UNIVERSIDAD TECNICA DE ESMERALDAS

"LUIS VARGAS TORRES"

FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS

Escuela de Ciencias Forestales

Quinto Ciclo

ASIGNATURA

Biotecnología Forestal

TEMA:

Propagación in vitro a partir de meristemas con soluciones caseras

CATEDRATICO

Ing. Santiago Luzon

ELABORADO POR:

Laura Suarez Soto

Esmeraldas – Ecuador

2019-2019
 1. ANTECEDENTES

El cultivo in vitro permite el crecimiento y desarrollo de material vegetal en

recipientes que lo separan del ambiente exterior y lo mantienen en condiciones

controladas y asépticas. Entre las diversas técnicas de cultivo in vitro, la

micropropagación consiste en la producción clonal de vegetales a partir, generalmente,

de ápices o explantos nodales de una planta madre. La gran producción de nuevas

plantas se ve favorecida gracias al rápido crecimiento del material vegetal in vitro y a la

proliferación de tallos durante los subcultivos.[ CITATION NAV79 \l 2058 ]

Una parte importante del cultivo in vitro son los Medios de Cultivo ya que en

ellos se encuentran las sustancias necesarias para el crecimiento y desarrollo de los

tejidos vegetales. Un medio de cultivo es una solución acuosa en donde se encuentran

disueltas sales minerales que aportan los elementos esenciales Macronutrientes (N, P, K,

S. Ca y Mg) y Micronutrientes (Fe, B, Mn, Zn, Cu, Mo, y Co) [ CITATION Seg10 \l

2058 ].

El cultivo del meristemo apical de un tallo se emplea para la obtención de

plantas libres de virus ya que estos patógenos tienen dificultades para alcanzar esta zona

cuando la planta está creciendo activamente. [ CITATION NAV79 \l 2058 ]

2. OBJETIVOS

2.1. General
 Realizar una propagación in vitro a partir de meristemas con soluciones
caseras

2.2. Específicos
 Preparar diferentes medios de cultivos
 Utilizar diferentes plantas para cortar las partes del meristema y utilizar para
la propagación.
 3. DESARROLLO

3.1. Materiales.
Material de Laboratorio Reactivos

 FRASCOS DE CRISTAL (4 por  Lavajillas.

grupo).  Lejia.
 Olla.  MEDIO DE CULTIVO:
 Guantes.  FÓRMULA DEL PLÁTANO
 Mascarilla de papel.  (para 1 litro)
 Espátula.  100g de plátano maduro hecho
 Bisturí.  puré o licuado
 Mechero de alcohol.  10 g de agar-agar.
 Soporte y rejilla.  15 g de azúcar.
 Varilla de vidrio.  900 ml de agua destilada.
 Pinzas metálicas.  1,2 g Tiamina *
 Trapo.
Material biológico
 Papel de aluminio (o papel film).
 Gasa estéril.  Planta de limón

 Cinta adhesiva (o film de  Raíz de chiyangua

parafina) y etiquetas.
 3.2. Procedimiento

Luego de la desinfección superficial, las semillas o las yemas dependiendo del material
seleccionado, se ponen en medio de cultivo estéril. Para obtener un meristemo apical es
necesario tomar segmentos apicales de tallos obtenidos in vitro o procedentes de plantas
crecidas en condiciones en el exterior.

A continuación, se describe cada procedimiento:

Pasos Descripción de los pasos

a) Preparación de los frascos.
b). Medios de cultivos
Medio de cultivo del plátano
Medio de cultivo de papa
c) Obtención de las yemas de la plata de Preparación de las yemas
limón
Asepsia del tejido
Se lavan bien los frascos y tapas con jabón y
lavajillas. Se le quitan todos los restos de etiquetas.
Preparación de los medios de cultivo
Poner en una olla:
- Los 180 ml de agua destilada.
- 20g de plátano maduro hecho puré.
- 1 g de azúcar.
- 0.24 g Tiamina.
Una vez disuelto se añaden 5 g de gelatina sin sabor
y se hierve el medio. Después se deja enfriar para
colocar las semillas
Colocar en un recipiente:
- 500 ml de agua destilada
- Pure de papa
Hervir toda la solución del recipiente y dejar enfriar.
Vertimos en dos frascos los medios de cultivos, en el
fondo una cantidad de preparado de más o menos 1
centímetro (45 a 50 ml).
- Se realizar una apepsia previa del tejido.
- Posteriormente se eliminan los primordios
foliares que rodean al meristemo hasta dejar
al descubierto el domo meristemático.

Corte de las yemas -

Con un bisturí se realiza un corte transversal,
de 0.2 a 1.0 mm, debajo del meristemo, con
uno o dos pares de primordios foliares
- Colocamos ocho muestras de yemas en cada
tubo de ensayo
d) Obtención del ápice de la raíz de la plata Preparación del ápice de la raíz
de chiyangua
Asepsia de la raíz - Se eliminan todos los grumos de tierra de la
raíz y separamos de la parte foliar.
Corte del ápice de la raíz -
Cortamos a un centímetro el ápice de la raíz,
hacemos ocho muestras y colocamos en los
tubos de ensayo.
e) agregar las soluciones en los tubos de - colamos las soluciones de maduro y papa
ensayos - en las muestras de yemas colocamos un milímetro
de solución de maduro.
- en las muestras de ápice de raíz colocamos un
milímetro de solución de papa.

4. CONCLUSIONES

 Para introducir in vitro un material vegetal que se ha desarrollado en el exterior

es imprescindible tomar una serie de medidas encaminadas a eliminar los
posibles microorganismos que puedan estar establecidos sobre él. En primer
lugar, hay que seleccionar material vegetal en un adecuado estado de nutrición y
libre de enfermedades y plagas.
 Para que el explante se desarrolle adecuadamente se debe proveer al medio
macro y micronutrientes, las concentraciones de estos pueden variar
dependiendo de la especie vegetal. Los nutrientes junto con el agua son
necesarios para el desarrollo y crecimiento de una planta ya que sin ellos esta no
podría vivir in vitro ni in vivo.
 5. RECOMENDACIONES

 Limpiar todas las muestras para así eliminar todo tipo de microorganismos que
puedan estar adheridos a la muestra.
 Realizar los cortes con precisión ya que cada muestra debe estar dentro de los
parámetros.
 Seguir el paso a paso todas las indicaciones para evitar posibles fallas.

6. BIBLIOGRAFÍA.

NAVARRO, L. ( 1979). Microinjerto de ápices caulinares in vitro para la obtención de

plantas de. Argentina .

Segretín, M. E. (2010). ArgenBio . Obtenido de Los cultivos celulares y sus

aplicaciones II (cultivos de células vegetales) :
http://www.argenbio.org/adc/uploads/pdf/Cultivos%20celulares%20II
%20Euge.pdf
 7. ANEXOS

Ilustración . Materiales utilizados