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Laboratorio rustico para germinacin artificial de las semillas de

la capsula de orqudeas
INTRODUCCION:
El uso de esta tcnica permite reproducir orqudeas en forma masiva, utilizando
las semillas de aquellas plantas de orqudeas que tenemos en nuestra casa o en
el vivero. Con esto estaramos reduciendo la recoleccin de plantas en los
bosques y el nmero de muchas especies en vas de extincin.
La inventiva y el ingenio de cada persona juegan un papel muy importante para
abaratar los costos de este proyecto. Podemos usar algunos espacios y materiales
disponibles de la casa.
1-CARACTERISTICAS DE LA CAPSULA DE ORQUIDEAS EN EL
MOMENTO DE LA COSECHA.

La posicin de la capsula en la planta es hacia abajo generalmente.


Al final de la capsula donde estn las partes florales unidas, ocurre un
amarillamiento.
Se aumenta la profundidad de las hendiduras a lo largo de las valvas.
Se puede observar un cambio de color de la capsula justo antes de la
dehiscencia. Cada especie tiene su tiempo de maduracin
Desde la polinizacin hasta la apertura de la capsula transcurre de unas
semanas a ms de un ao. Un cambio en las condiciones ambientales
puede influenciar la dehiscencia (apertura) de la capsula. Si corta la
capsula verde de la planta ella no completa su maduracin.
Las semillas no se deban sembrar in vitro antes de que la cpsula haya
llegado a los dos tercios de su madurez.

2) CALIDAD DE LAS SEMILLAS.


La evaluacin de las semillas se puede hacer con ayuda de lupas 10x, las
semillas con embriones engrosados y esfricos son las que tienen mayor
probabilidad de germinar (viables), se dice que son semillas de buena calidad.

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Fig1: Semillas de orqudeas embriones y testa.
3) ALMACENAMIENTO DE SEMILLAS DE ORQUIDEAS.

Las semillas deben cosecharse maduras y secarse hasta alcanzar un contenido


de humedad adecuado para almacenarlas en tubos o frascos de vidrio sellados
hermticamente, o en sobres de papel filtro de caf este papel es resistente a la
humedad y permite el paso del aire.

Fig2 : semilla de orquideas almacenada en tubos de vidrio y sobres de papel


filtro.
4) PASOS PARA REPRODUCIR ORQUIDEAS A PARTIR DE SEMILLAS, DE
FORMA ARTIFICIAL.

Lista de materiales necesarios para que la germinacin sea un xito.


Material para la siembra de semillas
de orqudeas
Capsula de semilla de orqudeas o
semillas almacenadas

Mascarilla

Frascos de vidrio resistentes a altas


temperaturas (jalea, gerber,etc.)
Olla de presin

Bistur , pinzas, cuchara

Tamiz de alambre para colocar al fondo


de la olla de presin para colocar los
frascos
Cloro al 5%

Alcohol de 99%

Jeringas esterilizadas

Encendedor

Cmara rustica para sembrar

Licuadora

Refrigeradora

Cinta medidora de pH

Recipientes plsticos o de vidrio con

Termmetro

Mechero de alcohol

aspersor

escala de los que se usan en la cocina.


Tubos de vidrio con tapa o tapn de

Balanza

hule que se puedan esterilizar

5) FORMULA DE MEDIOS PARA LA SIEMBRA DE SEMILLA DE ORQUIDEAS


a) Medio de tomate con banano
Componentes
Cantidad/L
banano (pur)
40gr

Jugo de tomate 100ml


natural
Agar agar
10gr
azcar
tiamina
Agua destilada

20gr
3 tabletas
900ml

b) Medio de tomate
Componentes Cantidad /L
tomate
500gr
maduro y
sano licuado
Agar agar
10gr
Agua
destilada
Azcar

500ml
10gr

c) Medios para trasplante de orqudeas.

Componentes /L
Peter (fertilizante)
Tiamina 300mg
Agua de pipa
Banano
Papa
Azucar
Carbn activado puede
utilizarse en pastilla
Gelificante (agar agar)
pH

CATTLEYA PHALAENOPSIS
2g
1tableta
150ml
25g
20g
25g
1g
o
8 tabletas
10gr
5.7

2g
1tableta
150ml
50g
10g
20g
1g
o 8
tabletas
10gr
5.7

Se puede utilizar sobres de medios para diferentes orqudeas que distribuye


Sigma.
6) PREPARACION DE MEDIOS DE CULTIVO.
a- Medio de tomate.
Procedimiento:
Pesar y licuar 500gr de tomate maduro, pesar el azcar y el agar agar agregar al
jugo de tomate y aforar a un litro con agua destilada o agua embotellada.
Llevar a ebullicin el medio de cultivo en el horno de microondas hasta que el
agar agar se disuelva.
Distribuir el medio de cultivo en los frascos de vidrio.
Preparar la olla de presin colocndole al fondo Tamiz de alambre, verter agua a
la olla que no sobrepase el tamiz, como se muestra en la figura 2.
Esterilizar los medios de cultivo por 20 minutos en la olla de presin contando el
tiempo a partir de que suene la vlvula de presin.
b- Medio de banano y tomate
Procedimiento
Pesar la cantidad de pulpa de banano requerida, licuar en 150ml de agua
destilada o agua embotellada, pesar 500gr de tomate maduro y licuar. Agregar el
jugo obtenido al medio de cultivo en preparacin, agregar las 3 tabletas de
tiamina, el azcar y el agar agar y se lleva a un litro con agua destilada o
embotellada.
Llevar a ebullicin el medio de cultivo en el horno de microondas hasta que el
agar agar se disuelva.

Distribuir el medio de cultivo en los frascos de vidrio, tapar y esterilizar en la olla


de presin.
En los medios que necesita medir el pH se utiliza la cinta medidora de pH
o un potencimetro si necesita bajar el pH del medio de cultivo puede utilizar gotas
de limn acido, si necesita subirlo puede utilizar tiza raspada.

Fig. 3: Olla de presin con tamiz de alambre y agua.

7) SIEMBRA Y GERMINACION DE SEMILLAS DE ORQUIDEAS.


Esterilizar todas las herramientas (el bistur, las pinzas) en la olla de presin
envueltas en papel aluminio, un recipiente tapado con agua destilada o
embotellada si va a esterilizar semillas de capsula abierta esterilizar un recipiente
de vidrio pequeo tapado. Para hacer cortes de las capsulas en la cmara puede
utilizar vidrio de celosa de unos 20cms de largo esterilizado.

Fig4: EJEMPLO DE CAMARA DE CULTIVO TIPO RUSTICO.

CAMARA DE VIDRIO

CAMARA DE MADERA

Dentro de esta cmara se lleva a cabo el proceso de colocar las semillas de


orqudeas en los medios de cultivo para su germinacin, aspticamente, sin la
cmara las posibilidades de germinar orqudeas artificialmente son nulas.
a) Siembra de semillas de capsulas cerradas.
Limpiar la cmara con algodn y alcohol de 70%, introducir en la cmara el
mechero de alcohol y las herramientas esterilizadas, los medios de cultivo a
usar sin destapar. Lavar la capsula con agua y jabn. Dentro de la cmara
sumergir la capsula en un recipiente con alcohol de 90% con ayuda de una
pinza larga pasar la capsula a travs de la llama del mechero, esperar que
se apague, repetir la accin dos veces. Colocar la capsula en un vidrio de
celosa estril cortar longitudinalmente con ayuda del bistur, flamear el
borde del frasco, con la ayuda de las pinzas distribuir las semillas en los
frascos de cultivo, tapar y sellar con plstico transparente y rotular.

Fig4: siembra de capsula cerrada.

Los frascos cultivados se ponen a la luz con ayuda de florecientes o al borde de


las ventanas con cuidado de que nos les de la luz directamente requieren 16 horas
luz 8 oscuridad. Las semillas de orqudeas tardan en germinar 1 a 2 meses al
inicio observaras puntitos verdes luego la formacin de protocormos y de ultimo se
tienen las plntulas.

Trabajar con todas las medidas aspticas para no contaminar el cultivo.

Fig. 5: plntulas de orqudeas listas para vivero.

Cuando las plantitas crecen realizar los trasplantes disminuyendo la densidad de


plantas por frasco .El transplante debe hacerse con las mismas medidas de
higiene que el procedimiento anterior y dividindolas en varios frascos con medio
de cultivo con las mismas condiciones. Todo este proceso se realiza dentro de la
cmara desinfectada con alcohol, instrumental esterilizada flamendolo cada vez
que se utiliza, asperjar las manos con alcohol cada vez que las saca de la cmara,
cuidado con el mechero encendido.

Autora:
Ing Agr: Carmen Gutirrez Crdoba.
Costa Rica
CON GUSTO LOS PUEDO GUIAR EN SU PROCEDIMIENTO
SUERTE