PRACTICA 1

CULTIVO DE BRIOFITAS Y PTERIDOFITAS EMPLEANDO ESPORAS, PROPÁGULOS

O RIZOMAS

Introducción (Los alumnos deberán de escribir sobre los medios de cultivo

empleados para cultivar briofitas y pteridofitas)

Las plantas tienen diferentes estrategias para propagarse de manera natural, dado que
cualquier célula viva u órgano tiene la capacidad de regenerar una estructura dañada o en
su defecto clonar al ser del que provino la muestra. Gracias a esto podemos emplear estos
atributos para establecer cultivos fuera de su ambiente natural.

Cuando empleamos esporas para los cultivos, estamos haciendo una propagación sexual,
pues el resultado será el desarrollo de gametofitos que al fecundarse tendrán la capacidad
de generar individuos genéticamente diferentes. Cuando empleamos fragmentos, órganos
o propágulos (estructuras especializadas en clonar a la planta) la propagación es asexual,
dado que estamos generando clones de la planta original, sin importar si es gametofito o
esporofito.

Los cultivos de briofitas pueden ser empleados con distintos fines, desde estudiar efectos
de contaminantes sobre su crecimiento y/o supervivencia, entender la embriología del
grupo, restauración ecológica o para emplearlos en proyectos productivos.
Respecto al cultivo de helechos se debe de considerar el tiempo deseado para obtener una
cosecha o producción, cuando se emplean esporas el proceso es más lento, ya que
dependiendo de la especie, generalmente se requieren de un mínimo de 65 días para
desarrollar completamente al gametofito y hasta de un año a dos para obtener a los
esporofitos. Si el cultivo se realiza por medio del rizoma con yemas en un mes se puede
tener la producción lista para su uso.

Los medios de cultivo son muy diversos se puede emplear agar, o mezclas de tierra, peat
moos entre otros sustratos.
Objetivos
● Extraer muestras de rizoma para la propagación de los helechos.
● Aprender a sembrar propágulos de hepáticas en sustrato sólido.
● Observar el efecto del tipo de sustrato, condiciones de luz en el crecimiento y desarrollo
de las plantas
● Evaluar el desarrollo del gametofito de helechos

Materiales

Biológico Instrumentales Instrumentales Instrumentales Sustratos Sustancias Otros

Fresco por pareja por equipo. por grupo.

Ejemplares de: 2 cuadros de Agitador bortex. Cámara de Peat Hipoclorito de 3 domos o

papel filtro germinación moos. sodio charolas
Musgos Microcentifuga. (cloralex lo transparentes
1 vaso de pp de Fibra de deben de para ensalada.
Hepáticas 2 lt Pinzas 1 parrilla coco-Peat traer los
magnética moos. alumnos) 1 Paquete de
Helechos 2 vaso de pp de 1 Propipeta cajas Petri de
500 ml 2 Lt Agua plástico de 10
(de preferencia 2 jeringas de 10 destilada cm de diámetro
los que se van 2 Tubos ml estériles.
a trabajar en su Eppendorf 2 a 3 100 ml Etanol
proyecto mL. 1 microscopio al 96% 1 Rollo de
semestral y óptico parafilm (para
todos los 2 Mecheros 1 Piseta con todo el grupo)
ejemplares 1 microscopio alcohol
deben tener 1 Espátula estereoscópico 1 botella de litro
raíz) vacía y limpia
2 Embudos de
vidrio. Sanitas o
servitoallas
1 Probeta de 10
mL. 2 marcadores
indelebles de
1 Probeta de 25 punta fina
mL.

1 Probeta de
500 ml

2 Pipetas de 5
ml o de 1 ml

Puntas para
micropipeta

1 Micropipeta
100-1000μL

Bisturí

Piseta con agua

1 pipeta Pasteur

Procedimiento (Durante toda la sesión tienes que tomar fotografías para el reporte)
Previo a la siembra

➢ Lava tus manos posteriormente desinfecta la mesa de trabajo, recuerda lavar con
jabón, limpiar con papel o sanita, luego lava con cloro nuevamente retira con sanitas,
finaliza con alcohol.

➢ Humedece con alcohol otras sanitas con las cuales deberás de limpiar los mecheros,
instalarlos en la mesa sin prender. Con otra sanita humedecida con alcohol limpia
por fuera todo lo que no sea lavable. Posteriormente procede a lavar toda la
cristalería con usa solución jabonosa con cloro.

➢ Coloca a baño María la gelatina glicerinada a fundir. Para ello conecta la parrilla
eléctrica coloca a temperatura 60°C, coloca 200 ml de agua de la llave en un vaso
de pp de 500 ml, coloca la botella de gelatina dentro del vaso, ponlo a calentar en la
parrilla cuidando de que no llegue a hervor.

➢ Prepara una solución de hipoclorito de sodio, coloca 2 mililitros de cloro comercial

en una probeta de 500 ml afora con agua destilada hasta 200 ml.

➢ Reserva dos cajas de Petri sin ningún material en caso de que requiera suspender
las esporas de helechos, no la abra. Preparar cuatro cajas de Petri con sustrato
previamente humedecido con agua destilada, también prepara la maceta con
sustrato hidratado.

➢ Doblar el papel filtro como se muestra en la figura 1 e insertarlo en el embudo, coloca

el embudo dentro de la probeta de 25 ml.
 Figura 1 patrón para elaborar filtros para embudo

Siembra de esporas de briofitas

➢ En un tubo Eppendorf coloca las cápsulas de musgos (Figura 2) con la aguja de

disección romper la cápsula para extraer las esporas, agrega 1 ml de la solución de
cloro que acabas de preparar, agita vigorosamente el tubo en el agitador Vortex
durante al menos 20 segundos

➢ Filtra las esporas en un papel filtro estéril colocado en un embudo de vidrio. Enjuaga
las esporas con agua destilada. Posteriormente toma el papel filtro lávalo con 5 ml
de agua destilada estéril de tal manera que el agua caiga en la caja de Petri. Si la
caja de Petri ya tiene mucha agua debes de suspender las esporas en una caja Petri
vacía, para ello coloca el papel dentro de la caja, coloca agua estéril y con la
micropipeta toma 250 microlitros de esporas, siémbralas en la caja con peat moos.
Sella los bordes de la caja con plástico parafilm o Plastipak

➢ Con la otra caja de Petri con sustrato humedecido con agua estéril y coloca en ella
algunos propágulos de la hepática Marchantia o bien empleando un adulto de
hepática (Figura 3), realiza varios cortes que se debe de esparcir en la caja. Sella
los bordes con plástico.
 Figura 2. Cápsulas de musgos

Figura 3. Hepáticas talosas a la izquierda acercamiento de los conceptáculos

que portan propágulos

Propagación sexual de helechos

➢ Llena hasta ¾ partes de la charola para ensaladas con peat moss hidratado, reserva
la charola.

➢ Coloca una pequeña muestra de esporas en un portaobjetos, coloca encima una

gotita de agua, coloca el cubreobjetos, revisa en el microscopio óptico para ver si
hay esporas (Figura 4). En caso afirmativo realiza una preparación semipermanente
 con la jeringa toma parte de la gelatina glicerinada, verter sobre la muestra de
esporas, colocar el cubreobjetos. Revisar al óptico para detectar que contenga las
esporas y sea útil para la propagación.

➢ Para los helechos toma una muestra de esporas coloca en un tubo Eppendorf
agrega 1.5 ml de cloro al 0.3% agítalo por 40 Cuartos con el agitador Vortex,
posteriormente centrifuga el tubo durante un minuto a 14 000 rpm.

➢ El sobrenadante con las esporas se filtra en un papel filtro estéril con ayuda de un
embudo.

➢ Llena hasta ¾ partes de la charola para ensaladas con peat moos, posteriormente
con 5 ml de agua destilada estéril lava el papel filtro sobre el sustrato, repite tres
veces el enjuague.

Figura 4. Leptosporangios con esporas tanto dentro de ellos como fuera de los
mismos.
Propagación asexual de helechos

➢ Saca de la maceta el helecho con raíces, corta todas las hojas y selecciona una
porción del rizoma con yemas o meristemos, fracciónalo con ayuda de una navaja
nueva (Figura 5), después llena hasta ¾ partes de la charola para ensaladas con
peat moos, realiza al menos tres surcos en la caja distribuye hasta tres porciones
del rizoma en cada surco, cubre con un poco más de peat moos. Humedece la
muestra, cierra la caja y sellala con plástico parafilm.

➢ La mitad de las muestras se colocan en una cámara de germinación a 25°C,

fotoperiodo de 16 horas de luz y 8 de oscuridad, se llevará el seguimiento de las
muestras a los 7, 14 y 21 días posteriores a la siembra. La otra mitad se la llevaran
a su casa, en donde reciban un poco de luz pero no directa.

➢ Para determinar el porcentaje de germinación se observan los cultivos al

microscopio estereoscópicos y se fotografían 4 campos diferentes para llevar un
registro del progreso de la germinación y/o desarrollo del cultivo.

Figura 5 Rizoma de helechos que se puede usar para propagación

Resultados esperados
● Diagrama de flujo del método elaborado a máquina o computadora (individual), cada
alumno trae impresa su rúbrica para trabajo en laboratorio.
● Por pareja: Una caja de Petri con esporas de musgo sembradas, una caja de Petri con
propágulos sembrados, Una charola con esporas de helecho sembradas, una charola
con trozos de rizoma sembrados.
● Reporte a los 7, 14 y 21 días posteriores a la siembra con evidencias fotográficas que
avalen todo el desarrollo de la sesión de acuerdo a la rúbrica.

Conclusiones del día de la sesión

¿Qué inconvenientes encontraron en la toma de muestras?
¿Qué problemas tuvieron con la metodología usada?
¿Lograron obtener los resultados deseados?

Conclusiones después de los 21 días

¿Cuánto porcentaje de germinación se obtuvo?
¿Qué creció más rápido las muestras en casa o las de la germinadora?
¿Qué factores ambientales están condicionando la pregunta anterior?
¿Qué muestra de helechos tiene más desarrollo, por qué?

Cuestionario
1.- Busca un artículo relacionado con la germinación de los helechos para restauración
ecológica, elabora una breve descripción del contenido del artículo, métodos y resultados
2.- Busca un artículo relacionado con la propagación de musgos para ventas navideñas y
la reducción de los problemas ambientales ligados a esta actividad, o en su defecto un
artículo relacionado con la extracción de musgos para dicho fin. Elabora una breve
descripción del contenido del artículo, métodos y resultados.
3.- ¿Qué hormonas se deben de emplear en cultivos de gametofitos de helechos para
favorecer la maduración de los órganos sexuales?
4.- ¿Cómo afecta el pH del sustrato el desarrollo de los cultivos de helechos y briofitas?
 Literatura recomendada
Fernandez, H., Kumar, A. y Revilla, M. A. 2011. Working with ferns. Springer, Londres.

Glime, J. M. 2012. Bryophyte Ecology. Michigan Tech. Disponible en:

http://digitalcommons.mtu.edu/bryophyte-ecology1/

Fecha de aplicación: Período: Marzo-Agosto 2024

 Asignatura: Botánica Criptogámica
Clave: LBM-1011
Carrera: Licenciatura en Biología
Docente: M. en C. Mónica Elias González
Nombre del alumno:
Semestre: Cuarto
Lista de cotejo para evaluar trabajo en laboratorio de la práctica 1
Tipo de evaluación: Formativa
Tiempo de evaluación: 20 minutos
Valor total de la evidencia: 1.15%

No. de control: Grupo: Salón: Turno:

Competencia a evaluar: Identifica los diferentes niveles de organización morfológica que poseen las algas, briofitas y
pteridofitas para distinguir los grupos a estudiar.
Tema: 1.1 Características generales de las plantas

Instrucciones para el alumno: Registra la fecha en la que se está llevando a cabo la práctica de laboratorio en el espacio
indicado como fecha de aplicación, posteriormente registra tu nombre empezando por apellido paterno, materno y nombre (s),
número de control, grupo, salón y turno, procede a entregar esta lista de cotejo al finalizar la sesión, gracias.

Instrucciones para el evaluador: Durante la sesión procede a evaluar al alumno, lee los criterios de evaluación, registre √
en la columna Si o No dependiendo de las características del trabajo, de ser necesario registre algún comentario en la columna
destinada para ello. Posteriormente sume los valores obtenidos de las casillas marcadas con Si para obtener el puntaje del
alumno, revise los niveles de desempeño que se presentan más adelante para asentar la calificación del alumno y el porcentaje
que representa esta actividad para la competencia número 1. En el área de retroalimentación enuncie las recomendaciones
si se trata de primera oportunidad, en caso contrario coloque los comentarios para la mejora de trabajos futuros en esta u
otras asignaturas.

Competencia Autoevaluación Heteroevaluación

Criterio
a evaluar Si No Val Si No Val
SER El alumno llega puntual 2 2
El alumno trae bata limpia, planchada y es propia 2 2

Presenta calzado adecuado (zapato cerrado con suela 2 2

antiderrapante); cubre bocas, guantes de látex
Su equipo trae todo lo solicitado en el protocolo incluido 3 3
su diagrama a computadora impreso en papel reciclado
Ayuda a sacar el material aunque no sea responsable del 4 4
vale
Saber hacer El alumno muestra orden durante el desarrollo de la
práctica, respeta a su profesora y compañeros, cuida 3 3
todos los materiales, acata las instrucciones de la
profesora y del reglamento del laboratorio
Conocer El alumno realiza perfectamente la práctica, se le nota
seguridad al aplicar los conocimientos del tema abordado 2 2
así como de los materiales y equipos empleados
SER El alumno entrega el material en perfectas condiciones,
ningún equipo muestra daño, su área de trabajo está 1 1
perfectamente limpia
Total de puntos esperados
Total de puntos obtenidos
 NIVELES DE DESEMPEÑO

DESEMPEÑO NIVEL PUNTAJE VALORIZACIÓN % Competencia

OBTENIDO NÙMERICA 1

Excelente 19 95-100 1.15%

Notable 17 a 18 85-94 0.97%

Competencia alcanzada
Bueno 15 a 16 75-84 0.86%

Suficiente 13 a 14 70-74 0.8%

Insuficiente 12 o menos NA (no 0

Competencia no alcanzada
alcanzada)

Recomendaciones

Aspectos positivos Áreas de oportunidad

Firma de conformidad del estudiante

M. en C. Mónica Elias González Ing. Margarita Téllez Hernández

Nombre y firma del docente Vo. Bo. Jefe de División de Biología

Fecha de aplicación: Período: Marzo-Agosto 2024

Asignatura: Botánica Criptogámica Semestre: Cuarto
 Clave: LBM-1011 Rúbrica para evaluar el reporte de la práctica
Carrera: Licenciatura en Biología Tipo de evaluación: Formativa
Docente: M. en C. Mónica Elias González Tiempo de evaluación: 20 minutos
Valor total de la evidencia: 1.15 %
Integrantes de equipo:
1.-____________________________________________________________________
2.-____________________________________________________________________
3.-____________________________________________________________________
4.-____________________________________________________________________
5.-____________________________________________________________________
6.-____________________________________________________________________

Competencia a evaluar: Identifica los diferentes niveles de organización morfológica que poseen las algas,
briofitas y pteridofitas para distinguir los grupos a estudiar.
Tema: 1.1 Características generales de las plantas

Instrucciones para el alumno: Registra la fecha en la que entregas el reporte de práctica de laboratorio en el espacio indicado
como fecha de aplicación, posteriormente registra los nombres de los integrantes del equipo en orden alfabético, empezando por
apellido paterno, materno y nombre (s), , procede a entregar esta rúbrica engrapada arriba de la portada de tu reporte, gracias.

Instrucciones para el evaluador: Con el reporte lea los rubros de evaluación y dependiendo de las características del trabajo y
los niveles de desempeño, selecciona el valor que le corresponde a cada uno, el cual se registra en la columna puntaje alcanzado.
Luego suma los valores obtenidos y revisa los niveles de desempeño de la competencia para asentar la calificación del alumno y el
porcentaje que representa esta actividad para la competencia número 4. En el área de retroalimentación enuncie las
recomendaciones si se trata de primera oportunidad, en caso contrario coloque los comentarios para la mejora de trabajos fututos
en esta u otras asignaturas.

Niveles de desempeño
Indicadores

evaluación
Rubros de

alcanzado
Puntaje
3 (Excelente) 2 (Destacado) 1 (Satisfactorio) 0 (No adecuado)

Entrego el reporte de Entrego el reporte de Entrego el reporte Entrego el reporte

Entrega

laboratorio en la fecha laboratorio un día después de laboratorio dos de laboratorio tres

1.-

establecida días después días después

Entrego el reporte en arial Le falta un elemento Le faltan dos Le faltan tres o

12, justificado, usando elementos más elementos
2.- Formato

mayúsculas y minúsculas,
con interlineado 1.5,
impreso en papel
Ser

reciclado
Presenta: Institución, Le falta un elemento Le faltan dos No cumple
materia, título de la elementos
práctica, integrantes de
3.- Portada

equipo en orden alfabético

iniciando por apellido
paterno, materno, nombre
(s), profesora, semestre,
grupo turno
 Trata sobre los medios de
Introducción
cultivo para briofitas,
pteridofitas
4.-
Responde a la pregunta
¿Por qué se está
Justificación
realizando la práctica?
5.-
Conocer
Escribió los presentes en
6.- Objetivos
el protocolo, redactados
en infinitivo y agrega otros
Cada alumno integra su
diagrama de flujo en el
7.- Materiales y
cual ya están enlistados
método
los materiales y diseñado
el procedimiento
Se presenta evidencia
fotográfica del desarrollo
Resultados
de la práctica, a los 8, 15 y
21 dìas de sembrado
8.-
Escritas de acuerdo al
Conclusiones
trabajo y objetivos
9.-
Responde las 4 preguntas
Cuestionario
Saber hacer
cada una con cita
10.-
Carece de faltas
Ortografía
11.-
Contiene todas las
referencias citadas en el
12.- Literatura
texto y en formato APA
Trata sobre el tema, pero No trata sobre el No cumple
no relacionada con tema
objetivos
Responde regularmente la Responde poco la No responde
pregunta pregunta
Le falta uno de los Le faltan dos los Le faltan tres o
presentes en el protocolo, presentes en el más o no contiene
redactados en infinitivo o protocolo,
en otro tiempo verbal, no redactados en
agrega otros infinitivo, no agrega
otros
Falta un alumno de Dos alumnos faltan No contiene
integrar su diagrama de de integrar su
flujo en el cual ya están diagrama de flujo en
enlistados los materiales y el cual ya están
diseñado el procedimiento enlistados los
materiales y
diseñado el
procedimiento
Se presenta evidencia Carece de evidencia Carece de
fotográfica del desarrollo de dos fechas evidencia de tres
pero carece de una de las o mas fechas
fechas indicadas
Se relacionan poco con el No tienen relación No contiene
trabajo y objetivos con el trabajo y
objetivos
Responde 3 preguntas Responde 2 Responde 1
cada una con cita preguntas cada una preguntas o
con cita menos cada una
con cita o sin ella
Tiene 1 falta Tiene dos faltas Tiene tres o más
faltas
Falta 1 cita o un dato Faltan varios datos No contiene
y/o citas literatura
Total de puntos esperados 36
Total de puntos obtenidos
 NIVELES DE DESEMPEÑO
DESEMPEÑO NIVEL PUNTAJE VALORIZACIÓN % Competencia 1
OBTENIDO NÙMERICA
Excelente 35-36 95-100 1.15%

Notable 31-34 85-94 0.97%

Competencia alcanzada
Bueno 27-30 75-84 0.86%

Suficiente 26 70-74 0.8%

0
Competencia no alcanzada
Insuficiente Menos de 25 NA (no alcanzada)

Recomendaciones

Aspectos positivos Áreas de oportunidad

Firma de conformidad del estudiante

M. en C. Mónica Elias González Ing. Margarita Téllez Hernández

Nombre y firma del docente Vo. Bo. Jefe de División de Biología