que consumen glucosa mientras inhibe la producción y liberación de
glucosa a la sangre.

La regulación transcripcional de glucólisis y gluconeogénesis cambia el número de moléculas de

las enzimas
El ChREBP (proteína de unión a los elementos de respuesta glucídica), un factor de transcripción del
metabolismo de carbohidratos, expresado en hígado, tejido adiposo y riñones. Se localiza
fosforilado en el citosol, luego la PP2A (controlada alostéricamente por la xilulosa-5-fosfato)
remueve el Pi y puede entrar al núcleo, donde la PP2A remueve otro Pi y puede unirse a la proteína
Mlx que promueve la síntesis de la piruvato quinasa, ácido graso sintasa y acetil-CoA carboxilasa
(glucolisis y síntesis de ácidos grasos).

El factor de transcripción en el hígado SREBP-1c (de la familia de las proteínas de unión a los
elementos de respuesta de esteroles) estimula la síntesis de la piruvato quinasa, hexoquinasa IV,
lipoproteína lipasa, acetil-CoA carboxilasa y el complejo ácido graso sintasa; el SREBP-1c es
estimulado por la insulina y reprimida por la el glucagón. Inhibe la expresión de glucosa-6-fosfatasa,
PEP carboxiquinasa y la FBPasa-1.

El factor de transcripción CREB (proteína de unión a los elementos de respuesta de AMPc) estimula
la síntesis de glucosa-6-fosfatasa y PEP carboxiquinasa por el aumento de AMPc generado por el
glucagón. Se inactiva por la insulina inhibiendo la síntesis de las enzimas PEP carboxiquinasa,
fructosa-1,6-bifosfatasa, glucosa-6-fosfatasa (enzimas gluconeogenicas)

El FOXO1 (forkhead box other) estimula la síntesis de enzimas gluconeogenicas e inhibe la síntesis
de enzimas glucolíticas, de la pentosa fosfato y de la síntesis de triacilglicéridos. Su forma sin
fosforilar actúa como factor de transcripción nuclear, y por la insulina deja el núcleo y entra al
citosol donde se fosforila por la PKB y es etiquetado con ubiquitina y degradado por el proteasoma;
el glucagón evita su fosforilación y la mantiene en el núcleo.

😊 ¿qué es un factor de transcripción? es una proteína que se sitúa sobre una región activadora en
ADN que favorece la síntesis de la proteína por la cual codifica esa región de ARNm para que salga
del núcleo y en el ribosoma pueda ser sintetizada la proteína.

Metabolismo del glucógeno en animales

 Forma polimérica de almacenamiento de glucosa en vertebrados y algunos
microorganismos, no altera la presión osmótica dentro de la célula.
 Principalmente en hígado (10% peso) y tejido muscular (1-2% peso).
 Glucógeno en músculo:
 o Provee de energía inmediata para metabolismo aeróbico o anaeróbico
o Se puede agotar en menos de 1 hora de actividad vigorosa.
 Glucógeno en hígado:
o Reserva de glucosa para otros tejidos cuando la glucosa de dieta no está
disponible (entre comidas o durante ayunos).
o Importante para neuronas del cerebro
o Puede agotarse en 12-24 hrs.

Metabolismo del Glucógeno

 Gránulos de glucógeno:
o Agregados complejos de glucógeno
o Enzimas que lo sintetizan (glicogénesis) y Enzimas que lo degradan (glicogenólisis)
o Maquinaria de regulación
 Mecanismos de almacenamiento y movilización de glucógeno similares en músculo e
hígado pero con diferencias que reflejan los papeles metabólicos de cada uno de estos
tejidos
 El glucógeno también puede obtenerse de la dieta, fragmentado en el intestino por
enzimas hidrolíticas que lo convierten en glucosa libre.

El exceso de glucosa es almacenado como gránulos de glucógeno, cuya partícula elementar es la β-

partícula, con 55,000 residuos de glucosa y 2000 extremos no reductores; de 20-40 de estas
partículas se enrollan en α-rosetas.

Degradación de glucógeno
En el músculo esquelético y el hígado, las unidades de glucosa de las ramificaciones más externas
del glucógeno entran a la vía glucolítica por acción de tres enzimas: la glucógeno fosforilasa, la
enzima desramificadora del glucógeno y la fosfoglucomutasa.
 La glucógeno fosforilasa cataliza el ataque por un fosfato inorgánico en un enlace
glucosídico α1-4 de un extremo no reductor, generando α-D-glucosa-1-fosfato (fosforolisis)
con piridoxal fosfato como cofactor, como catalizador ácido general. La enzima actúa hasta
llegar a cuatro residuos del enlace α1-6 (la ramificación).
 La enzima desramificadora, oligo (α1-6) a (α1-4) glucotransferasa, que cataliza la
transferencia de tres de los residuos sobrantes y la pasa a la cadena sin ramificar para su
fosforolisis, y con su actividad de glucosidasa libera el residuo con enlace glucosídico α1-6.
 La glucosa-1-fosfato se convierte a glucosa-6-fosfato por la fosfoglucomutasa, que en
músculos puede ser usada para la glucólisis, pero en el hígado es liberada a la sangre cuando
disminuyen los niveles de glucosa mediante la acción de la glucosa-6-fosfatasa (presente en
hígado y riñones) que es una proteína integral del RE con su sitio activo en la luz dentro del
RE.
 La G-6-P es ingresada por el transportador específico T1, al retículo endoplasmático, (y tras
ser hidrolizado sale la glucosa y el fosfato inorgánico por diferentes transportadores
específicos, y luego la glucosa sale por el GLUT2. El sitio de hidrólisis evita que interfiera con
la glucólisis, y el músculo y tejido adiposo carecen de la enzima que hidroliza G-6-P, por lo
que no puede suplir glucosa para la sangre.

Fosforólisis
  Glucógeno fosforilasa cataliza la ruptura del enlace glucosídico (α1-4) entre dos
glucosas en el extremo no reductor por el ataque de un fosfato inorgánico (Pi) que
remueve el residuo de Glu terminal como Glu 1-fosfato.
 Piridoxal fosfato cofactor esencial en la reacción

Diferentes destinos de la glucosa 6-fosfato producida de la degradación de glucógeno

 La glucosa 6-fosfato formada del glucógeno en músculo esquelético puede entrar a la

glucólisis y servir como fuente de energía para contracción muscular
 La degradación de glucógeno hepático sirve para liberar glucosa a la sangre cuando el nivel
de glucosa sanguínea baja por ejemplo entre comidas
 Esto requiere de la enzima glucosa 6-fosfatasa presente en hígado y riñón, pero no
en músculo u otros tejidos.

UDP-glucosa es el sustrato para la síntesis de glucógeno

 Reacciones de transformación o polimerización de hexosas utilizan azúcares
nucleótidos como sustratos
 La polimerización de hexosas se da con nucleótidos-azúcar, para su activación en el C
anomérico. Su formación (nucleótido-azúcar) es irreversible porque al unirse al
nucleótido se libera pirofosfato que se hidroliza y la hace una reacción favorable, el
 nucleótido favorece la unión al sitio activo y el grupo nucleótido es un excelente grupo
saliente, y etiqueta a las hexosas para un propósito particular.
 Azúcares nucleótidos: compuestos en los que el carbono anomérico del azúcar es
activado al unirse a un nucleótido a través de un enlace fosfodiéster.
 Azúcares nucleótidos son intermediarios clave en la producción de aminohexosas y
deoxihexosas encontrados en varios polisacáridos extracelulares, en la síntesis de
vitamina C, y son esenciales en algunas reacciones de detoxificación.
 Síntesis de glucógeno ocurre principalmente en hígado y músculo esquelético.

Se inicia con la G-6-P, formación catalizada por las hexoquinasas, luego se convierte a G-1-P por
la fosfoglucomutasa y reacciona con UTP para dar UDP-glucosa por la UDP-glucosa
pirofosforilasa que cataliza el ataque del oxígeno fosfato del azúcar hacia el α-P del UDP. Luego
la glucógeno sintasa promueve la transferencia de glucosa del UDP-glucosa a un extremo no
reductor ramificado. Las ramificaciones α1-6 se dan por la enzima ramificadora de glucógeno,
llamada amilo (1-4) a (1-6) transglucosilasa o glucosil (4- 6) transferasa, la cual transfiere de un
fragmento terminal 6 residuos del extremo reductor donde al menos hay 11 residuos de
distancia de la molécula donde se forma la ramificación.

*punto de partida: glucosa 6 -fosfato. SUSTRATO INMEDIATO: UDP-GLUCOSA

La cadena de glucógeno es elongada por medio de la glucógeno sintasa. La enzima transfiere el

residuo glucosa de la UDP-glucosa al extremo no reductor del glucógeno para hacer un nuevo
enlace (a1 4).
 Ramificación del glucógeno
Como la glucógeno sintasa no puede crear enlaces (a1 6), se usa la enzima ramificadora del
glucógeno (amilo (1 4) a (1 6) transglicolasa) o glicosil (4 6) transferasa

 requiere un primer, una poliglucosa α1-4 preformada con al menos 8 residuos de

glucosa.
 Esta se forma por la glucogenina, inicia con la transferencia de glucosa a partir de UDP-
glucosa a un hidroxilo de la Tyr194 de la glucogenina, catalizada por la actividad intrínseca
de transferencia, seguido del alargamiento de la cadena con siete residuos derivados
de la UDP-glucosa catalizada por la actividad de la glucogenina. La glucogenina
permanece enterrada en la β-partícula, unida al primer extremo no reductor del
glucógeno.

Iniciación de la partícula de glucógeno por medio de la glicogenina

 Glicogenina: proteína que funciona como el molde en el que se ensambla la nueva cadena
de glucógeno y también como la enzima que cataliza el ensamblaje
 Provee el primer o iniciador de 8 residuos de glucosa necesario para el funcionamiento de
la glucógeno sintasa.
Cada partícula β: Tiene 21 nm de diámetro, Consiste en hasta 55,000 residuos glucosídicos y
Aproximadamente 2,000 extremos no reductores
 Regulación coordinada de la síntesis y degradación del glucógeno
La enzima glucógeno fosforilasa está regulada hormonal y alostéricamente
 En músculo esquelético existe en dos formas interconvertibles de la isozima por
fosforilación/defosforilación:La glucógeno fosforilasa
Glucógeno fosforilasa a (catalíticamente activa). Predomina en músculo en
contracción vigorosa.
Glucógeno fosforilasa b (menos activa). Predomina en músculo inactivo, en el
músculo en descanso y, cuando se somete a actividad
El segundo mensajero AMPc aumenta su concentración intracelular en respuesta
a estimulación por epinefrina (músculo) o glucagón (hígado) y activa a la PKA que
a su vez activa a la fosforilasa b quinasa.
la epinefrina causa su fosforilación en residuos de Ser que la convierten a su forma
a. La epinefrina (en músculo) y el glucagón (en hígado) promueve la generación de
AMPc (segundo mensajero), que inicia la cascada enzimática al activar la proteína
quinasa dependiente de AMPc (PKA), que fosforila y activa la glucógeno fosforilasa
b quinasa, que cataliza la fosforilación en dos residuos de Ser de la fosforilasa.

En músculo además hay 2 mecanismos de control alostérico: por el Ca2+ que se une a la
fosforilasa b quinasa y promueve su actividad para formar fosforilasa a. El AMP
también se une a la fosforilasa y la activa, pero un nivel adecuado de ATP bloquea su
sitio alostérico, inactivando la fosforilasa resultando en hidrólisis de ATP. Activa a la
glucógeno fosforilasa. Cuando el músculo vuelve a estar en descanso, la enzima
fosfoproteína fosfatasa 1 (PP1) remueve los fosforilos de la fosforilasa a y la desactiva.
 En el hígado se regula hormonalmente por el glucagón que activa a la fosforilasa b y
cuando el nivel de glucosa en sangre es normal, la glucosa entra al hepatocito y
alostéricamente inhibe al sitio de la fosforilasa a, que produce cambios
conformacionales que exponen los residuos de Ser a la PP1 para ser desactivada. El sitio
de la glucosa permite que la fosforilasa actúa como su propio sensor a la glucosa y
responda apropiadamente.

😊 ¿Cuál es el efecto fisiológico final de la adrenalina sobre el músculo? Provocar la glucólisis

para poder tener ATP (energía)
 La glucógeno fosforilasa hepática funciona como un sensor de glucosa

La glucógeno fosforilasa hepática, al igual que la muscular, es regulada hormonalmente

(fosforilación/defosforilación).
La isozima hepática también es regulada alostéricamente por la glucosa.

😊 ¿Cuál es el modulador alostérico de la glucógeno fosforilasa en el musculo? AMP

😊¿Cuál es el modulador alostérico de la isoenzima hepática? glucosa

La glucógeno sintasa también es regulada por fosforilación/defosforilación

 glucógeno sintasa existe desfosforilada como glucógeno sintasa a, que está sin fosforilar y
activa
 La fosforilación del grupo hidroxilo de las cadenas de Ser la convierte en su forma b
desactiva, a menos que esté su activador alostérico G-6-P. Puede ser fosforilada por 11
proteínas quinasas, la que destaca es la glucógeno sintasa quinasa 3 (GSK3) que añade 3
fosforilos a tres residuos de Ser y la desactiva fuertemente, pero solo actúa si la caseína
quinasa II (CKII) a fosforilado a la glucógeno sintasa (cebado-priming).
 La proteína quinasa activada por AMP (AMPK) se asocia a gránulos de glucógeno y también
puede fosforilar la glucógeno sintasa e inhibir la síntesis de glucógeno. En el hígado la
conversión de la forma b a la a ser da por la PP1 (fosfoproteína fosfatasa 1) que está unida
a una partícula de glucógeno, la cual remueve los grupos fosforilos, además la unión
alostérica de G-6-P la hace mejor sustrato para su desfosforilación por la PP1.
 Glucosa 6-fosfato es un regulador alostérico de la glucógeno sintasa b, promueve su
defosforilación. Será inactiva a menos que este activador alostérico esté presente. SI O SÍ
TIENE QUE ESTAR PRESENTE
 Glucógeno sintasa puede ser vista como un sensor de glucosa 6-fosfato.
La insulina desencadena cambios que activan la PKB que fosforila e inactiva la glucógeno sintasa
quinasa 3 (GSK3) en sus grupos Ser. Esto hace de esa región un pseudosustrato que se pliega en
el sitio activo donde se une la Ser fosforilada que actúa como cebador, y previene que sea
cebado el sustrato real; y promoviendo que se desfosforile la glucógeno sintasa por la PP1.
Mecanismo:
La insulina se une a su receptor, que activa una tirosina proteína quinasa que fosforila al sustrato-1
del receptor de insulina (IRS-1). La fosfotirosina de la IRS-1 se une al fosfatidilinositol-3-quinasa (PI-
3K) que convierte el fosfatidilinositol-4,5-bifosfato (PIP2) en el fosfatidilinositol-3,4,5-trifosfato (PIP3)
de membrana que se une a una proteína quinasa (PDK-1) para activarla y que se una a la proteína
quinasa (PKB) que fosforila el GSK3 y la desactiva.

Papel central de PP1 en el metabolismo del glucógeno

Un PP1 remueve los 3 fosforilos de la glucógeno sintasa en respuesta del glucagón, en el hígado, y
de la epinefrina, en el hígado y músculo. La insulina estimula la síntesis de glucógeno activado la
PP1 y desactivando la GSK3.
La epinefrina y glucagón estimulan la degradación de glucógeno:
Separando a PP1 del gránulo de glucógeno
PKA fosforila (activa) a la proteína inhibidora de PP1.
La subunidad catalítica de la PP1 (PP1c) no está libre en el citosol, sino que está unida a
unas proteínas de la familia de proteínas de señalización del glucógeno que unen al
glucógeno y las tres enzimas (glucógeno fosforilasa, glucógeno fosforilasa quinasa y
glucógeno sintetasa); estando la a PP1 sujeta a regulación covalente y alostérica, se
inactiva por la PKA y se activa por la G-6-P.
*PP1 existe unida a sus blancos por medio de proteínas de la familia de glycogen-targeting
proteins (Gm en este ejemplo)

PPI las defosforila a glucógeno fosforilasa, glucógeno fosforilasa quinasa y glucógeno sintetasa

La hiperglucemia causa que se libere insulina, y en los hepatocitos inactiva la GSK3 y activa la PP1
para activar la glucógeno sintasa, y la PP1 inactiva la glucógeno fosforilasa a y la glucógeno
fosforilasa quinasa que las desactiva y detiene la degradación de glucógeno. La glucosa entra al
hepatocito por el GLUT2 que causa la disociación de la glucoquinasa a su regulador en el núcleo, lo
cual estimula la glucólisis; y los hepatocitos usan el exceso de glucosa de la sangre para sintetizar
glucógeno. Cuando hay hipoglucemia se libera glucógeno, que activa la PKA, que fosforila la
fosforilasa quinasa para activarla y que activa la glucógeno fosforilasa; fosforila la glucógeno sintasa
que inactiva la síntesis de glucógeno, fosforila la PFK-2/FBPasa-2, que disminuye la concentración
de F-2,6-BP que promueve la actividad gluconeogenica, también fosforila e inactiva la piruvato
quinasa. Produce que el hígado forme G-6-P por degradación de glucógeno (glucogenólisis) y
formación de glucosa.
El músculo esquelético difiere del hígado en que: usa su glucógeno para sus necesidades, cuando
bajo actividad vigorosa su demanda es suplida por glucólisis, y que carece de enzimas para la
gluconeogénesis. No tiene receptores para glucagón, la isozima de la piruvato quinasa no es
fosforilada por la PKA, entonces la glucólisis no es detenida cuando se eleva la [AMPc], en efecto,
aumenta la glucólisis activando la glucógeno fosforilasa. La liberación de epinefrina causa que se
eleve la [AMPc] y se fosforile y active la glucógeno fosforilasa quinasa, para degradación de
glucógeno, así como el Ca2+ que activa la fosforilasa quinasa por a través de su subunidad de
calmodulina. La insulina aumenta la síntesis de glucógeno en miocitos al activar la PP1 e
inactivando la GSK3, pero a diferencia de los hepatocitos, tienen reserva de GLUT4 en vesículas
intracelulares que por la insulina son llevadas la membrana plasmática para la mayor toma de
glucosa; así la insulina causa una respuesta en los miocitos que ayuda a reducir la hiperglucemia al
aumentar la tasa de uso de la toma de glucosa, la síntesis de glucosa y glucólisls.

Control de la síntesis de glucógeno muscular ejercido por la glucosa sanguínea

 La insulina aumenta el flujo de glucosa hacia la célula:

 Induciendo exposición de GLUT-4 en membrana
 Induciendo la síntesis de hexoquinasa
 Activando a la glucógeno sintasa por alteración covalente
 Aumento de GLUT-4 y actividad hexoquinasa controla el flujo de glucosa hacia la vía.
 Activación de glucógeno sintasa regula la homeostasis de metabolitos (ej. Glucosa 6-
fosfato)