Revista Iberoamericana de Polmeros

Paz et al.

Volumen 13(3), Julio de 2012

Obtencin de quitosano

OPTIMIZACIN DEL PROCESO DE OBTENCIN DE QUITOSANO

DERIVADA DE LA QUITINA DE LANGOSTA
Nilia de la Paz1, Mirna Fernndez2*, Orestes Daro Lpez1, Antonio Nogueira1, Caridad M.
Garca1, Dania Prez3, Jorge L. Tobella4, Yanet Montes de Oca1, Dayiris Daz1
1) Centro de Investigacin y Desarrollo de Medicamentos (CIDEM). Avenida 26 No. 1605 e/ Puentes Grandes y Boyeros,
Plaza. La Habana. Cuba.
2) Departamento de Tecnologa y Control de Medicamentos, Instituto de Farmacia y Alimentos, Universidad de La Habana.
Calle 23 No. 21425 e/214 y 222, La Lisa. La Habana. Cuba. Correo electrnico: mirnafc@ifal.uh.cu, mirnafc@yahoo.com
3) Departamento de Qumica Bsica, Instituto de Farmacia y Alimentos, Universidad de La Habana. San Lzaro y L, Vedado.
Plaza de la Revolucin. La Habana. Cuba.
4) Laboratorios MEDSOL. Avenida 23 Esquina 266. Playa. La Habana. Cuba

Recibido: Febrero 2012; aceptado: Junio 2012

RESUMEN
En este trabajo se presentan los resultados de la optimizacin del proceso de obtencin de
quitosano, derivada de quitina de langosta (Panulirus Argus), por desacetilacin termoalcalina
heterognea, aplicando un diseo experimental factorial 3 2. Una velocidad de agitacin de 226 r/min
(escala banco) y 58 r/min (escalas piloto e industrial), temperaturas de mezcla de 80C y reaccin de
100C/30 minutos, lavado con agua hasta neutralidad, y un tiempo de secado de 8 h a 60C, fueron las
condiciones ptimas. Se elaboraron tres lotes a escala piloto e industrial, demostrndose la factibilidad y
consistencia del proceso tecnolgico. La calidad del material obtenido fue evaluada utilizando las tcnicas
de espectroscopia infrarroja, difraccin de rayosX, anlisis trmico diferencial, microscopia electrnica
de barrido, absorcin atmica y valoracin potenciomtrica. Adicionalmente, se determinaron los
parmetros de cenizas, contenido de humedad, material insoluble, y calidad microbiolgica. Se comprob
que el biopolmero obtenido cumple con los requerimientos como excipiente farmacutico.
Palabras claves: quitosano, langosta, desacetilacin, evaluacin fsicoqumica
ABSTRACT
In this paper, chitosan derived from lobster chitin (Panulirus Argus) obtained under alkaline N
deacetylation process was optimized applying a factorial design 32. A stirring speed of 226 r/min (bench
scale) and 58 r/min (pilot and industrial scale), mixing temperature of 80C and 100C/30 minutes,
washed with water until neutral, and drying time of de 8 h at 60 C were the optimal conditions. Three
batches were obtained at pilot and industrial scales, demonstrating the feasibility and consistency of the
technological process. The quality of the obtained chitosans was evaluated using the techniques of
infrared spectroscopy, Xray diffraction, differential thermal analysis, scanning electron microscopy,
atomic absorption and potentiometric titration. Additionally, ashes, degree of deacetylation, moisture
content, insoluble matter and microbiological quality were determined. The properties of the biopolymer
are within acceptable limits like pharmaceutical excipient.
Keywords: chitosan, lobster, deacetylation, chemicalphysical evaluation

INTRODUCCIN
El inters permanente de la humanidad por encontrar en los recursos naturales nuevos
beneficios a favor de la nutricin y la salud, la ha llevado a indagar acerca de la posibilidad de
utilizar algunos desechos de la industria pesquera, tal es el caso de los exoesqueletos de crustceos.
Estos son considerados contaminantes ambientales y sin embargo, constituyen la fuente principal de
dos biopolmeros de alto valor agregado establecidos a nivel mundial: la quitina y su derivado
funcional, el quitosano [1].
La quitina (del griego tunic, envoltura) se encuentra distribuida ampliamente en la naturaleza
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y, despus de la celulosa (materia base del papel), es el segundo polisacrido en abundancia. Sus
fuentes principales son el exoesqueleto de muchos crustceos, alas de insectos (escarabajos,
cucarachas), paredes celulares de hongos, algas, etctera. Sin embargo, la produccin industrial de
este biomaterial prcticamente se basa en el tratamiento de las conchas de diversos tipos de
crustceos (camarones, langostas, cangrejos y langostinos) debido a la factibilidad de encontrar
estos materiales como desecho de las plantas procesadoras de estas especies [2].
El quitosano fue descubierto por Rouget en 1859, quien encontr que al tratar la quitina con
una solucin caliente de hidrxido de potasio se obtena un producto soluble en cidos orgnicos y
la nombr quitina modificada. Ms tarde, en 1894, HoppeSeyler fue quien la denomin
quitosano [3].
Es un polisacrido que est presente de manera natural en las paredes celulares de algunos
hongos en pequeas concentraciones. Su principal forma de obtencin es a partir de la quitina,
mediante la hidrlisis, en medio alcalino muy concentrado, usualmente hidrxido de sodio o de
potasio, a altas temperaturas, ocurriendo la desacetilacin. El quitosano constituye el derivado ms
importante de la quitina y presenta propiedades significativamente diferentes a ella [4, 5].
Su nombre qumico es poli (14)2amino2desoxiDglucopiranosa, al igual que la
quitina, el quitosano no se presenta como una molcula nica, sus molculas pueden variar en los
valores de masa molecular y grados de desacetilacin promedio o grupos aminos libres, lo cual
determina la calidad y el uso de estos polmeros [6].
Debido a las propiedades funcionales y fisicoqumicas del quitosano, se ha podido identificar
una enorme cantidad de aplicaciones que abarcan reas tan variadas como: alimentacin, medicina,
agricultura, cosmtica, farmacia, entre otras [2, 7]. Se han reportado [8, 9] diversos mtodos fsico
qumicos para su obtencin y caracterizacin. Sin embargo, su aplicacin est limitada
principalmente debido a la variacin en su composicin qumica, grado de desacetilacin, tamao
de la cadena polimrica y purificacin. La fuente de quitina y los incontrolados procesos de
desacetilacin son los principales factores que afectan las propiedades finales del quitosano [8].
El objetivo del trabajo es optimizar el proceso de obtencin de quitosano a partir de quitina de
langosta (Panulirus Argus) a escala de banco, piloto e industrial aplicando para ello un diseo
factorial 32. Con el empleo de las tcnicas de espectroscpica infrarroja, difractometra de rayos X,
microscopia electrnica de barrido (SEM), absorcin atmica y valoracin potenciomtrica, fue
posible evaluar la calidad del quitosano obtenida en las diferentes escalas. El porcentaje de cenizas,
humedad, materia insoluble y pureza microbiolgica tambin fueron determinadas para verificar su
calidad farmacutica.
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PARTE EXPERIMENTAL
2.1. Materiales
La quitina, obtenida a partir de exoesqueletos de langosta (Panulirus Argus) [10] y
suministrada por el Centro de Investigacin y Desarrollo de Medicamentos (Cuba). El resto de los
reactivos y disoluciones fueron de calidad analtica.
2.2. Optimizacin del proceso de obtencin de quitosano. En un reactor de acero
inoxidable de 3,5 L, a escala de banco, se aadi la quitina al hidrxido de sodio 45% (m/v) con
calentamiento y agitacin a 226 r/min, como resultado de los clculos del desescalado.
Un diseo factorial (32) con dos factores de estudio y tres niveles de variacin, fue utilizado
para optimizar la reaccin de desacetilacin termoalcalina heterognea.
Los factores de estudio fueron las temperaturas (X1) de mezcla de la quitina con el hidrxido
de sodio 45% (m/v) y la de reaccin (X2), segn Hidalgo et al. [9]. En las Tablas 1 y 2 se muestran
los niveles estudiados y la matriz experimental del diseo, respectivamente. El grado de
desacetilacin se consider como variable respuesta para definir las condiciones ptimas de
obtencin del quitosano.

Tabla 1. Factores y niveles usados para el estudio de la reaccin de desacetilacin.

Niveles de variacin (C)

Factores

Nivel bajo (1)

Nivel medio (0)

Nivel alto (+1)

Temperatura de mezcla (X1)

30

55

80

Temperatura de reaccin (X2)

80

90

100

Tabla 2. Matriz experimental del diseo.

Ensayo
Orden
tecnolgico aleatorio
1
7
2
3
3
1
4
2
5
9
6
4
7
5
8
8
9
6

X1

X2

1
1
1
0
0
0
+1
+1
+1

1
0
+1
1
0
+1
1
0
+1

Todos los resultados fueron analizados estadsticamente (software Statgraphics Plus versin
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5.1 (1994 2001) y Statgraphics Centurion XV versin 15.2.05 StatPoint Inc.) a travs del anlisis
de varianza, diagramas de Pareto y los grficos de superficie de respuesta.
Posterior a la reaccin de desacetilacin, se filtr y lav con agua hasta pH neutro. Al slido
se le agregaron 500 mL de etanol al 96%, se lav, filtr y sec en un horno con circulacin, Electric
Drying Oven Model 1012, a 60C durante 8 horas.
El mejor ensayo tecnolgico, resultado del diseo experimental, se escal a nivel piloto e
industrial emplendose un reactor tipo tanque agitado manteniendo igual consumo de potencia por
unidad de volumen. En la Tabla 3 se muestran las caractersticas de los reactores utilizados en las
diferentes escalas.
Tabla 3. Caractersticas de los reactores.
Parmetro
Volumen del reactor (V)
Dimetro del impelente (d)
Dimetro del reactor (D)
Altura del lquido
Relacin d/D
Velocidad de agitacin
Quitina
Hidrxido de sodio 45% m/v

Unidad Banco Piloto Industrial

L
m
m
m

r/min
kg
L

3,50
0,05
0,22
0,10
0,23
226,00
0,35
3,50

50,00
0,25
0,60
0,55
0,41
58,00
5,00
50,00

250,00
0,25
0,60
2,75
2,05
58,00
25,00
250,00

Finalmente, el rendimiento del proceso, en las diferentes escalas, fue obtenido utilizando la
siguiente expresin:
R

RR
100
RT

(1)

donde RT es la cantidad de quitina (g) y RR la cantidad de quitosano (g). Se compararon los

rendimientos obtenidos a escala de banco, piloto e industrial utilizando el procedimiento de las
menores diferencias significativas de Fisher (LSD) y la comparacin mltiple de rango.
2.3. Evaluacin del quitosano.
2.3.1. Espectroscopia infrarroja (IR). Se utiliz la tcnica de KBr para el registro de los
espectros en la regin de 450 4.000 cm1. El espectro infrarrojo fue obtenido en un espectrmetro
(FT/IR460 Spectrometer Nirvis, Bhler, Suiza).
2.3.2. Difraccin de rayosX. El difractograma del polvo de quitosano se obtuvo con
radiacin de CuK (1,54 ) empleando un difractmetro de rayosX D8 Advance Bruker AXS
GMBH, Karlsruhe, Alemania. El intervalo angular fue desde 5 a 40 con incrementos de 0,2 y el
tiempo de medicin fue de 3 segundos/incremento.
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2.3.3. Anlisis trmico diferencial (DSC). Para la obtencin del termograma se procedi
segn lo descrito por Hidalgo et al. [9].
2.3.4. Microscopia electrnica de barrido (SEM). El ensayo se llev a cabo empleando un
microscopio electrnico de barrido (Zeiss, DSM 962, Alemania), recubriendo la muestra con platino
y empleando un aumento apropiado.
2.3.5. Determinacin de microelementos. El contenido de calcio, cobre, cinc, hierro, cadmio,
plomo, manganeso, cobalto y magnesio se determin por espectrometra de absorcin atmica
utilizando una lmpara de ctodo hueco del elemento. La determinacin de sodio y potasio se
realiz en modo emisin. Se emple el mtodo de los mnimos cuadrados lineales para la
calibracin. El equipo utilizado fue el modelo Avanta P de la firma GBC, Australia. Se pes 500
0,9 mg de la muestra, se disolvi con cido ntrico, utilizando un bao de arena con temperatura
controlada hasta obtener sales hmedas, se disolvi con agua destilada y se llev a 10 mL. Se
realizaron las diluciones necesarias hasta aadir cloruro de lantano para la determinacin de calcio,
magnesio, sodio y potasio. Se realizaron cinco rplicas.
2.3.6. Valoracin potenciomtrica. El grado de Ndesacetilacin de las variantes de
quitosano obtenidas a escala de banco, piloto e industrial fue determinado empleando un mtodo
potenciomtrico. Las mediciones se realizaron con un valorador (Mettler Toledo, Suiza). El
procedimiento bsicamente consisti en disolver el quitosano con un exceso de HCl 0,3 molL-1. La
solucin de quitosano se valor con una solucin de NaOH 0,3 molL-1, valorada previamente con
biftalato de potasio como patrn primario.
La valoracin se llev a cabo midiendo el cambio de pH cada 2 mL de base aadida. La
adicin se realiz de forma lenta y con agitacin continua para homogeneizar la solucin y evitar
errores debidos a la posible precipitacin del biopolmero. De esta manera, se obtuvo una curva de
pH en funcin del volumen de NaOH aadido, la cual presenta dos puntos de inflexin; la
diferencia entre ellos se corresponde con la cantidad de cido requerido para protonar los grupos
amino libres del quitosano. La concentracin de stos se determin utilizando la siguiente expresin
[8, 11]:

% NH 2

16,1 y x
f
m

(2)

donde y es el punto de inflexin mayor (mL), x el punto de inflexin menor (mL), f la molaridad de
la solucin de NaOH (mol/L), m la masa de la muestra (g), y 16,1el valor del miliequivalente entre
el cido clorhdrico y el quitosano.
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Los clculos se realizaron sobre la base de tres rplicas. Para evaluar la reproducibilidad de la
tecnologa diseada, se compararon estadsticamente los valores del grado de Ndesacetilacin de
los quitosanos obtenidos a escala de banco, piloto e industrial.
2.3.7. Determinacin del porcentaje de cenizas. Se incineraron 2 g de muestra a la llama
hasta total carbonizacin y desaparicin de humos blancos. Seguidamente se inciner en mufla
(Carbolite, Inglaterra) a 750800C durante 6 horas. El proceso final de enfriamiento se realiz en
un desecador y se pes el crisol, repitindose sucesivamente esta operacin hasta peso constante.
Los clculos se expresaron sobre la base de tres rplicas. Criterio de aceptacin: 1,0% [12].
2.3.8. Determinacin del porcentaje de humedad. Se pesaron 2 g de muestra en una balanza
analtica (Sartorius TE 214S, Alemania), colocndolos en una estufa (Memmet, Alemania) a 105C
hasta peso constante. Los resultados se expresaron sobre la base de tres rplicas. Criterio de
aceptacin: 10% [12].
2.3.9. Determinacin del porcentaje de materia insoluble. Se determin disolviendo el
quitosano 1,0% (p/v) en una solucin de cido actico al 1%, filtrndola con papel de filtro grado
610. El papel con el residuo fue secado a 105C, hasta peso constante [13]. Los clculos se
realizaron sobre la base de tres rplicas. Criterio de aceptacin: 0,5% [12].
2.3.10. Determinacin de la pureza microbiolgica . Se realiz el conteo microbiolgico para
la evaluacin de la pureza microbiolgica del quitosano obtenida, segn lo descrito en la USP 33
[14], para medicamentos no estriles.

RESULTADOS Y DISCUSIN
La evaluacin de las condiciones del proceso de obtencin de quitosano, y sus efectos sobre el
grado de Ndesacetilacin, mostr los resultados que aparecen en la Tabla 4.
Tabla 4. Resultados del diseo de experimentos.
Ensayo
Tecnolgico
1
2
3
4
5
6
7
8
9

Temperatura
de mezcla (C)
30
55
30
55
80
80
30
80
55

Temperatura de
reaccin (C)
100
80
90
100
80
100
80
90
90
108

Grado de
Ndesacetilacin (%)
70,43 1,13
66,62 0,16
67,70 0,30
72,71 0,49
64,45 0,20
76,81 0,21
62,12 0,40
68,50 0,35
69,71 0,38
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En la Figura 1, se muestra el anlisis de varianza, el diagrama de Pareto y el grfico de

superficie de respuesta.
Anlisis de la Varianza para GrDesacetilacin
-------------------------------------------------------------------------------Fuente
Suma de Cuadrados
Gl Cuadrado medio
F-Ratio
P-Valor
-------------------------------------------------------------------------------A:Tmezcla
30,115
1
30,115
14,36
0,0030
B:Treaccin
238,699
1
238,699
113,81
0,0000
AB
8,20125
1
8,20125
3,91
0,0736
Bloques
1,85602
1
1,85602
0,88
0,3671
Error Total
23,0708
11
2,09735
-------------------------------------------------------------------------------Total (corr.)
309,36
17
R-cuadrado = 92,5424 por ciento

GrDesacetilacin = 25,1571 + 0,0633667*Tmezcla + 0,446*Treaccin

Figura 1. Anlisis del grado de Ndesacetilacin para la optimizacin del proceso tecnolgico

Teniendo en cuenta el anlisis de varianza y diagrama de Pareto, se observa que los dos
factores estudiados tienen una influencia significativa sobre el grado de desacetilacin del
quitosano, siendo en este caso positiva, lo cual se evidencia a travs de los valores de p < 0,05.
Adems, se aprecia que no existe interaccin entre las temperaturas de mezcla y la de reaccin.
A partir del grfico de superficie respuesta fue seleccionado el mejor ensayo tecnolgico
correspondiente con el nivel alto para cada uno de los factores estudiados, obteniendo quitosanos
con el mayor grado de Ndesacetilacin (76,81%). Generalmente, los quitosanos comerciales
presentan un porcentaje de desacetilacin mnimo de 60% [2]. Los procedimientos usuales de
desacetilacin termoalcalina de la quitina permiten lograr productos desacetilados en un 7585%.
La obtencin de quitosanos, solubles en cidos diluidos (generalmente con ms del 70% de grado
de desacetilacin) constituye, por lo tanto, un criterio de la calidad del proceso de obtencin de los
quitosanos estudiados.
En la Figura 2, se presenta el anlisis estadstico realizado con los resultados del grado de
desacetilacin de los quitosanos obtenidos a escala de banco, piloto e industrial.
109

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Paz et al. C o n t r a s t e M l t i p l e
---------------Mtodo: 95.0 por
F
---------------INDUSTRIAL
3
BANCO
3
PILOTO
3
---------------Contraste
---------------BANCO - PILOTO
BANCO - INDUSTRI
PILOTO - INDUSTR
---------------* indica una dif

c
r
-

e
e
-

de
n
c
-

Rango

-------taje LSD
.
Me
-------77
78
81
------------A
I
e

L
AL
-re

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Obtencin de quitosano

-----------------------------------d
.
.
.
-

i
3
1
9
-

a
3
1
0
-

Gr
-------------3
X
7
X
3
X
-------------Di
--------------------------3
0.
4.
-------------------------ncia significativa.
3
6
3
-

upos homogneos
------------------

f
.
7
5
-

e
7
8
7
-

r
8
3

e
6
3

n
6
3

------------cias
------------7
3

----------------

GrDesacetilacin

Media

E l S t a t A d v i s o r88
-------------85
Esta tabla aplica un procedimiento de compara
d e t e r m i n a r l a s82 m e d i a s q u e s o n s i g n i f i c a t i v a m e n t e
otras.
La mitad inferior de la salida muestra l
e n t r e c a d a p a r79
a de medias.
No hay diferencias e
significativas entre ningn par de medias a un n
c o n f i a n z a . 9 5 . 076
%.
En la parte superior de la pg
grupo homogneo segn la alineacin del signo X
d e c a d a c o l u m n73
a, los niveles que tienen signo X
m e d i a s e n t r e l a s c u BANCO
a l e s PILOTO
n o hINDUSTRIAL
ay diferencias estad
significativas.
El mtodo actualmente utilizado
las medias es el procedimiento de las menores di
Figura 2. Anlisis del grado de Ndesacetilacin del quitosanoen
las diferentes escalas.
significativas de Fisher (LSD).
Con este mtodo
riesgo de considerar cada par de medias como sig
diferentes cuando la diferencia real es igual a

ci
d
a
st
iv
in
en
fo
s
p
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,
ni
0.

i
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a
e
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e
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i

ml
eren
fere
sti
de
se
a co
an u
came
a di
ncia
y un
cati

Como se observa no existen diferencias significativas entre los valores del grado de N
desacetilacin de los quitosanos obtenidas a escala de banco, piloto e industrial, comprobndose la
reproducibilidad de la reaccin de desacetilacin termoalcalina de la quitina en las condiciones
ptimas establecidas. En la Figura 3 puede observarse la consistencia del proceso tecnolgico a
travs del clculo del rendimiento. El valor promedio para la escala de banco fue de 57,7, 59,5 para
el nivel piloto y 54% para el industrial, que segn Hernndez et al. [2] se considera una
transformacin sinttica eficiente, no existiendo diferencias significativas entre las medias para un
nivel de confianza de 95.0%.
Espectroscopia IR. La Figura 4 muestra los espectros de absorcin correspondientes al
biopolmero obtenido a escala de banco, piloto e industrial. Se exhiben las bandas de los grupos
funcionales caractersticos de la molcula de quitosano, evidencindose la aparicin a 1.637 cm 1 de
la banda del grupo amino, as como las correspondientes a los grupos OH y NH a 3.433 cm1 y
2.915 cm1, respectivamente. Adems, se aprecian las bandas del grupo CH a 2.855 cm1, grupo
piransico a 1.077 cm1 y grupo COC a 1028 cm1. Este comportamiento se corresponde con lo
planteado por Hidalgo et al. [9]; Nieto [15] y Fernndez et al. [16].
El anlisis mediante IR mostr similitud en los espectros para cada una de las muestras,
confirmando con estos resultados que el escalado no afect la identidad del producto, pues
110

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t
t
n
c

i
e
c
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ple p
s una
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mente

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l
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umn
gr
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tif
a.
upo

nir

5.0% d
vamente

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Obtencin de quitosano

independientemente de la etapa de escalado, se mantienen las bandas de los grupos funcionales ms

importantes, demostrndose as que la quitina se transform en una nueva materia prima: quitosano.
Contraste

Mltiple

---------------Mtodo: 95.0 por

F
---------------INDUSTRIAL
3
BANCO
3
PILOTO
3
---------------Contraste
---------------BANCO - PILOTO
BANCO - INDUSTRI
PILOTO - INDUSTR
---------------* indica una dif

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r
-

e
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-

de

-------taje LSD
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Me
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57
59
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L
A
r

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Rango

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i
0
7
5
-

a
Gr
---------------X
333
X
667
X
---------------Di
---------------------------1
3.
L
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--------------------------encia significativa.

upos homogneos
-----------------------------

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5
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r
3
3
6
-

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--------------cias
+
--------------3
8
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8
---------------

/
.
.
.
-

5
5
5
-

--L
--058
058
058
---

Rendimiento

64

a
t
m
.
f
a
d
s
f
e
f
o
e

t A d v i s o r 61
- - - - - - - - 58
a tabla aplica un procedimiento de compa
i n a r l a s 55
medias que son significativamen
La mitad inferior de la salida muestra
c a d a p a r a52 d e m e d i a s .
No hay diferencias
i c a t i v a s 49
entre ningn par de medias a un
nza.95.0%.
E n BANCO
l a p PILOTO
a r t e INDUSTRIAL
superior de la p
homogneo segn la alineacin del signo
a Figura
c o l u m3.n Anlisis
a , l o sdeln rendimiento
i v e l e s q en
u elast diferentes
i e n e n sescalas
igno
entre las cuales no hay diferencias est
icativas.
El mtodo actualmente utiliza
dias es el procedimiento de las menores
icativas de Fisher (LSD).
Con este mto
de considerar cada par de medias como s
ntes cuando la diferencia real es igual

Media

El St
----Es
deter
otras
entre
signi
confi
grupo
de ca
media
signi
las m
signi
riesg
difer

ra
te
l
e
n
g
X
X
ad
do
di
do
ig
a

ci
d
a
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iv
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fo
s
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fe
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0.

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i
l
n
n
s
s

den
umn
gr
te
cer

tifica un
a.
Dentro
upo de
nir

entre

5.0% de
vamente

Figura 4. Espectro de absorcin del quitosano cubano (a: banco, b: piloto, y c: industrial)

Difraccin de rayosX. La Figura 5, muestra el difractograma del lote industrial. Se observa

un mximo de difraccin ms intenso, aproximadamente a 20 (2), que el observado alrededor de
10 (2). La forma hidratada del quitosanopresenta dos reflexiones, a 10 y aproximadamente a 20,
la forma anhidra exhibe un pico en 2 cerca de 15 [6]. Tras el anlisis del difractograma obtenido,
se puede apreciar que la muestra de quitosano presenta fase cristalina y amorfa, lo cual coincide con
lo reportado por Hidalgo et al. [9] y Prashant et al. [17]. Al igual que en la quitina, las molculas
de quitosano en estado slido estn organizadas en regiones cristalinas, y coexisten con regiones
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8
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amorfas, por lo que se demuestra la estabilidad de la estructura del biopolmero como resultado del
tratamiento de desacetilacin heterognea termoalcalina escalado. Resultados similares fueron
obtenidos a escala de banco y piloto.

Figura 5. Difractograma de rayos-X del quitosano.

Anlisis trmico diferencial (DSC). La Figura 6 muestra el comportamiento trmico del lote
industrial, caracterstico de la estructura polimrica del quitosano, corroborndose lo reportado por

mV

Hidalgo et al. [9]. Resultados similares fueron obtenidos a escala de banco y piloto.

Temperatura (C)
Figura 6. Termograma del quitosano.

Microscopia electrnica de barrido (SEM). La micrografa de microscopia electrnica de

barrido (SEM) de las partculas se muestra en la Figura 7. El quitosano derivada de la quitina de
langosta presenta forma irregular y tamao heterogneo, observndose partculas asimtricas.
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Figura 7. Fotomicrografa electrnica de barrido del quitosano

Resultados de la cuantificacin de microelementos. En la Tabla 5 se muestran los

resultados de la determinacin de microelementos por espectrometra de absorcin atmica, de los
quitosanos obtenidos a escala de banco, piloto e industrial, evidencindose que el calcio es el
elemento mayoritario, resultados acordes con lo obtenido por Hidalgo et al. [9]. Las cantidades de
los iones metlicos estuvieron en los rangos aceptados para uso farmacutico, segn la USP 33 [14],
pudindose afirmar que el quitosano obtenida por esta va tiene calidad farmacutica.
Tabla 5. Valores del contenido de microelementos.
Metal
Mg
Ca
Na
K
Zn
Fe
Mn
Cu
Pb
Cd
Co

Concentracin (g/g)
Banco

Piloto

Industrial

67,81
395,59
106,14
<1,00
8,47
<1,00
<0,50
1,93
<0,50
<0,10
<0,50

62,12
384,54
111,89
<1,00
8,73
<1,00
<0,50
2,05
<0,50
<0,10
<0,50

62,40
332,45
134,87
<1,00
8,00
<1,00
<0,50
3,10
<0,50
<0,10
<0,50

Resultados del grado de Ndesacetilacin, porcentaje de cenizas, humedad y material

insoluble. El escalado del proceso de obtencin de quitosano, y sus efectos sobre el grado de N
desacetilacin, porcentaje de cenizas, contenido de humedad y material insoluble, mostr los
resultados que aparecen en la Tabla 6. En la misma se incluyen valores reportados para muestras
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comerciales de quitosano de alta (HMW) y media masa molecular (MMW) (Aldrich, USA).

Tabla 6. Grado de Ndesacetilacin, porcentaje de cenizas, humedad y material insoluble

del quitosano obtenido en diferentes escalas y de muestras comerciales
Muestra
Quitosano (escala
banco)
Quitosano (escala
piloto)
Quitosano (escala
industrial)
HMW
MMW

Grado de N
desacetilacin (%)

Cenizas
(%)

Humedad
(%)

Material insoluble
(%)

76,85 0,30

0,73 0,01

7,50 0,20

0,98 0,01

88,21 0,02

0,80 0,02

9,20 0,05

1,05 0,01

79,90 0,03

0,68 0,08

6,80 0,40

0,97 0,02

79,00
81,40

0,48
0,61

11,69
13,67

0,34
0,94

Datos del proveedor

El grado de Ndesacetilacin de las muestras de quitosano a escala de banco, piloto e

industrial fue mayor del 70%, mientras que el contenido de cenizas fue superior al de las muestras
comerciales, corroborndose lo planteado por Hidalgo et al. [9]. Estos valores estn influenciados
por la presencia de impurezas de tipo mineral (calcio), resultados acordes con el contenido calcreo
caracterstico del exoesqueleto de la langosta. Adems del origen, depende tambin de las
propiedades y condiciones de obtencin del quitosano, debido a la relacin directa que existe entre
la concentracin de la disolucin de NaOH y su viscosidad, facilitando en mayor o menor medida la
retencin de impurezas. No obstante, el valor obtenido es menor del 1%, lmite establecido para este
parmetro en las especificaciones de calidad de las muestras comerciales HMW y MMW [12],
evidencindose su calidad farmacutica.
Con la eliminacin de grupos acetilo, como resultado de la desacetilacin termoalcalina de la
quitina, la cantidad de grupos aminos libres en la cadena polimrica aumentan, por lo tanto es de
esperar una mayor capacidad de absorcin de agua en el quitosano, en la que se distinguen tres
sitios de humedad predominantes (grupos hidroxilos libres de las cadenas, grupos aminos y el final
de la cadena polimrica, compuesta por un grupo hidroxilo aldehdo), adems de su estructura
porosa con regiones cristalinas y amorfas que facilitan la absorcin del agua en su superficie [9,18].
Las condiciones de secado a escala de banco, piloto e industrial permitieron obtener un producto
con una prdida por desecacin menor del 10% [12]. Dadas sus caractersticas estructurales e
higroscopicidad despus de secada, es importante almacenarla en recipientes cerrados y protegidos
de la humedad.
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La concentracin de material insoluble es superior a la de las muestras comerciales, resultado

que coincide con lo reportado por Hidalgo et al. [9]. Tomando en consideracin la presencia de
material inorgnico se puede justificar este resultado, as como la composicin de microelementos
de los quitosanos obtenidos y el origen del material de partida.
Evaluacin microbiolgica. El conteo de bacterias arroj un valor de 40 UFC/g para el lote
elaborado a escala de banco y 23 UFC/g para el piloto e industrial, mientras que el conteo de
hongos result menor de 10 UFC/g con ausencia de microorganismos patgenos para los quitosanos
obtenidas en las tres escalas. Por lo que, se satisfacen los lmites establecidos por la USP 33 [14]
para materias primas no estriles de uso farmacutico.

CONCLUSIONES
Se optimiz un proceso tecnolgico para la obtencin de quitosano, a partir de quitina de
langosta, demostrndose mediante un diseo experimental la influencia que sobre el proceso tenan
la temperatura de mezcla y reaccin. Una velocidad de agitacin de 226 r/min (escala banco) y 58
r/min (escala piloto e industrial), temperatura de mezcla de 80C y reaccin de 100C, lavado con
agua hasta neutralidad, y un tiempo de secado de 8 horas a 60C, fueron las condiciones ptimas del
proceso para la obtencin del quitosano. Se demostr la homogeneidad de las propiedades en los
lotes a escala de banco, piloto e industrial, as como la consistencia y factibilidad del proceso
tecnolgico establecido.

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