UNIVERSIDAD DEL VALLE

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

BIOQUÍMICA Y FARMACIA
CAMPUS TIQUIPAYA

Práctica Nº6
DETECCIÓN DE SALMONELLA

Estudiantes:
 Guzman Sejas Alejandra
 Choque Bernal Angela Ariana
 Amurrio Mariscal Valeria
Docente: Lic. Evelin Urquieta Osinaga
Asignatura: Microbiología de Alimentos

Noviembre 2, 2021
Gestión II - 2021
Cochabamba – Bolivia
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DETECCIÓN DE SALMONELLA

1. INTRODUCCIÓN

La bacteria de la salmonella generalmente vive en los intestinos de animales y

humanos y se libera mediante las heces los cuales son Bacilos cortos que miden
( 1- 2 um), son Gram negativos, pertenece a la familia Enterobacteriaceae, son
anaerobios facultativos con flagelos peritricos, quimioorganotrofos, oxidasa
negativos, catalasa positivos con un metabolismo oxidativo y fermentativo,
fermentan los azucares con producción de ácido principalmente glucosa y otros
azucares, son móviles excepto gallinarium y pollorium, crecen en medios
cultivos selectivos formando colonias de 2 – 3 mm de diámetro
Los humanos se infectan con mayor frecuencia mediante el agua o alimentos
contaminados.
2. OBJETIVOS
● identificar la presencia del género Salmonella en diferentes alimentos, para asi
soluciónar los problemas que se presentan en el campo de trabajo del futuro
profesional de salud
● Describir adecuadamente las características que conforman las bacterias para
así obtener y detectar la presencia de Salmonella

3. MATERIALES
● Peptona(10 g)

● Cloruro de sodio (5g)

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● Fosfato disodico(5g)

● Caldo selenito cisteína(10g)

● Caldo tetrationato(10 g)
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● Agar verde brillante.

● Rojo fenol (BGA)(10g)

● Agar shigella- salmonella ( SS)(10 g)

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● Frascos Scott de 500 mL(2)

● Frascos Scott de 250 mL (6)

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● Cajas Petri (10)

● Probetas de 250 mL(2)

● Tubos con tapa de rosca (10 mL)

● Espátula (2)

● Balanza de 400 g (2)

● Hornilla (1)

● Pipetas de 10 mL(4)

● Picetas de agua (2)

● Autoclave(1)

● Cucharas (2)

● cuchillos (2)

● pinzas anatómicas (2),

● tijeras(2)

● Propipetas (2)

4. TÉCNICA O PROCEDIMIENTO
Método cualitativo que consiste en un pre enriquecimiento, enriquecimiento y
aislamiento de Salmonella en muestras de alimentos. I.- Pre enriquecimiento
Esta fase permite que se estabilicen y recuperen las células que hay en la muestra,
pues se reparan células dañadas, que alcanzan las condiciones fisiológicas precisas
para su posterior desarrollo. Se suelen utilizar 25 a 50 gramos de muestra y la siembra
se realiza en medio liquido de agua peptonada tamponada
II.- Enriquecimiento selectivo
La finalidad del enriquecimiento selectivo es aumentar el porcentaje de Salmonellas,
permitiendo su proliferación, a la vez que se inhibe el crecimiento de otros organismos.
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Se lleva a cabo transfiriendo distintos volúmenes del cultivo anterior a medios

específicos, que se incuban a sus temperaturas óptimas. Dentro de los medios más
usados son:
❖ Caldo de tetrationato. bilis – verde brillante (Muller- Kauffman) Transfieren 10 ml
en 100 ml de caldo y se incuba a una temperatura de 42ºC o 43ºC durante un
periodo de 18 a 24 horas. Este caldo inhibe flora Gram positiva, el crecimiento
de coliformes y otras bacterias intestinales y estimula el desarrollo de
Salmonella.
❖ Caldo Rappaport Vasiliadis se transfiere 0.1ml a 10 ml del caldo y se incuba a
una temperatura de entre 41ºC a 43ºC, a lo largo de 18 a 24 horas. Así se
inhibe flora competitiva y se estimula el crecimiento de Salmonella, cuyo
crecimiento óptimo se obtienen a 42ºC
❖ Caldo selenito- cistina se transfieren 10 ml en 100 ml de caldo y se incuba a
37ºC durante 24 horas. De esta manera se inhibe el crecimiento de gran parte
de la flora intestinal competitiva sin afectar a Salmonella, Shigella, Pseudomona,
ni Proteus. La cistina favorece el crecimiento de Salmonella.
III.- Aislamiento
El aislamiento se hace por estría en medios sólidos desde los caldos de
enriquecimiento. Estos medios contienen esencialmente agentes selectivos como sales
biliares, azúcares como lactosa, sales para evidenciar la producción de Ácido sulfhídrico
e indicadores de pH.

5. MEDICIÓN, CÁLCULO Y GRÁFICAS

6. RECOMENDACIONES
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● Mantener la higiene al momento de preparar los alimentos

● separar los alimentos crudos de los cocidos
● cocer totalmente los alimentos
● mantener los alimentos a temperaturas seguras

7. CONCLUSIÓN

La utilización de diferentes métodos para la identificación de Salmonella spp.

presenta variabilidad en tiempo, recursos y, en algunos casos, en los resultados
obtenidos por cada uno. Las pruebas bioquímicas implican
mayor tiempo de obtención de resultados y gran cantidad de material y medios de cultivo

8. CUESTIONARIO
1. Mencione las infecciones que produce el género Salmonella.
R.- fiebre tifoidea.
La infección suele producirse al comer alimentos contaminados, como pollo o
huevos poco cocidos.

salmonelosis
Es una enfermedad infecciosa causada por una enterobacteria llamada
Salmonella que está limitada en el tracto intestinal y cuyo exceso da lugar a
síntomas como diarrea, vómitos, dolor abdominal y malestar.
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paratifoideas
Enfermedad causada por los serotipos Salmonella paratyphi A , Salmonella
schottmuelleri o Salmonella hirschfeldi , que ataca por vía digestiva, por agua o
alimentos contaminados, y caracterizada por fiebre y dolor abdominal.

2. Mencione los diferentes tipos de Salmonella que son patógenos

para el hombre.
R.- Salmonella Typhi que causa la fiebre tifoidea y Salmonella Paratyphi que
causa la fiebre paratifoidea. Otros serotipos infectan animales y al ser humano,
entre ellos se encuentra Salmonella Enteritidis, que causó el brote de
gastroenteritis reciente.

Salmonella Typhi Salmonella Paratyphi

Salmonella Enteritidis
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3. Cite las pruebas bioquímicas de identificación de Salmonella y sus

características.
R.- agar TSI
contiene tres azúcares (dextrosa, lactosa y sucrosa), rojo fenol para detectar la
fermentación de carbohidratos, y sulfato ferroso para la detección de producción
de ácido sulfhídrico (indicado por el oscurecimiento de la base del tubo).
agar LIA
es un medio de cultivo ampliamente utilizado para la diferenciación de bacilos
Gram negativos entéricos, especialmente miembros del género Salmonella con
capacidad de fermentación de lactosa, sobre la base de la producción de H2S y
la actividad de la enzima Lisina decarboxilasa.
caldo Urea
La urea es una fuente de nitrógeno para aquellos organismos que producen
ureasa. El extracto de levadura es una fuente de vitaminas, esencial para el
crecimiento bacteriano.
Los fosfatos de potasio proporcionan una capacidad de amortiguación.
El rojo fenol es el indicador de pH.

9. BIBLIOGRAFÍA

1.-[citado el 4 de noviembre de 2021]. Disponible en: http: // file: /// C:

/Users/LENOVO/Documents/GESTION%202-2021/micro%20de
%20alimentos/RE-10-LAB-057%20MICROBIOLOGIA%20DE
%20%20ALIMENTOS.pdf
2.-Infecciones por Salmonella [Internet]. Msdmanuals.com. [citado el 4 de
noviembre de 2021]. Disponible en:
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https://www.msdmanuals.com/es/hogar/infecciones/infecciones-bacterianas-
bacterias-gramnegativas/infecciones-por-salmonella
3.-Salmonella, un microorganismo patógeno siempre presente [Internet].
Uchile.cl. [citado el 4 de noviembre de 2021]. Disponible en:
https://www.uchile.cl/noticias/75284/salmonella-un-microorganismo-patogeno-
siempre-presente
4.-Org. [citado el 4 de noviembre de 2021]. Disponible en:
http://www.scielo.org.co/pdf/biote/v20n2/0123-3475-biote-20-02-117.pdf
5.- Unam.mx. [citado el 4 de noviembre de 2021]. Disponible en:
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/Pagogenosnorm.Salmonella_17364.p
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