PROBLEMARIO

Problema 1 (20 puntos)

Usted trabaja en el laboratorio de Control de calidad en la empresa “Los buenos alimentos”, el área de producción
le envía una muestra de un alimento de consumos humano, de esta muestra le solicita determinar la cuenta total
de microorganismos (bacterias y hongos) por gramo de alimento, así como la presencia de microorganismos
patógenos. Para ello, usted realiza las siguientes diluciones en serie: 3 (1:8), 2(1:6), 3(1:4) y 2(1:3) e inocula por
duplicado 0.1 ml de cada dilución en placas de medio de cultivo cuenta estándar. Después de incubar encontró los
siguientes resultados.

En el primer tubo de la dilución: 1:3 Placa 1 = 72 colonias bacterianas

Placa 2 = 64 colonias bacterianas

En el segundo tubo de la dilución 1:6 Placa 1 = 32 colonias de hongos

Placa 2 = 27 colonias de hongos

Conteste lo siguiente:

a) Indique la serie de diluciones completas y ¿cuál sería la dilución total del sistema? (5 puntos)

b) ¿Cuál es el factor de dilución acumulado que utiliza para realizar la cuantificación de las bacterias y en cuál es el
factor de dilución acumulado utilizado para la cuantificación los hongos? (4 puntos)

c) ¿Cuál es la concentración de hongos y bacterias/g de muestra en el alimento? (4 puntos)

d) ¿Qué haría para determinar si hay presencia de microorganismos patógenos y cómo los cuantificaría?
(7 puntos)

Problema 2

Diseñe una serie de diluciones para ajustar una suspensión de células de Escherichia coli a 4.5X105
células/ml partiendo de una suspensión original que contiene 3.45X1010 células/mL. Realice un
esquema de las diluciones seriadas que haría para obtener esta suspensión en un volumen de 5.0 ml
ajustada a la concentración deseada, indicando:

a. La dilución total que realizaría para llegar a la concentración solicitada.

b. El factor de dilución individual para cada dilución.
c. El factor de dilución acumulado para cada dilución.
d. El volumen de transferencia para cada dilución.
e. El volumen de diluente para cada dilución.
Problema 3
Usted es un investigador trabajando en el laboratorio de Microbiología General de la ENCB, en el proyecto de
investigación realiza un experimento con Escherichia coli modificada genéticamente, para ver los efectos de este
microorganismo sobre un ser vivo decide inocularle 10 bacterias a un ratón, para lo cual realiza lo siguiente: a partir
de una suspensión conteniendo 1X1010 bacterias /ml del microorganismo modificado, usted realiza las siguientes
diluciones: 2(1:6), 3(1:8), 2(1:4) 2(1:10), de esta última dilución toma 0.5 ml y le adiciona 0.3 ml de solución de
tiomersal al 0.001%. De la solución final usted inocula 0.25 ml a un ratón.

Conteste las siguientes preguntas:

a) Realice el esquema de las diluciones que realizará para obtener el número de bacterias deseado.
b) ¿Cuál es la dilución total del sistema de diluciones?
c) ¿Cuántas bacterias/ml hay en cada dilución?
d) ¿Cuántas bacterias realmente le inoculó al ratón?

Problema 4
En la compañía que trabaja le pidieron evaluar el efecto que tiene un antibiótico de reciente fabricación sobre el
crecimiento de Streptococcus pneumoniae, Mycobacterium tuberculosis, Escherichia coli y Proteus sp. Para ello
tomó un vial que contenía 5 ml de solución inyectable con una concentración de 1500 mg del principio activo.
Posteriormente realizó diluciones en tubo, de acuerdo al esquema que se muestran en la tabla. A partir de ellas
preparó cajas mezclando 2 ml de cada dilución con 18 ml de agar estéril y fundido a 45°C. Se preparó una caja
extra, libre de antibióticos, como testigo. Complete los datos que faltan en la tabla:

Tubo 1 2 3 4 5 6 7 8
Vol. antibiótico (ml) 1.0 -- -- -- -- -- -- --
Vol. de diluyente (ml) 6.0 4.5 8.0 2.5 3.0 9.0 5.5 1.5
Vol. de transferencia -- 2.5 2.0 1.5 1.5 1.0 1.0 1.5
(ml)
Dilución individual
Dilución acumulada
Concentración final en
tubo(µg/ml)
Caja 1 2 3 4 5 6 7 8
Dilución acumulada en
placa
Concentración final en
placa (µg/ml)