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Asignatura: Bioingeniería
Docente: Ing. Carlos Jácome Pilco
Nombre del estudiante: Miguel Angel Ortega
Ciclo: Octavo
Fecha: 02/12/2021
Periodo académico: Noviembre 2021 – Marzo 2022
Tema:
MEDIOS DE CULTIVO Y SU FORMULACIÓN, ASEPSIA Y ESTERILIDAD
1. INDICE
2.
1. INDICE...............................................................................................................................1
2. INTRODUCCION..............................................................................................................2
3. REDACCION DE CONTENIDOS...................................................................................3
Tema 1. Aspectos generales de un bioproceso..........................................................................3
3.1 Principales etapas de un bioproceso................................................................................3
3.2 Efectores internos y externos...........................................................................................3
3.3 Medios de cultivo y su formulación.................................................................................4
Tema 2. Componentes de un medio de cultivo.........................................................................6
3.4 Componentes y clasificación de medios de cultivo.........................................................6
3.5 Formulación......................................................................................................................8
3.6 Requerimientos generales de sustratos y medios de cultivo..........................................8
Tema 3. Tipos de medios de cultivo..........................................................................................9
3.7 Tipos de medios de cultivo...............................................................................................9
3.8 Diseño..............................................................................................................................11
3.9 Requerimientos nutricionales........................................................................................12
3.10 Disponibilidad de los componentes.............................................................................12
Tema 4. Materias primas fundamentales...............................................................................13
3.11 Materias primas fundamentales......................................................................................13
3.12 Optimización.................................................................................................................14
3.13 Esterilización y desinfección de medios de cultivo.....................................................15
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FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS Y RECURSOS NATURALES
DEL AMBIENTE
CARRERA DE AGROINDUSTRIAS
4. CONCLUSIONES............................................................................................................16
5. BIBLIOGRAFIA..............................................................................................................17
6. GLOSARIO..................................................................................................................18
3. INTRODUCCION
Los procesos de esterilización o desinfección son diariamente llevados a cabo, no
solamente en el laboratorio, donde son fundamentales para evitar la contaminación de
medios, cultivos, placas etc., sino también en otros ámbitos tales como los hospitales,
donde fallas en estos procedimientos aumentan la morbimortalidad de los pacientes.
Pensemos lo que sucede en los quirófanos donde se deben desinfectar pisos, paredes y
techos, esterilizar instrumental quirúrgico e indumentaria del personal, y descontaminar
el aire del ambiente. O en contraposición, lo que sucedería si materiales como catéteres,
agujas, jeringas, empleados en maniobras médicas diarias (extracción de sangre, vías
venosas, punciones lumbares, toracocentesis, etc.) fueran utilizados, aunque fuera con
niveles mínimos de contaminación. En este momento debe rápidamente familiarizarse e
interiorizarse con ciertos procesos de desinfección y antisepsia como la cutánea, previa
a la administración de un inyectable o durante la cura de una herida, la desinfección de
un termómetro clínico o el lavado de manos. Parece imprescindible entonces, que el
estudiante que se apresta a ingresar a la clínica en breve y que en este momento ya está
en contacto con distintas poblaciones bacterianas, debe saber manejar en forma fluida la
información que le permita discernir cuando es necesario desinfectar o esterilizar, y
llevar a cabo el proceso correspondiente en forma satisfactoria con el conocimiento de
los fundamentos de lo realizado, existen agentes como los alcoholes que son
antisépticos y desinfectantes a la vez, dado que el tema que se está abordando son los
métodos para controlar o destruir distintas poblaciones bacterianas, es necesario saber
previamente la cinética de dicha destrucción, es decir de qué modo muere una población
y que parámetros inciden sobre este efecto. Comencemos por definir algunos términos
que utilizaremos.
Figura 1
Ejecución de bioprocesos
Estos últimos pueden ser modificados por alteraciones del medio ambiente o más
precisamente por los efectores externos mientras que la existencia de un gen depende de
la especie del microorganismo considerado. Un gen está o no está, sólo su expresión
puede modificarse. Con el fin de mejorarla productividad de un proceso de
fermentación las cepas empleadas pueden someterse a tratamiento físico o químico de
mutación que al alterar algún sector del genoma logran aumentar la producción de
un metabolito, aunque también pueden disminuirla o incluso suprimirla, también se
puede dotar a un microorganismo de una capacidad genética nueva cuando se efectúa la
inserción de sectores del genoma de una especie en un microorganismo, haciéndose éste
capaz de producir metabolitos que desde el punto de vista genético de su especie no
podría hacerlo.
Es decir que los efectores internos pueden modificarse para lograr la optimización de un
proceso fermentativo, todos estos aspectos serán considerados especialmente en el
capítulo siguiente, que corresponde al mejoramiento de los microorganismos de interés
industrial. El comportamiento o expresión fenotípica, o sea lo que realmente se observa
como respuesta del microorganismo al medio ambiente en el reactor es, además, el
resultado de la influencia de las variables de naturaleza física y química que constituyen
los efectores externos.[ CITATION Lui161 \l 12298 ]
Figura 2
Medio de culivo
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Simples
Enriquecidos
Selectivos
Figura 3
Medio simple
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Medios enriquecidos: Son medios simples o comunes, a los que se le añaden ciertos
elementos como sangre, suero, líquido ascítico, huevo, glucosa, vitaminas, etc. lo que
permite el aporte de factores de crecimiento o sustancias que neutralizan agentes
inhibidores del crecimiento en bacterias exigentes nutricionalmente, entre algunos
ejemplos: agar sangre, medio de Löwenstein-Jensen, enriquecido con huevo para
facilitar el crecimiento de Mycobacterium; agar desoxicolato-lactosa (DLA),
enriquecido con lactosa y desoxicolato.
Figura 4
Medio enriquecido
Medios selectivos
Figura 5
Medio enriquecido
3.5 Formulación
Se refiere a los aspectos cuantitativos de los medios, es decir debe establecer las
concentraciones de cada componente a ser utilizadas, una primera aproximación nos da
la composición de biomasa del microorganismo a ser empleado, una composición
elemental y típica de la biomasa es (en de peso seco) Carbono, 46 48 Nitrógeno, 7 12
Fósforo, 1-3 Azufre, 0 5 1 0 Mg, 0,5-1%. Es decir que si queremos formular un medio
para producir una determinada cantidad de biomasa debemos proveer las distintas
fuentes que aseguren como mínimo las cantidades de elementos que deben ser
suministrados, la composición de un medio mínimo basado en este principio, que
además tiene en cuenta los requerimientos de las fuentes de energía, se determina
mediante la estequiometría de crecimiento y de formación del producto haciendo
posible formular adecuadamente un medio
Siempre que sea posible debe evitarse el uso de estiércol, debido a la variabilidad de sus
características, su heterogeneidad, la dificultad de controlar su descomposición
microbiológica, la variación de los contenidos de nutrientes y su posible grado de
infestación.
Medios Complejos: Fueron los primeros utilizados, y los más empleados se preparan a
partir de tejidos animales, y más raramente de vegetales. Su composición no es
exactamente definida, y por consiguiente no es rigurosamente constante. Esto puede
tener ciertos inconvenientes en condiciones experimentales, donde la reproductibilidad
no podrá ser exacta. En la práctica corriente estos medios dan excelentes resultados y
son los más empleados.
Medios líquidos: Son los que se presentan en este estado, denominándose por esta
razón caldos. El medio líquido más utilizado es el llamado caldo nutritivo, compuesto
principalmente de extracto de carne, peptona y agua. Se utiliza fundamentalmente
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cuando se pretende la obtención de una suspensión bacteriana de una determinada
concentración.
3.8 Diseño
La preparación de medios para el desarrollo de procesos de fermentación es una etapa
fundamental para asegurar la productividad de los mismos, para realizar una
fermentación usamos biorreactores en estos equipos se realiza el proceso de cultivo
también comúnmente denominado “fermentador”, sea en estado sólido o líquido, su
diseño debe ser tal que asegure homogeneidad entre los componentes del sistema y
condiciones óptimas para el crecimiento microbiano y la obtención del producto
deseado. Es importante tomar en cuenta los problemas de transferencia de calor y
oxígeno sobre la cama de sustrato, los cuales dependen de las características de la
matriz que se esté utilizando para la fermentación, siendo éste, uno los principales
factores que afectan el diseño y las estrategias de control, los criterios más importantes
para el diseño de un biorreactor pueden resumirse del siguiente modo dependiendo del
tipo de biorreactor y la fermentación a utilizar.
Son muy importantes también por su disponibilidad y costo reducido otras materias
primas que contienen hidratos de carbono como granos, melazas, celulosas, suero de
queso, etc. También se pueden emplear otros subproductos o efluentes de industrias
estos son:
Fuentes de carbono
Figura 6
Fuentes de carbono
Las melazas, subproducto de la industria azucarera, son una de las fuentes más baratas
de carbohidratos y por ese motivo se utilizan muy frecuentemente como aportadores de
carbono. Además, las melazas contienen también sustancias nitrogenadas, vitaminas y
elementos traza. Un inconveniente de las melazas es que su composición varía en
función de la materia prima usada para la obtención del azúcar, las condiciones
climáticas, la localidad y el proceso usado en la industria azucarera, el extracto de malta
contiene también sustancias nitrogenadas entre las que se incluyen péptidos, proteínas,
aminoácidos, purinas, pirimidinas y vitaminas. Otras fuentes de carbono son el almidón
y dextrinas, los que pueden ser metabolizados directamente por los organismos
productores de amilasas. En particular el almidón ha adquirido importancia en la
producción de etanol. Se utilizan también los líquidos sulfíticos de las papeleras. Se
trata de productos residuales de la industria del papel que contienen azúcar. Otra fuente
de carbono que está siendo cada vez más utilizada, debido a su gran disponibilidad y
bajo costo es la celulosa, que proviene de la paja, restos de mazorcas, turba y papel. Sin
embargo, a menudo este sustrato no puede ser utilizada directamente como fuente de
carbono, por lo que se deberá someter a hidrólisis previa, ya sea química o enzimática,
convirtiéndola en el jarabe de glucosa, que se usa en la producción de etanol, butanol,
acetona e isopropanol.[ CITATION Lui161 \l 12298 ]
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3.12 Optimización
En la Optimización pueden ocurrir situaciones en las cuales sea imperativo la
optimización de los medios de cultivo, entre ellas podemos destacar las siguientes:
Métodos de esterilización
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Los métodos térmicos de esterilización son comúnmente los más utilizados para
eliminar los microorganismos, incluyendo las formas más resistentes como lo son las
endosporas.
Una esterilización segura con calor húmedo requiere temperaturas mayores a las del
punto de ebullición del agua. Estas temperaturas son comúnmente alcanzadas por el
vapor bajo presiones elevadas en un autoclave. Cuando la presión de un gas aumenta, la
temperatura del gas aumenta proporcionalmente[ CITATION Fab19 \l 12298 ].
5. CONCLUSIONES.
Un medio de cultivo es una técnica de que consta de un gel o una solución que
contiene los nutrientes necesarios para permitir el desarrollo de diferentes
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microorganismos (bacterias, levaduras y mohos) necesarios para el sector clínico
e industrial, en condiciones favorables de pH y temperatura, el crecimiento de
virus, microorganismos, células, tejidos vegetales o incluso pequeñas plantas, es
por eso que los medios de cultivo para microbiología aportan gran fuerza en la
búsqueda de soluciones efectivas.
6. BIBLIOGRAFIA
Vergara, V. ( 2017). Índice de crecimiento absoluto (ICA) para diferentes medios de cultivo de
origen natural con la bacteria Enterobacter spp . https://hdl.handle.net/10901/17607:
Universidad Libre Pereira.
7. GLOSARIO
Agente biológico: Un agente biológico o bioagente es un organismo, como una
bacteria, un virus, un parásito, un hongo, etc., una toxina con la capacidad de afectar de
manera adversa la salud de los humanos en diversos modos.
La biocatálisis: Se refiere al uso de sistemas vivos o sus partes para acelerar las
reacciones químicas. En los procesos biocatalíticos, los catalizadores naturales, como
las enzimas, realizan transformaciones químicas en compuestos orgánicos.