MATERIALES Y MÉTODOS centrifugación de la suspensión de la

yema de huevo para la evaporación del

II. Cuantificación de lípidos totales de
solvente orgánico. El producto
la yema de un huevo
resultante de la evaporación del
Se peso un beaker vacío de 100ml con solvente (residuo), se pesó una vez el
el fin de considerar su masa, a este se beaker estuvo a temperatura ambiente,
le añadió 1ml de extracto clorofórmico. ya que las temperaturas pueden afectar
Se procedió a evaporar el solvente en las lecturas en la balanza analítica. Este
una plancha de calentamiento previendo peso (2), se relaciona con el primero,
de que el residuo no se quemara, luego obtenido de pesar el beaker vacío
de esto se peso el beaker nuevamente usado en este estudio, para determinar
al encontrarse a temperatura ambiente y por diferencia de pesos los lípidos
se conservó para la determinación del totales en un 1ml de extracto de
colesterol. Por ultimo se determino por cloroformo.
diferencia de pesos la cantidad de
Tabla 2. Cuantificación de lípidos
lípidos totales.
totales obtenidos a partir de 1ml de
III. Aislamiento de colesterol solvente evaporado (extracto de
cloroformo)
Se añadió 1ml de mezcla de extracción
al residuo seco del extracto Peso1 del T(° C) de la Peso2 Lípidos
beaker de plancha del totales por
clorofórmico, este se agito hasta la 100ml beaker diferencia
(evaporació
dilución completa. Se adicionaron 10ml n del despué de pesos en
de acetona fría y se dejo en reposo solvente) s de 1ml de
durante 20min en un baño de agua- evapora extracto
r el clorofórmic
hielo. Se trasvaso toda la mezcla a un solvent o
tubo centrifuga de vidrio y se centrifugo e
a 2000rmp por 10min. Se retiro 56,2295 210° C 56,32g 0,1g
cuidadosamente el sobrenadante y se g
midió su volumen. Se colocaron 0,2ml
del sobrenadante obtenido en un tubo III. Aislamiento de colesterol
de ensayo y este se llevó a un baño de
agua hirviendo hasta que se evaporo el Al tomarse en cuenta el estracto de
solvente orgánico, este se dejo enfriar y cloroformo y el residuo seco anterior se
se añadieron 2ml de cloroformo, realizo una disolución, con la que al
finalmente a esta fracción se le adicionar la acetona se espero
denomino MP.
RESULTADOS
II. Cuantificación de lípidos totales de
la yema de un huevo
Se tomo en cuenta el extracto DISCUSION
clorofórmico obtenido de la
II. Cuantificación de lípidos totales de
la yema de un huevo
En este proceso se cuantificaron los
lípidos totales de 1ml de extracto
clorofórmico con ayuda de la
temperatura, de esta manera se
evaporo el solvente y quedo precipitado
un residuo seco, con el que se
determinarían los lípidos totales. En el
material seco de la yema se concentran
las lipoproteínas, las cuales están
conformadas por lípidos, estas
moléculas se pueden disolver en
solventes orgánicos debido a su
naturaleza hidrofóbica. El reactivo
involucrado (cloroformo) actúa de
manera efectiva como disolvente, ya
que es un químico útil debido a
la polarización de sus enlaces C-Cl, es
usualmente estable y miscible con la
mayoría de los compuestos orgánicos
lipídicos y saponificables por lo que es
una herramienta apreciada en síntesis
orgánica (WayBachMachine,2021). El
objetivo de este método de extracción
por evaporación de solvente, es extraer
lípidos presentes en una muestra con
ayuda de un disolvente líquido,
calentando el disolvente a temperaturas
superiores a la del ambiente hasta llegar
a su punto de ebullición, logrando su
evaporación y pesada final del residuo.
Esta técnica de separación sólido-
líquido es comúnmente usada para la
determinación del contenido graso en
muestras de diferente naturaleza. El
resultado representa el contenido de
sustancias extraíbles, que
mayoritariamente son grasas, aunque
también pueden ser otras sustancias
como las vitaminas liposolubles y
pigmentos en el caso de su
determinación en alimentos. (González
et al. 2020)
III. Aislamiento de colesterol
El colesterol es una molécula tan
hidrófoba que la solubilidad de
colesterol libre en agua es de 10−8 M y,
al igual que los otros lípidos, es
bastante soluble en disolventes
apolares como el cloroformo (CHCl3). A
los lípidos se los puede clasificar en
lípidos neutros (acilgliceroles y ésteres
de colesterol) y lípidos que poseen una
cabeza polar y una “cola”
hidrocarbonada no polar (fosfolípidos y
colesterol libre). Los métodos de
aislamiento de ambas clases de lípidos
se basan en la facilidad con que estas
sustancias hidrofóbicas (aun las que
poseen una cabeza polar), pueden
extraerse de materiales biológicos
mediante homogeneización en mezclas
de solventes orgánicos. En algunos
casos se puede lograr una separación
cruda por medio de la extracción
selectiva con solventes. Los lípidos
neutros menos polares (triglicéridos y
colesterol) pueden extraerse con
cloroformo, éter o acetona. Los lípidos
más polares pueden ser aislados
selectivamente por medio de una
extracción inicial con acetona fría.
(Katan,2018). La acetona tiene
capacidad para separar compuestos
lipídicos más polares de los menos
polares, al tener dos sustituyentes
metilo, tiene la capacidad de tener
integraciones de fuerzas van der wals,
Estas fuerzas son las que les permiten
interactuar con las cadenas
carbonatadas de los lípidos de cadena
corta, es decir los mas polares,
haciendo posible que se disuelvan y
permitiendo la extracción o aislamiento
(la acetona actúa como un solvente
intermedio) (Rondon,2022). Tanto los
fosfolípidos, como los acilgliceroles y
distintos tipos de colesterol pueden
extraerse también con buena eficiencia
en mezclas de cloroformo (Katan,2018).