UNIVERSIDAD NACIONAL

AUTÓNOMA DE MÉXICO
FACULTAD DE ESTUDIOS
SUPERIORES CUAUTITLÁN
LICENCIATURA EN FARMACIA
LABORATORIO DE
BIOFARMACIA

DEPURACIÓN
(REPORTE)

Equipo 2
AUTORES:
LIZARDI RESENDIZ JOSE RAUL
Introducción

La concentración activa del fármaco en el organismo humano disminuye como

consecuencia de dos mecanismos fisiológicos: metabolismo y excreción. El metabolismo o
biotransformación ocurre de manera preferente, aunque no exclusiva, en el hígado;
intestino, placenta y pulmón también pueden participar en dicho proceso que tiene como
objetivo la transformación enzimática de cualquier sustancia exógena en metabolitos
hidrosolubles para facilitar su excreción renal.

La mayor parte de los fármacos se metabolizan en el organismo humano a metabolitos, que

pueden ser activos o inactivos. La velocidad con que se metaboliza cada fármaco, la
variedad de sus metabolitos y su concentración dependen del patrón metabólico
genéticamente establecido de cada individuo y de la influencia de numerosos factores
fisiológicos, iatrogénicos y patológicos que condicionan notables diferencias de unos
individuos a otros. De hecho, las diferencias en el metabolismo de los fármacos es el factor
que más contribuye a que dosis iguales den lugar a niveles plasmáticos distintos en
diferentes individuos.

Para esta práctica previamente ya se estableció el manejo correcto de la

espectrofotometría, tomando en cuenta la mayoría de los factores a considerar para el uso
del espectrofotómetro y así obtener una correcta curva de valoración. Se puso en marcha
el presente trabajo simulando y representando el metabolismo de un fármaco (depuración),
para ello; se utilizó a la cafeína como reactivo para llevarlo a cabo en la experimentación,
menguando la concentración del fármaco mediante diluciones; haciendo referencia a el
paso del tiempo durante el tratamiento en el organismo (que este ocasiona que pierda
concentración), para posterior llevarlo al espectrofotómetro y mediante este valorar el
déficit de concentración gradual derivado de las diluciones de este.

Objetivo
Procedimiento Experimental

Equipo, Materiales y Estándar.

1.1. Espectrofotómetro UV visible CARY

1.2. Balanza analítica

1.3. 3 Matraces volumétricos de 250 mL.

1.4. 3 Vasos de pp 50mL

1.5. 3 Vasos de pp 500mL

1.6. 2 Pipetas volumétricas de 10 mL.

1.7. 2 Pipetas volumétricas de 25 mL.

1.8. 2 Pipetas volumétricas de 50 mL.

1.9. 3 Espátulas

1.10. 2 Pisetas

1.11. Celdas de cuarzo

1.12. 25 tubos de ensaye

1.13. 2 Gradillas

1.14. 3 Varillas de vidrio

1.15. Estándar de cafeína

1.16. 3 Agitadores magnéticos

1.2 Procedimiento de lavado de material

1.2.1 Lavar todo el material con agua y con jabón, para eliminar impurezas.

1..2.2. Enjuagar perfectamente, hasta que no se formen burbujas.

1.2.3. enjuagar adicionalmente con agua destilada

1.2.4 Secar el material con servitoallas evitando que queden residuos de papel.

2. Preparación de solución estándar.

 1.1. Pesar en un vaso de pp de 50mL, 10mg de cafeína de sustancia estándar de referencia.
Anotar la cantidad exacta pesada en la bitácora BF-BIT-EQ-001

1.2. Adicionar al aproximadamente 20mL de agua destilada al vaso de pp y diluir la cafeína.

1.3. Agregar un poco de metanol acido hasta que se disuelva completamente la cafeina

1.4. Transferir la solución del punto 2.3 en un matraz volumétrico de 250mL, realizar tren
enjuagues al vaso de pp y aforar el matraz para obtener una solución con concentración
de 40µg/mL.

1.5. Transferir la solución 2.4 a un vaso de precipitado de 500ml.

Realizar el mismo procedimiento por triplicado.

3. Procedimiento de Depuración.

3.1. Volumen Uno:50 mL .

3.1.1.Rotular las pipetas, una para agua destilada (AD) y otra para la solución 2.5 (C).

3.1.2.Tomar una alícuota con una pipeta volumétrica (C) de 50 mL de la solución 2.5.

3.1.3.Transferir a un tubo de ensaye, 10 ml de la solución tomada y desechar la restante a

un vaso de precipitado de 500 ml. rotulado como desechos. ( En un tiempo de 1
minuto).

3.1.4.Reponer con agua destilada la misma cantidad tomada de solución 2.5.con la pipeta
AD (en 1 minuto)

3.1.5.Mantener 2 minutos en agitación

3.1.6.Transferir la solución 3.1.3 a una celda de cuarzo. (Tomar las celdas del lado opaco
para no hacer interferencia).

3.1.7.Leer en el espectrofotómetro CARY la solución 3.1.6. (seguir el procedimiento

número 4)

3.1.8.Repetir los pasos 3.1.1. - 3.1.7 diez veces.

3.2. Volumen Dos:25 mL.

3.2.1.Rotular las pipetas, una para agua destilada (AD2) y otra para la solución 2.5 (C2).

3.2.2.Tomar una alícuota con una pipeta volumétrica (C2) de 25 mL de la solución 2.5.
 3.2.3.Transferir a un tubo de ensaye, 10 ml de la solución tomada y desechar la restante a
un vaso de precipitado de 500 ml. rotulado como desechos. ( En un tiempo de 1
minuto).

3.2.4.Reponer con agua destilada la misma cantidad tomada de solución 2.5.con la pipeta
AD (en 1 minuto)

3.2.5.Mantener 2 minutos en agitación

3.2.6.Transferir la solución 3.2.3 a una celda de cuarzo. (Tomar las celdas del lado opaco
para no hacer interferencia).

3.2.7.Leer en el espectrofotómetro CARY la solución 3.2.6. (seguir el procedimiento

número 4)

3.2.8.Repetir los pasos 3.2.1. - 3.2.7 veinte veces.

3.3. Volumen Tres: 10 mL.

3.3.1.Rotular las pipetas, una para agua destilada (AD3) y otra para la solución 2.5 (C3).

3.3.2.Tomar una alícuota con una pipeta volumétrica (C3) de 10 mL de la solución 2.5.

3.3.3.Transferir a un tubo de ensaye, 10 ml de la solución tomada y desechar la restante a

un vaso de precipitado de 500 ml. rotulado como desechos. (En un tiempo de 1
minuto).

3.3.4.Reponer con agua destilada la misma cantidad tomada de solución 2.5.con la pipeta
AD3 (en 1 minuto)

3.3.5.Mantener 2 minutos en agitación

3.3.6.Transferir la solución 3.3.3 a una celda de cuarzo. (Tomar las celdas del lado opaco
para no hacer interferencia).

3.3.7.Leer en el espectrofotómetro CARY la solución 3.3.6. (seguir el procedimiento

número 4).

3.3.8.Repetir los pasos 3.3.1. - 3.3.7 cincuenta veces.

4. Procedimiento para Leer en el Espectrofotómetro

4.1. Preparar el Espectrofotómetro UV visible CARY

4.1.1.Encender el Espectrofotómetro 10 min antes de la operación.

4.1.2.Programar el sistema del Espectrofotómetro

4.1.2.1. Indicar el programa a utilizar en el barrido “Scam”

4.1.2.2. Esperar a que la imagen de semáforo cambie a verde.

 4.1.2.3. Localizar el botón “Setup” y dar click y para ajustar la longitud de onda.

4.1.2.3.1. 4.1.2.3.1. Ajustar longitud de onda de mayor de 350nm (stat) a

menor 200nm (stup)

4.1.2.3.2. Ajustar “mode” a modo de respuesta

4.1.2.3.3. Ajustar las lecturas min a 0 y max a 3

4.1.2.4. Localizar el botón “Scan Control”

4.1.2.4.1. Ajustar la velocidad de arrastre a 1500nm/min

4.1.2.4.2. Indicar Scan rate

4.1.2.5. Ir a la pestaña Baseline

4.1.2.5.1. Indicar Baceline correctión

4.1.2.6. Ir a la sección de “Reports”

4.1.2.6.1. Indicar el nombre del analista

4.1.2.6.2. Colocar comentario deseado

4.1.2.7. Ir a la sección de “Peaks”

4.1.2.7.1. Indicar que se desea observar los picos máximos “Maximinum

Peaks”

4.1.2.7.2. Indicar que se desea observar todos los picos máximos “All Peaks

4.2. Abrir el compartimento de muestra y colocar la solución blanco, ajustar a 0 la Abs

4.3. Sacar la celda con el blanco.

4.4. Introducir la celda con la solución

4.5. Registrar las absorbancias en la bitácora BF-BIT-EQ-001.