El objetivo fundamental de la

utilización de los medios de cultivo es

optimizar el crecimiento de los
microorganismos.

En los medios de cultivo micológicos,

los antimicrobianos se utilizan tanto
para inhibir el crecimiento bacteriano
como el de otros hongos ambientales.
☺ Crecen bien en medios artificiales

☺ Tienen requerimientos simples (C y N)

☺ Adición al medio de antibióticos

Cloranfenicol o la gentamicina (bacterias)

Actidiona o cicloheiximida (hongos no patógenos)

• Nutrientes
• Atmósfera
• Temperatura
• Actividad de agua
• pH
• Interacciones con otros organismos
• Rango de pH de crecimiento fúngico: pH = 3 a 9

• Rango de pH óptimo pH = 5 a 7

• En general pueden crecer a pH más

bajos que las bacterias
• Aerobios estrictos Rhodotorula sp.

• Anaerobios facultativos Mucor sp.

• Anaerobios estrictos Neocallimastix sp.

• Según la temperatura óptima de crecimiento:

• psicrófilos  20°C Fusarium nivale

• mesófilos 20°C - 30°C Penicillium expansum

• termófilos 30°C - 40°C Aspergillus fumigatus

• Límite superior de crecimiento: 62-65°C

 La temperatura óptima de crecimiento de la mayoría de los
hongos patógenos es 30 ºC.

Sin embargo, Sporothrix schenckii es una excepción, crece

más rápido a 27–28 ºC.

La temperatura ambiente en lugar de

30ºC, no es recomendable, ya que
los cambios de temperatura son
notables entre el día y la noche en la
mayoría de los laboratorios.
 La temperatura de 37ºC no se recomienda por dos razones
principales:

1) Muchas muestras contienen abundantes bacterias que crecen muy

bien a esta temperatura
2) Algunos hongos crecen mal a esta temperatura o no crecen,
especialmente los hongos que infectan la piel.

La temperatura de 37°C debe reservarse para hongos dimórficos o

algún hongo que se desarrolle mejor a esta temperatura.

Los cultivos de hongos

deben incubarse durante 3-4
semanas antes de ser
desechados.
 Generales (no selectivo): Agar
glucosado de Sabouraud (AGS). Se utiliza
como medio de cultivo general y
fundamentalmente para la realizar la
descripción de las características
morfológicas de la mayoría de los hongos.

Sabouraud Dextrosa Agar

•Dextrosa, polipeptona en agar

•Tiene pH de 5.6 y es nutricionalmente pobre
• Medio clásico para el primoaislamiento
•También para mantenimiento de cultivos
•Se incuban a 30°C durante un mes antes de descartar
Enriquecidos: Se utilizan
especialmente en micosis
sistémicas (histoplasmosis,
blastomicosis……), para la
recuperación de la fase
levaduriforme.

Un ejemplo de estos medios es

el agar cerebro-corazón con
sangre (BHI).

Agar Sangre (BHI)

 PAPA DEXTROSA
(PDA)
Medio nutritivo, favorece el desarrollo exuberante de mohos y levaduras

Un pH de 3.5 evita el crecimiento de bacterias

Para cuenta de hongos y levaduras se le agrega ácido tartárico al 10%
AGAR EXTRACTO DE MALTA
 Selectivos: Son medios que favorecen
el crecimiento de los microorganismos
deseados impidiendo el de otros. Los
componentes más utilizados como agentes
selectivos son antibacterianos
(cloranfenicol, gentamicina,
penicilina, estreptomicina) y
también inhibidores de hongos como la
cicloheximida

Especializados: Son aquellos medios

que contienen algún componente que ,
favorecer la identificación de ciertas
especies u obtener estructuras.
Se utiliza de forma muy especial para
estimular las características
Czapek
diferenciales de Aspergillus spp, lo que
facilita su identificación
 MEDIOS ESPECIALIZADOS:

AGAR SEMILLA DE GIRASOL (AGAR DE STAIB O

AGAR NIGER SEED)

El medio de cultivo contiene ácido cafeico contenido en el

extracto de la semilla de girasol (Guizzotia abbisinica) que
permite detectar, la enzima fenol oxidasa desarrollada por
Cryptococcus neoformans.
La reacción enzimática produce melanina, la cual es absorbida
por la pared celular del hongo produciendo un color marrón.

• Glucosa 1,0 g
• Creatina 0,78 g
• Agar 18,0 g
• Cloramfenicol 0,05 g
• Extracto de semilla de girasol 350 mL
 Medios de Cultivo

Fluorogénicos
ß-galactosidasa y
L-prolina aminopeptidasa

Medios Diferenciales
Enzimas del hongo degradan Cromogénicos
componentes del medio
 CHROM agar
Candida albicans

Candida glabrata

Candida tropicalis
Medios Diferenciales
 Medios Diferenciales

Características bioquímicas de
Rhodotorula rubra.

Características bioquímicas de
Candida albicans.
 Agar Sabouraun Glucosado 4%
Agar Sabouraun Glucosado 2%
Agar Sabouraud con cicloheximida y cloranfenicol
Agar Papa Dextrosa
Agar BHI con o sin sangre

Agar harina de maíz con/sin Tween 80

Agar Dermatophyte test medium
Agar urea de Christensen
Agar Trichophyton
Agar Dixon modificado
Agar Mycosel
Agar Mycobiotic
Agar Czapek
Agar Litman
Agar Extracto de Malta
Aspergillus niger
Granular o Polvorienta
Aspergillus niger
Penicillum spp
Fusarium spp
Alternaria spp
Cladosporium sp.
 Rhizopus sp

Curvularia sp
 Tinción con Azul Algodón de Lactofenol

1. Seleccionar una colonia aislada.

2. Calentar a la llama el alambre de un asa de
siembra, y doblar de forma que se convierta en
un objeto cortante.
3. Con la ayuda del asa, extraer un fragmento
triangular de la colonia que contenga además
un poco de agar en la parte inferior.
4. Depositar el fragmento extraído sobre un
portaobjetos en el cual, previamente, se ha
depositado una gota de azul de lactofenol.
 Tinción con Azul de Lactofenol
Preparación con cinta adhesiva (transparente)

1. Apoyar el lado engomado de un trozo de cinta

adhesiva transparente sobre la superficie de una
colonia.
2. Colocar la cinta bien extendida sobre una gota de azul
de lactofenol, a su vez, sobre un portaobjetos.
3. Observar al microscopio para conocer la forma y
ordenamiento característico de las esporas.
MICROCULTIVO
MICROCULTIVO
 MICROCULTIVO
2cm de altura

.
Finalizado el período de incubación, retirar el
cubreobjetos
y colocarlo en un portaobjetos que contenga azul
de lactofenol.
 MICROCULTIVO

La laminilla se coloca con técnica estéril

en caja de Petri sobre una base, para en su
interior agregar Soln. de glicerol al 10% estéril.
 MICROCULTIVO

Papa Dextrosa Agar es el mejor medio para

esporulación
 MICROCULTIVO

De manera individual se inocula muestra

en cada lado
 MICROCULTIVO

Se coloca un cubreojeto y se cierra la caja

 MICROCULTIVO

Cuando esta listo se desecha el agar

antes desinfectandolo