Laboratorio

Curso de Biología General II

HOJA DE REPORTE
PRACTICA No. 3 - BACTERIAS

Nombre: KAREN DANIELA CHIROY LÓPEZ Carnet: 201808917

Carrera: QF Sección “B” Instructor(a): MELANIE ORTIZ

INSTRUCCIONES: De forma individual, deberá completar lo que se le solicita en cada inciso.

Puede realizarlo en computadora, o completarlo a mano de forma ordenada y con letra legible.

1. Análisis de videos

Responda las siguientes preguntas tomando como referencia el video 1 que se indica en el
instructivo de esta práctica e información adicional que puede investigar en la web.

1.1 ¿A qué se refiere el término inocular o sembrar en microbiología? (5 puntos)

Introducir en un organismo una sustancia que contiene los gérmenes de una

enfermedad.

1.2 ¿Qué es una “colonia” microbiana? (5 puntos)

Agrupación de un conjunto de microorganismos de un mismo tipo.

1.3 Complete el siguiente cuadro sobre los métodos de siembra que existen para estudiar bacterias
en el laboratorio: (15 puntos)

# Nombre del método de ¿Para qué se utiliza? Breve descripción

siembra
1 Siembra en placas
2 medios semisólidos
3 medios líquidos
Cuando se quieren tener
colonias aisladas a partir de
un material determinado
Se emplean para estudiar la
movilidad de los
microorganismos y para
favorecer la separación de
microorganismos con
diferentes requerimientos de
oxígeno.
presentan un desarrollo
particular que se manifiesta
en la superficie o a través de
todo el líquido.
Las muestras diluidas se
mezclan con agar fundido y
se vierten en placa.
Se preparan en tubos, se
inoculan con aguja de
siembra (asa recta) o pipeta
pasteur; en este último caso
es necesario calentar el
medio y cuando se encuentra
en estado líquido y a una
temperatura de
aproximadamente 42ºC se
agrega el inóculo, se
homogeniza y se deja
solidificar
Se preparan en tubos o
matraces que se cubren con
tapones de algodón o
tapones especiales. Un
cultivo líquido puede ser
transferido mediante un asa
microbiológica, un hisopo,
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pipeta o pipeta pasteur; el

4 medios sólidos
5 Método de siembra por
estría en placa
6 En agar inclinado
Los microorganismos al
multiplicarse forman
agregados que se hacen
visibles a simple vista; a
estos agregados se les
denominan colonias, las que
presentancaracterísticas que
varían con el tipo de
microorganismo cultivado y
el medio de cultivo
empleado.
usado para obtener cultivos
axénicos
Se dividirán rápidamente y
en varias horas habrán
producido suficientes células
que pueden ser examinadas
en el microscopio.
inóculo se deposita dentro del
caldo o medio líquido.
se preparan en tubos o
matraces dependiendo de la
cantidad o de las
necesidades, despuésde
esterilizarlos, estos se
inclinan o vierten en cajas de
petri. La siembra se realiza
con el asa, inoculando
lasuperficie del agar con
mucha suavidad
Con un asa de siembra se
tomauna muestra de la
población mixta y a
continuación se hacen estrías
sobre la superficie de un
medio sólidopreparado en
una placa Petri
Se flamea el asa, se toca en
la región donde se han
realizado las últimasestrías y
se continúa la siembra con la
misma técnica, en la
superficie de medio sin
sembrar aún.
Con un asa de platino
esterilizada (calentada con el
mechero) se tomó una
porción de muestra de un
caldo con crecimiento
bacteriano, y se introdujo en
un medio de agar inclinado
haciendo en primera
instancia una pequeña
incisión en la superficie
inferior del agar y después
con un movimiento en zigzag
se procedió a pasar el asa
desde la parte inferior hasta
la punta de la superficie del
agar.

1.4 ¿Describa brevemente qué es la incubación de bacterias? (5 puntos)

Almacenar y acondicionar un ambiente donde se desarrollen de forma adecuada los

microorganismos, a través de la temperatura, la presión y por supuesto la circulación
del aire.

1.5 ¿Por qué es necesario realizar estos métodos de siembra en presencia de un mechero o dentro
de una cabina de flujo laminar? (5 puntos)

Para que haya un paso de aire forzado

1.6 ¿Por qué es necesario calentar al rojo vivo el asa bacteriológica antes y después de tomar una
muestra para realizar un cultivo de bacterias? (5 puntos)
1.7
Antes es para que el sistema quede esterilizado y después para que se fije y
extiendan los microorganismos.
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Responda las siguientes preguntas tomando como referencia el video 2 que se indica en el
instructivo de esta práctica e información adicional que puede investigar en la web.

1.8 En términos generales, ¿por qué es necesario realizar tinciones en las bacterias? (5 puntos)

Es importante ya que facilita al momento de localizar los organismos que se

desean ver los cuales forman la bacteria

1.9 Específicamente, ¿para qué es útil la tinción de Gram? (5 puntos)

Para saber si usted tiene una infección bacteriana. Si es así, la prueba muestra
si la infección es grampositiva o gramnegativa.

1.10 ¿Qué diferencia presentan las bacterias Gram positivas y Gram negativas que hace que se
tiñan de diferente color? Explique. (5 puntos)

Se llama bacterias Gram positivas a aquellas que retienen la tinción azul-violeta,

y se denomina bacterias Gram negativas a las que se decoloran y después se
tiñen con safranina.
1.11 Describa el procedimiento para realizar la tinción de Gram, indicando la función de cada
colorante o reactivo e incluyendo una imagen que resuma la técnica. (15 puntos)

1. Recoger la muestra de bacterias a estudio mediante un isopo (bastón estéril

de algodón).
2. Extender dicha muestra sobre un portaobjetos y dejarla secar.
3. Fijar la muestra mediante un alcohol (metanol).
4. Aplicar el tinte de violeta de genciana sobre el portaobjetos y esperar un
minuto.
5. Enjuagar la muestra con agua y aplicar un fijador del violeta de genciana
(lugol). El lugol y el violeta de genciana forman un complejo insoluble en agua
capaz de penetrar en la pared de las células bacterianas.
6. Lavar de nuevo el portaobjetos con una mezcla de alcohol y acetona durante
unos segundos.
7. Opcionalmente se puede añadir una tinción de safranina o fucsina para
distinguir las gram negativas que aparecerán bajo el microscopio (en lugar
de incoloras) con un tono rosado o rojo. Lavar con agua.
8. Ya se puede observar la muestra al microscopio donde se visualizarán de color
violeta las gram positivas y de color rosa-rojizo las gram negativas.

1.12 Cuando se realiza la observación de una muestra al microscopio, ¿En qué orden deben
girarse los objetivos del microscopio para realizar un enfoque con el objetivo de mayor
aumento? (5 puntos)

Se deben llevar del menor enfoque al que tiene mayor enfoque

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1.13 Identifique las muestras que se presentan a continuación, vistas al microscopio, indicando:
morfología, tipo de agregación y tipo de tinción de las bacterias (5 puntos).

Imagen 1. Imagen 2.

GRAMPOSITIVAS GRAMNEGATIVAS

9. Elaboración de una descripción científica

2.1 Seleccione la colonia de bacterias que va a describir.

2.2 Elabore el mapa mental con las características culturales de la colonia seleccionada y
enumera el orden en que vas a presentar las ideas. (10 puntos).

Forma de
Colonia de Color dela colonia
Crecimento
bacterias BEIGE
ABUNDANTE

Forma de la
Tipo de elevación colonia
Brillo
ELEVADA CIRCULAR Y
RIZOIDE

Tipo de margen
ONDULADO
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2.3 Incluya aquí la fotografía que selecciono y la descripción de la colonia. (10 puntos)

Descripción: Colonia bacteriana de forma

circular y rizoide, superficie elevada,
crecimiento abundante, con una coloración
beige brillosa. Distinguida por presentar una
textura rugosa en la superficie y un margen
ondulado

BIBLIOGRAFÍA

- Villee, C. A. (1974) Biología (6ta ed.). Editorial Interamericana, México