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Fase 3 Metodos Instrumentales Colaborativo
Fase 3 Metodos Instrumentales Colaborativo
Grupo: 21
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Contenido
1. Introducción.............................................................................2
2. Objetivos..................................................................................3
3. Procedimiento para la determinación de Pb en leche.................4
Plantea el procedimiento de la preparación de muestra para análisis........4
Propone una posible alternativa de solución al problema identificado a
través de métodos instrumentales.......................................................6
Define las relaciones matemáticas para identificar y determinar el analítico
de la problemática identificada...........................................................7
4. Ejercicios Individuales..............................................................7
Estudiante 1....................................................................................8
Estudiante 2....................................................................................9
Angélica Yurani Sierra González........................................................10
Estudiante 4...................................................................................11
Estudiante 5...................................................................................11
5. Referencias bibliográficas.......................................................12
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1. Introducción
Los métodos instrumentales son métodos analíticos que se basan en la
medida de las propiedades físicas de los analitos (conductividad, potencial de
electrodo, absorción o emisión de luz, relación carga/masa, fluorescencia,…)
para:
La determinación cuantitativa o cualitativa de los analitos: métodos no
separativos.
La separación de varios analitos: métodos separativos.
Los sistemas instrumentales aplicados al análisis y control químicos son
ampliamente aceptados como métodos que ahorran tiempo, requieren
menos separaciones químicas y son seguros y sensibles. La ventaja que
tienen sobre los métodos de análisis “por vía húmeda” deriva directamente
del hecho de que determinan la composición química por medio de la
medición de las propiedades físicas. Como resultado, los aparatos y los
procedimientos de interés son comunes tanto a lo que tradicionalmente se
denomina análisis como a las investigaciones químicas.
Los métodos instrumentales se diferencian de los métodos analíticos clásicos
principalmente en que no se requiere que haya reacción química y que son
métodos relativos. Es decir, se requiere realizar un calibrado para relacionar
la señal medida con la propiedad que se quiere obtener y esta relación sólo
se puede aplicar a las condiciones en la que se ha determinado.
Sólo es necesario recordar el gran número de propiedades físicas de las
sustancias: índice de refracción, color, susceptibilidad magnética,
conductividad térmica, grado de acidez y muchas otras; para percibir la
magnitud del campo de la medición instrumental. Algunas propiedades son
específicas y permitirán una identificación y determinación cuantitativa
directa de una sustancia. Otras, tales como la conductividad eléctrica y el
índice de refracción, no son específicas. Sin embargo las propiedades no
especificas pueden usarse también para verificar la identidad de una
sustancia cuando se conocen otras características (la identidad y pureza de
los líquidos orgánicos puede confirmarse determinando el índice de
refracción).
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2. Objetivos
Aprender los principios básicos de espectrofotometría UV-Vis, ley de
Lamber Beer, cualificación y cuantificación de analitos de una muestra
problema a través de espectroscopia UV-Vis, curvas de calibración.
Entender los principios básicos de análisis elemental, cualificación y
cuantificación de analitos de una muestra problema a través de
absorción atómica.
Aplicar los principios básicos de espectroscopia FTIR, cualificación y
cuantificación de analitos de una muestra problema a través de
espectroscopia FTIR.
Comprender los principios básicos de cromatografía, cromatografía en
fase líquida, cromatografía en fase gaseosa, cromatografía por
exclusión por tamaño.
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3. Procedimiento para la determinación de Pb en leche
Plantea el procedimiento de la preparación de muestra para análisis.
El Pb es determinado en la solución de la muestra mediante
Espectrofotometría Absorción Atómica por Horno de Grafito.
1. Se emplea una lámpara de Cátodo Hueco de Pb como fuente y una
lámpara de Deuterio como corrector de fondo.
2. Pesar aproximadamente 1,0 g de muestra (leche líquida) por
duplicado.
3. En tubos de polipropileno de fondo cónico de 50 mL de capacidad con
tapa rosca resistente a 110ºC.
4. Bajo campana de extracción de gases adicionar lentamente 5 mL de
HNO3 del (65 - 70%) (Para análisis de trazas) y ajustar la tapa
herméticamente.
5. Preparar simultáneamente un blanco de reactivos.
6. Realizar digestión en el equipo de microondas: Digestión en sistema
cerrado.
7. Seleccionar el método en el sistema de hondo microondas Marca CEM
Modelo MARS-5 de acuerdo a la programación establecida
previamente.
8. En este caso el Método es denominado: T Animal 30 Tubos; la
programación establecida:
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14. La muestra se puede guardar a temperatura ambiente sino se a
analizar inmediatamente en el término de una semana o si el análisis no
va a ser dentro de la semana siguiente se puede guardar en la nevera por
aproximadamente dos meses.
15. Utilizando una micropipeta, dispensar 1,5 mL de cada una de las
soluciones de calibración y de las muestras en las copas del
automuestreador del horno de grafito.
16. Preparar una solución del modificador de matriz de nitrato de
magnesio de manera que el equipo con una cantidad de 50 µg en 5 µL.
Realizar una dilución de 1:5
17. Ubicar cada en cada uno de las copas del automuestreador del horno
de grafito, de acuerdo al método seleccionado (Plomo en Leche 2014); el
blanco, el diluyente, el modificador de matriz, estándar maestro.
18. Determinación del contenido de Pb.
19. Seleccionar el método para la determinación de Pb, Plomo en Leche
2014.
20. Programar las muestras a analizar y poner el equipo a punto de
acuerdo con las instrucciones del fabricante y buenas prácticas de
laboratorio
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Propone una posible alternativa de solución al problema identificado a través
de métodos instrumentales.
MUESTRA DE LECHE.
Método seleccionado:
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radiación electromagnética a una longitud de onda característica del elemento a medir. Es
necesario para la medida que el elemento se encuentre en su forma atómica. Para ello se realiza
constan de una fuente de luz “blanca” caracterizada por un espectro de emisión continuo en un
intervalo amplio de longitudes de onda y de un monocromador que actúa como filtro óptico
transmitiendo un haz de luz de longitud de onda fija λ e intensidad I0. Este haz de luz penetra en
intensidad del haz a la salida La intensidad del haz de luz se va atenuando a medida que atraviesa
luz de intensidad I recorre una distancia dL en una muestra con una concentración de moléculas
dI = − k ⋅[B]⋅I⋅ dL
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lo cual da lugar a la ley de Beer-Lambert 1 para la absorción que relaciona la intensidad a la salida e la
muestra If , con la intensidad inicial I0, la concentración de moléculas y la distancia recorrida por la luz
en la muestra, L:
MATERIALES:
pipetas y matraces aforados
la balanza de precisión.
PROCEDIMEINTO:
Para determinar el contenido en plomo en una muestra de leche contaminada, se toma 1.0 mL de
la leche y se diluye a un volumen final de 5.0 mL, se realiza la medida por espectroscopia de
absorción atómica y se obtiene una señal de absorbancia de 0.293 a 283.3 nm.
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DEFINE LAS RELACIONES MATEMÁTICAS PARA IDENTIFICAR Y
DETERMINAR EL ANALÍTICO DE LA PROBLEMÁTICA IDENTIFICADA
EJEMPLO MATEMATICO BAJO SUPUESTO
Para determinar el contenido en plomo en una muestra de leche contaminada, se toma 1.0 mL
de la leche y se diluye a un volumen final de 5.0 mL, se realiza la medida por espectroscopia de
absorción atómica y se obtiene una señal de absorbancia de 0.293 a 283.3 nm. Una segunda
muestra de leche de 1.0 mL es fortificada con 1.00 µL de un estándar de plomo de 1860 ppb y
diluido posteriormente a un volumen final de 5.0 mL. Se realiza la medida de esta nueva muestra
1∗10−3∗1860
C Pb+
5 0,436
= =0,7623 ppb
C 0,293
medida):
PROBLEMA ANALÍTICO
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Estudiante N° 1
Para la determinación del contenido de hierro en harina por el método
de espectroscopia UV-Vis, se obtuvieron los siguientes datos de
absorbancia para las soluciones estándar:
1 2 0,115
2 4 0,223
3 6 0,345
4 8 0,457
5 10 0,534
6 12 0,589
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métodos de absorción atómica y emisión atómica.
Indique 4 propiedades que debe tener una buena fase estacionaria en
cromatografía.
1.
CONTENIDO DE HIERRO HARINA
0.7
0.4
0.3
0.2
0.1
0
0 2 4 6 8 10 12 14
CONCENTRACION (PPm)
absorbancia de la misma.
2. y=0,0488 x +0,0357
0,250
−0,0357=x
0,0488
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Tiene una precisión del orden interferencias.
del 1% del coeficiente de Solo pueden analizar elementos
variación. de uno en uno.
La preparación de la muestra No se pueden analizar todos los
suele ser sencilla. elementos del Sistema
Tiene relativamente pocas Periódico.
interferencias. Por ser una técnica de
Su manejo es sencillo. absorción, sus curvas de
El precio es razonable. calibrado sólo son lineales en
Existe abundante bibliografía. un corto rango de
concentración.
EMISION ATOMICA Menor interferencia entre Equipo más caro.
elementos consecuencia
directa de sus temperaturas Mayor coste de operación que
más elevadas. la espectroscopia de absorción
Se pueden obtener buenos atómica.
espectros para la mayoría de Menor precisión que la
los elementos con unas espectroscopia de absorción
mismas condiciones de atómica.
excitación, y en consecuencia,
es posible registrar
simultáneamente los
espectros para docenas de
elementos.
Permiten la determinación de
bajas concentraciones de
elementos que tiende a
formar compuestos
refractaorios, esto es,
compuestos que son muy
resistentes a la
descomposición térmica, tales
como B, P, U, Zr Nb.
Permiten la determinación de
no metales como Cl, Br, I y S.
Son aplicables en unos
intervalos de concentración
que abarcan varios órdenes de
magnitud.
Menos tiempo de análisis.
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4. Indique 4 propiedades que debe tener una buena fase estacionaria en
cromatografía.
c) Limpieza de las placas. Muchas placas están contaminadas con grasa o agentes
4. Ejercicios Individuales
Por orden de ingreso al foro, cada estudiante resuelve los siguientes
ejercicios con base en la lectura y análisis de las siguientes referencias que
se encuentran en el entorno de conocimiento y que se asocian a los métodos
instrumentales de espectroscopia UV-Vis, absorción atómica, espectroscopia
FTIR y cromatografía:
Estudiante 1
1a Para la determinación del contenido de hierro en harina por el
método de espectroscopia UV-Vis, se obtuvieron los siguientes datos
de absorbancia para las soluciones estándar:
Concentración
Estándar Absorbancia
(ppm)
1 2 0,115
2 4 0,223
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3 6 0,345
4 8 0,457
5 10 0,534
6 12 0,589
Estudiante 2
2ª Para la determinación del contenido de cromo en un alimento por el
método de espectroscopia UV-Vis, se obtuvieron los siguientes datos
de absorbancia para las soluciones estándar:
Concentración
Estándar Absorbancia
(molar)
1 2,0 0,115
2 4,0 0,227
3 6,0 0,344
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4 8,0 0,457
5 10,0 0,533
6 12,0 0,589
Concentración
Estándar Absorbancia
(molar)
1 0 0,000
2 0,1 0,130
3 0,2 0,235
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4 0,3 0,363
5 0,4 0,476
6 0,5 0,625
Estudiante 4
4ª Para determinar la concentración de níquel en un alimento se
construyó la siguiente curva de calibración:
Concentración Porcentaje de
Estándar
(ppm) Tramitancia (%)
1 32 55,2
2 48 39,0
3 60 28,1
4 80 21,0
5 100 15,0
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A partir de los datos de la tabla:
-Grafique los datos experimentales de absorbancia en función de la
concentración teniendo en cuenta que:
A=2-Log T
-Utilice el método de mínimos cuadrados para realizar un ajuste
lineal que le permita determinar la ecuación correspondiente.
4b A partir de la curva anterior, determine la concentración de níquel en
mg en cada 100 g de muestra, si un 1,0 g de una muestra
problema, se disolvió a 100 mL y se midió dando una Tramitancia de
20 %
4c Indique cuales son los principios básicos de espectroscopía de
absorción atómica.
4d ¿Cómo se clasifica la cromatografía de acuerdo al estado de las
fases?
Estudiante 5
5a Para determinar la concentración de plomo en una muestra de leche
se construyó la siguiente curva de calibración:
Concentración Porcentaje de
Estándar
(ug/cm3) Tramitancia (%)
1 2,3 85,0
2 4,6 72,0
3 6,9 62,5
4 9,2 54,0
5 11,5 48,5
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lineal que le permita determinar la ecuación correspondiente.
5b A partir de la curva anterior, determine la concentración de una
muestra de leche con una Tramitancia de 65 %
5c Indique cuales son los principios básicos de espectroscopía de
emisión atómica.
5d ¿En cromatografía porque en necesario efectuar ensayos
preliminares antes de la separación cromatográfica?
5. Referencias bibliográficas
Chatwal, G. R., Anand, S. K. (2008). Spectroscopy: atomic and
molecular (pp. 14-75, 176-253). Mumbai: Himalaya Publishing House.
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