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Rao y Sastry, Mod Chem Appl 2018, 6: 2

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DOI: 10.4172 / 2329-6798.1000256

Química y aplicaciones modernas

RO
MET

ISSN: 2329-6798

Artículo de investigación Acceso abierto

Análisis espectrofotométrico UV de fármacos Clorhidrato de terbinafina y

claritromicina
Rao RM 1 * y Sastry CSP 2
1 SRKR Engineering College, Chinnamiram, Bhimavaram, Andhra Pradesh, India
2 Laboratorios de Alimentos y Medicamentos, Departamento de Química Orgánica Alimentos, Medicamentos y Agua, Universidad de Andhra, Visakhapatnam, India

*Autor correspondiente: Mrutyunjaya Rao, SRKR Engineering College, Chinnamiram, Bhimavaram, Andhra Pradesh, India, Tel: + 234-8036682351; Correo electrónico:
rmj.rao@rediffmail.com
Fecha de grabación: 02 de abril de 2018; Fecha acc: 23 de abril de 2018; Fecha de publicación: 30 de abril de 2018

Copyright: © 2018 Rao RM, et al. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la Licencia de Atribución Creative Commons, que permite el uso, distribución y
reproducción sin restricciones en cualquier medio, siempre que se acredite el autor y la fuente originales.

Abstracto

Un procedimiento simple y sensible (método espectofotométrico UV) para el ensayo de dos fármacos, a saber, clorhidrato
de terbinafina y claritromicina en forma pura y formulaciones. Este método implica la formación de un complejo de
asociación de iones entre TRB o CAM y el ácido pícrico. Con el fin de establecer las condiciones óptimas necesarias para la
formación rápida y cuantitativa de producto coloreado con la máxima estabilidad y sensibilidad, el autor
realizó experimentos midiendo la absorbancia en λ max 350 nm de una serie de soluciones, variando una y fijando los demás
parámetros en cada caso como tipo, volumen y concentración de ácido, disolvente orgánico utilizado para
extracción, relación de fase orgánica a fase acuosa durante la extracción, tiempo y temperatura de agitación. Se optimizaron los
parámetros variables. Los resultados fueron validados estadísticamente.

Palabras clave: Terbinafina clorhidrato; Claritromicina; condiciones óptimas necesarias para la formación rápida y cuantitativa de
Espectrofotómetro; Ácido pícrico producto coloreado con máxima estabilidad y sensibilidad, el autor realizó
experimentos midiendo la absorbancia a 350 nm de una serie de soluciones,

Introducción
El clorhidrato de terbinafina (TRB) [1-naftaleno metenamina N-
[(2E) 6,6 dimetil-2-hepteno-4inil] -N-metil] es un compuesto
antifúngico sintético de alilamina que existe en el mercado en
forma de tabletas y crema. Es oficial en USP, Merck Index y
Martindale Extra Pharmacopoeia [1-3]. Claritromicina o
metileritromicina 6-0 o [2R, 3S, 4S, 5R, 6R, 8R, 10R, 11R, 12S, 13R) -3-
(2,6-Didesoxi-3C, 3-0-dimetil- α -L -ribo-hexopiranosiloxi)] - 11,12-
dihidroxi-6-metoxi, 2,4,6,8,10,12-hexametil-9-oxo- 5- (3,4,6-
tridesoxi-3-dimetilamino β - D-xilo- hexopiranosiloxi)
pentadecan-13-olido. es una lactona macrocíclica hidroxilada antibacteriana
macrólido que contiene de 12 a 20 átomos de carbono en el anillo primario
que se une a las subunidades de 50 s de ribosomas bacterianos indicados
para tratar infecciones causadas por bacterias. Es oficial en, USP, índice de
Merck, farmacopea adicional de Martindale, Remington, PDR [1,3-5]. Los
métodos analíticos existentes revelan que se ha prestado poca atención al
desarrollo de métodos espectrofotométricos UV para su determinación. El
presente artículo describe la determinación de dos fármacos, a saber,
clorhidrato de terbinafina y claritromicina por reacción con el reactivo ácido
pícrico.
variando una y fijando los otros parámetros en cada caso como tipo, volumen
y concentración de ácido, disolvente orgánico utilizado para la extracción,
relación de fase orgánica a fase acuosa durante la extracción, tiempo de
agitación y temperatura. El ácido pícrico también se ha utilizado para la
determinación de azúcares reductores cuando se reducen a ácido picrámico
de color naranja en medio alcalino. El ácido pícrico también se propone para
la estimación de cardioglicósidos.
Experimental
Todas las mediciones espectrales y de absorbancia se realizaron
en un espectrofotómetro visible modelo Systronics 106 con celdas
de vidrio de 1 cm o espectrofotómetro Milton Roy 1201 UV-visible
espectrofotómetro con células de cuarzo emparejadas de 1 cm.
Todas las mediciones de pH se realizaron en un pHmetro digital modelo
Systronics 335 o en un pHmetro digital Elico LI 120.
Reactivos y soluciones
Solución de ácido pícrico: ( Loba: 0,1%, 4,36 × 10- 2 M): 100 mg de pícrico
El ácido se disolvió en 100 ml de agua destilada.

El ácido pícrico es un químico conocido como trinitrofenol simétrico y
es de naturaleza ácida y forma un aducto con hidrocarburos aromáticos
como naftaleno y antraceno. También forma picrato de la amina
extraíble en cloroformo que es de color amarillo pero los máximos de
absorción se localizan en la región UV. El ácido pícrico también se ha
utilizado para la determinación de azúcares reductores cuando se
reducen a ácido picrámico de color naranja en medio alcalino. El ácido
pícrico también se propone para la estimación de cardioglicósidos [6-9].
Este método implica la formación de un complejo de asociación
de iones entre TRB o CAM y el ácido pícrico. Para establecer la
Tampón pH-9,8: Preparado disolviendo 300 g de fosfato monosódico
dihidrato y 9 g de NaOH en 750 ml de agua.
Solución de fármaco de clorhidrato de tebinafina: Todos los reactivos
fueron de calidad analítica y todas las soluciones acuosas se prepararon en
agua bidestilada. Siempre se utilizaron soluciones recién preparadas. Un mg
ml 1 La solución madre de TRB HCl se preparó disolviendo 100 mg de TRB
inicialmente en 5 ml de HCl 0,1 N seguido de una dilución a 100 ml con agua
bidestilada. Para las formulaciones farmacéuticas del fármaco, se trató una
cantidad de tableta en polvo o crema equivalente a 100 mg de TRB HCl con 4
porciones de 20 ml de cloroformo y el cloroformo.

Mod Chem Appl, una revista de acceso abierto Volumen 6 • Número 2 • 1000256
ISSN: 2329-6798
Citación: Rao RM, Sastry CSP (2018) Análisis espectrofotométrico UV de fármacos Clorhidrato de terbinafina y claritromicina. Aplicación Mod Chem
6: 256. doi: 10.4172 / 2329-6798.1000256

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El extracto se transfirió a un matraz aforado de 100 ml y se completó hasta 100 ml con Producto coloreado con máxima estabilidad y sensibilidad, el autor realizó
cloroformo para obtener 1 mg.ml- 1 solución de reserva. A partir de esta solución, se experimentos midiendo la absorbancia a 350 nm de una serie de soluciones,
preparan las concentraciones necesarias para experimentos posteriores. variando una y fijando los demás parámetros en cada caso como tipo, volumen y
concentración de ácido, disolvente orgánico utilizado para la extracción. , relación
Solución de fármaco claritromicina: Un mg ml 1 Se preparó una
de fase orgánica a fase acuosa durante la extracción, tiempo de agitación y
solución madre de CAM en medio acuoso disolviendo 100 mg de CAM
temperatura. El método implica la formación de especies coloreadas como se
en 5 ml de HCl 0,1 M seguido de dilución a 100 ml con agua bidestilada.
muestra en el Esquema 1 como se muestra a continuación.
El comprimido en polvo equivalente a 100 mg de CAM se disolvió y se
diluyó a 100 ml con cloroformo y la porción insoluble se eliminó por
filtración para obtener 1 mg.ml- 1. Para las formulaciones farmacéuticas
del fármaco, se tomaron veinticinco ml de la solución madre anterior y
la porción de cloroformo se evaporó a sequedad y el residuo se disolvió
inicialmente en 2 ml de HCl 0,1 N seguido de una dilución a 25 ml con
agua destilada.

Procedimiento recomendado

Método (ácido pícrico) para TRB o CAM: En una serie de embudos

de separación de 50 ml que contienen alícuotas de fármaco (TRB: 0,5-3,0
ml, 50 μg.ml- 1; CAM: 0,5-3,0 ml, 100 μg.ml- 1) se añadieron
sucesivamente 2 ml de tampón pH 9,8 y 1 ml de soluciones de ácido
pícrico al 0,1%. El volumen total de fase acuosa en cada embudo de
decantación se ajustó a 10 ml con agua destilada. A cada embudo de
decantación se le añadieron 10 ml de cloroformo y el contenido se agitó
durante 2 min. Se dejó que las dos fases se separaran y se midió la
absorbancia de la capa de cloroformo separada a 350 nm frente a un
blanco de reactivo preparado en condiciones similares. La cantidad de
fármaco se dedujo del gráfico de calibración (Figuras 1 y 2).

Formulaciones farmacéuticas para TRB HCl y CAM: Se trató una

cantidad de tableta en polvo o crema equivalente a 100 mg de TRB HCl con 4
porciones de 20 ml de cloroformo y el extracto de cloroformo se transfirió a
un matraz aforado de 100 ml y se completó hasta 100 ml con cloroformo
para obtener 1 mg.ml- 1 solución de reserva.

Cincuenta mililitros de la solución madre anterior (1 mg.ml- 1) Se tomó
y la porción de cloroformo se evaporó a sequedad y el residuo se
transfirió a un matraz aforado de 50 ml disolviéndolo en 5 ml de HCl 0,1
N y se diluyó hasta la marca con agua destilada.
Se transfirieron veinticinco ml de la solución madre anterior a un embudo
de separación de 25 ml y se lavaron con 5 ml de NaOH 0,05 N para obtener la
base libre formada. Una porción de veinticinco ml se evaporó a sequedad y el
residuo se disolvió en 25 ml. metanol para obtener 1 mg.ml- 1 solución de
reserva.
Se tomaron diez ml de la solución madre anterior y la porción de
cloroformo se evaporó a sequedad y el residuo se disolvió
inicialmente en 2 ml de ácido acético glacial y se diluyó hasta 10 ml
con agua destilada.
El comprimido en polvo equivalente a 100 mg de CAM se disolvió y se
diluyó a 100 ml con cloroformo y la porción insoluble se eliminó por
filtración para obtener 1 mg.ml- 1.
Se tomaron veinticinco ml de la solución madre anterior y la
porción de cloroformo se evaporó a sequedad y el residuo se
disolvió inicialmente en 2 ml de HCl 0,1 N seguido de dilución a 25
ml con agua destilada.
Resultados y discusión
Este método implica la formación de un complejo de asociación de iones
entre TRB o CAM y el ácido pícrico. Con el fin de establecer las condiciones
Esquema 1: Formación de complejo de asociación de iones entre TRB o
CAM.
Fijación de condiciones óptimas para los métodos propuestos y
características ópticas como se describe a continuación: El complejo de ácido
pícrico se preparó en solución según los procedimientos recomendados dados
anteriormente y luego se extrajo en cloroformo. Después de la separación de las
capas de cloroformo y acuosas, la capa de cloroformo se recogió en cada caso y se
escaneó en la región de longitud de onda 200-400 nm frente a un blanco de
reactivo y los resultados se muestran gráficamente en la Figura 1. La
λ max se encontró que el valor era 350 nm en la región UV. El λ max valor
de ácido pícrico en fase acuosa fue casi el mismo por el complejo en
la fase orgánica.
• Para probar si cada fármaco con reactivo especificado se adhiere a la ley de Beer,
se anotó la absorbancia en longitudes de onda apropiadas de un conjunto de
soluciones que contienen cantidades variables de fármaco y cantidades
específicas de reactivos y tratadas como se describe en el procedimiento
recomendado correspondiente. contra el blanco de reactivo apropiado. (Los
diagramas de la ley de Beer de los sistemas se presentan gráficamente en las
Figuras 2 y 3. Los límites de la ley de Beer de cada fármaco con los reactivos
apropiados se calcularon en μg.ml- 1 y los resultados se incorporan en tablas.
También se calcularon y registraron los límites de detección, la absortividad
molar, la sensibilidad de Shandell y el rango fotométrico óptimo para cada
fármaco con los reactivos mencionados.
El análisis de regresión mediante el método de mínimos cuadrados se realizó

óptimas necesarias para la formación rápida y cuantitativa de para la pendiente (b), desviación estándar sobre pendiente (S B), interceptar (a),

Mod Chem Appl, una revista de acceso abierto Volumen 6 • Número 2 • 1000256
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Citación: Rao RM, Sastry CSP (2018) Análisis espectrofotométrico UV de fármacos Clorhidrato de terbinafina y claritromicina. Aplicación Mod Chem
6: 256. doi: 10.4172 / 2329-6798.1000256

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desviación estándar en la intersección (S a), error estándar de estimación (S mi)

y coeficiente de correlación (r) obtenido de diferentes concentraciones
de cada fármaco y los resultados también se resumen en las Tablas 1 y 2.

Figura 3: Gráfico de la ley de Beer de CAM-ácido pícrico M2.

Figura 1: Espectro de absorción de TRB y CAM-ácido pícrico.

Figura 2: Gráfico de la ley de Beer de TRB-ácido pícrico M1.

Parámetro MTRB MCAM

Ácido pícrico Ácido pícrico

λmax (νμ) 350 350

Límites de la ley de Beer (mg.ml- 1) 2.5-15 5-30

Límite de detección (mg.ml- 1) 1.299 × 10- 1 0.2737

Absortividad molar (mol- 1 cm- 1) 9,968 × 10 3 1,353 × 10 4

Sensibilidad de Shandell (mg.cm- 2 / 0,01 unidad de absorbancia) 3,289 × 10- 2 5,52 × 10- 2

Ecuación de regresión (y = a + bc)

Pendiente (b) 3.013 × 10- 2 1.829 × 10- 2

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ISSN: 2329-6798
Citación: Rao RM, Sastry CSP (2018) Análisis espectrofotométrico UV de fármacos Clorhidrato de terbinafina y claritromicina. Aplicación Mod Chem
6: 256. doi: 10.4172 / 2329-6798.1000256

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Desviación estándar en pendiente (Sb) 1,34 × 10 4 8.571 × 10- 5

Intercepción (a) 4.666 × 10- 4 - 1.2666 × 10- 3

Desviación estándar en intersecciones (Sa) 1,305 × 10- 4 1.668 × 10- 3

Error estándar de estimación (Se) 1,403 × 10- 3 1,7928 × 10- 3

Coeficiente de correlación (r) 0,9999 0,9999

Desviación estándar relativa (%) *% de 0.3843 0.4034

rango de error (límites de confianza) *

Nivel 0.05 0.4034 0.4234

Nivel 0.01 0,6330 0.6641

% De error en muestras a granel ** 0.2302 0.2739

*Promedio de seis
Tabla 1: Características ópticas y de regresión, precisión y exactitud de los métodos propuestos para TRB y CAM. determinaciones
consideradas, ** Promedio de tres determinaciones.

Formulación Monto etiquetado Monto fundar por Método de referencia propuesto para el método de referencia para% Recuperación por propuesto
s* mg) métodos ** Métodos TRB CAM ***

Ácido pícrico para Ácido pícrico para Ácido pícrico para CAM Ácido pícrico para
LEVA TRB TRB

Tabletas 125 123,47 123,89 124,36 ± 0,72 124,04 ± 0,96 98,78 ± 0,92 99,11 ± 0,764

± 1,15 ± 0,766

F = 1,43 F = 1,74

t = 1.01 t = 1,32

Tabletas 250 248,7 248,72 249,52 ± 0,82 248,7 ± 2,22 99,48 ± 0,77 99,48 ± 0,458

± 1,94 ± 1,45

F = 1,30 F = 1,94

t = 0,005 t = 1,155

Crema TRB 10 248.17 9,98 9,99 ± 0,016 248,4 ± 2,00 99,26 ± 0,63 99,89 ± 0,189

± 1,58 ± 0.019

Tableta CAM 250 F = 1,54 F = 1,34

t = 0,27 t = 1.0

Crema TRB 250 496.18 247,5 247,86 ± 3,09 498,7 ± 2,22 99,23 ± 0,36 99 ± 1,454

± 1,84 ± 3,63

Tableta CAM 500 F = 1,44 F = 1,37

t = 1,09 t = 1,174

Tabla 2: Ensayo de CAM y TRB en formulaciones farmacéuticas. * Formulaciones de cuatro compañías farmacéuticas diferentes. ** Promedio
+ desviación estándar en seis determinaciones, los valores de las pruebas t y F se refieren a la comparación del método propuesto con el método de referencia. Valores
teóricos al límite de confianza del 95%, F = 5,05, t = 2,57. *** Recuperación de 10 mg añadidos a las formulaciones farmacéuticas previamente analizadas (promedio de tres
determinaciones).

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Conclusión
Un paso importante en el proceso de validación del método
espectrofotométrico es la fijación de los parámetros de idoneidad del sistema
adecuados para asegurar un análisis exitoso. Definieron como un rango de valores
de aceptación para una serie de parámetros clave como precisión, exactitud,
linealidad de la respuesta del detector y recuperación según se considere
apropiado para el alcance del análisis.
La validez de los métodos propuestos para la determinación de un fármaco
mencionado anteriormente se estableció a partir de la precisión (cálculo del
porcentaje de desviación estándar relativa, rango de error porcentual en los límites
de confianza con un nivel de P = 0.05 y 0.01 de seis determinaciones) y precisión
(error porcentual en muestras puras, comparación de resultados obtenidos con
métodos propuestos y reportados en el caso de preparaciones farmacéuticas y
experimentos de recuperación) estudios. La sensibilidad de cada método se
Reconocimiento
El autor (Dr. RM Rao) agradece a la Comisión de Subvenciones
Universitarias de Nueva Delhi por la concesión de la Beca para profesores.
Referencias
1. Schatz F, Haberl H (1989) Métodos analíticos para la determinación de
terbinafina y sus metabolitos en plasma humano, leche y orina.
Arzneimittel-Forschung 39: 527-532.
2. Budavari S, O'Neil M, Smith A, Heckelman P, Obenchain J (1996) The Merck
Index. (12a ed.), Merck & Co. Inc., Nueva York, EE. UU., P: 1564.
3. La referencia completa de medicamentos (1999) Martindale: La farmacopea
adicional. (32ª ed.), The Pharmaceutical Press, Londres, Reino Unido.
4. Índice M (1996) El índice Merck. Merck & Co. Inc., Whitehouse Station, Nueva Jersey,
EE. UU.

determinó mediante el coeficiente de extinción molar, la sensibilidad de Shandell y 5. Farmacopea de los Estados Unidos (2000) USP 24, USP Convention Inc.,
los límites de la ley de cerveza de rango fotométrico óptimo. El análisis de regresión Rockville, MD 20852, EE. UU.

utilizando el método de mínimos cuadrados 6. Starostenko VE (1970) Balon Corporation, Oklahoma City, Estados Unidos.

se hizo para la pendiente (b), desviación estándar (S B), interceptar (a), 7. Dehn CWM, Hartman FA (1914) El método colorimétrico de picrato para la
desviación estándar en la intersección (S a), error estándar de estimación (S mi) estimación de carbohidratos. J Am Chem Soc 36: 403-409.

y coeficiente de correlación (r) obtenido a partir de diferentes concentraciones. 8. Bell FK, Krentzors JC (1948) Digitalis VII. El efecto de varios álcalis sobre la
sensibilidad de la reacción de ballet a la digitoxina. J Am Pharm Assoc Sci 37:
Los datos obtenidos en la determinación de cada fármaco con diferentes
297-301.
reactivos se resumen en este apartado. La selectividad (o especificidad) de
cada método propuesto se determinó mediante estudios de interferencia con
9. Kennedy EE (1950) J Am PharmAssoc Sci 39:25.

otros ingredientes activos e inactivos normalmente presentes en las

preparaciones farmacéuticas.

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