Bioquímica: parte de la química que estudia los elementos de la naturaleza de los

seres vivos.

FUNCIONES DEL ASISTENTE DE LAB:

-Conocer el material de laboratorio.
-Centrifugar la sangre.
-Separar los sueros.
-Conocer los tipos de liquidos
-Reconocer las características macroscó picas y químicas en uroanalisis.
-Centrifugar las orinas
-Conocer las técnicas en el á rea.

Uroanalisis: aná lisis de la orina en sus diferentes fases.

Orina: liquido acuoso transparente y amarillento de olor característico, secretado

por los riñ ones y eliminado al exterior por el aparato urinario.

Funciones de la orina:

-Eliminacion de sustancias toxicas producidas por el metabolismo celular.

-Eliminacion de sustancias toxicas como la ingesta de drogas
-Control electrolítico al regular la excreció n sobretodo de sodio y potasio
-Control de la presió n arterial a través de la regulació n hídrica o de la volemia.
-Control de equilibrio acido-base.

Toma de muestra para uroanalisis:

-Envase limpio y seco, descartable y esteril.

-Primera orina de la mañ ana.
-Lavarse los genitales con agua y jabon
-Se elimina el primer chorro de orina y se recolecta el segundo.
-Los recipientes se rotulan en el envase no en la tapa.
-Las muestras deben ser enviadas inmediatamente al laboratorio después de ser
recolectadas.

-Recoleccion de orina de 24 hrs:

-Durante el período beber líquido en forma normal. No beber alcohol.

-Orinar a las 7:00 am y eliminar esa orina.
-Recoger a partir de ese momento en un recipiente limpio y seco toda la orina que
elimina durante 24 hrs incluyendo la primera orina de la mañ ana siguiente.
-Mantener la orina refrigerada. Una vez finalizada la recolecció n identificar cada
envase.
-Llevar la orina recolectada el mismo dia que termino la recolecció n.
-No contaminar la orina con papel higienico, deposiciones o flujo menstrual.

ANALISIS MACROSCOPICO o físico quimico:

-Volumen: en condiciones normales un adulto excreta de 750 a 2000 ml/24 hrs.

1) Poliuria: aumento considerable del volumen de la orina. Sus causas pueden

ser la polidipsia psicogénica, hipertiroidismo, uremia, diabetes mellitus o
insípida.

2) Oliguria: excreció n inferior a 500 ml/ 24 hrs. Sus causas pueden ser por
deshidratació n cró nica, nefropatías, shock, glomerulonefritis.

3) Anuria: anulació n completa de la formació n de orina. Sus causas pueden ser

por fallo renal agudo, obstrucció n mecá nica del tracto urinario,
glomerulonefritis aguda.

OLOR: la orina tiene un olor característico. Cuando es normal huele al olor

característico o sui generis. Cuando es patoló gico puede ser:

-Amoniacal: por bacterias

-Fétido: por bacterias
-Cetona o fruta fresca: cetosis diabética.
-Jarabe de arce: enfermedad de jarabe de arce.
-Raton: fenilcetonuria.

ASPECTO: la orina normal es limpia y transparente.

Se puede reportar transparente, ligeramente turbia, moderadamente turbia y

turbia.

La turbidez en la orina la puede producir leucocitos, eritrocitos, bacterias,

moco, grasa y cristales.

COLOR: el color normal de la orina es amarrilento o incoloro y lo aportan

pigmentos como urocromo, urobilina y uroeritrina.

El color patoló gico de la orina puede ser por:

Rojo: hematíes, hemoglobina o mioglobina, remolachas y fá rmacos

Pardoscura o negra: glomerulonefritis aguda.
Azul: pseudomonas
Castañ o amarillento a verde amarillento: ictericias obstructivas.

DENSIDAD: peso específico de una sustancia. Indice de concentració n del

material disuelto en la orina. Depende del numero y peso de las partículas en
solució n.

Limites normales: 1,005-1,030 g/ml.

Anormales:
-Hipostenuria: peso especifico menor a 1007 g/ml (Problema de
concentració n)

-Hiperestenuria: excreció n inusualmente elevada

-Isostenuria: densidad fija en 1010 g/ml (mala reabsorció n tubular)

Se puede medir con:

-Refractomero: el índice de concentració n de una solució n es proporcional a

la cantidad de solutos disueltos que contenga.

-Tiras reactivas: la prueba se basa en el cambio de pKa de ciertos

polielectró litos pretratados en relació n con la concentració n ió nica.

ANALISIS QUIMICO:

Las pruebas químicas son:

PH, proteínas, glucosa, cuerpos cetó nicos, bilirrubina, urobilinó geno, nitritos,
hemoglobina, densidad, leucocitos.

Tiras reactivas: procedimiento para su uso:

1-Sumergir completamente las á reas de prueba de la tira en orina fresca,

bien mezclada y sin centrifugar.

2-Eliminar el exceso de orina.

3- Comparar las á reas reactivas con la correspondiente carta de colores.

PH: es la concentració n de hidrogeniones. Refleja la capacidad del riñ on para

mantener una concentració n normal de hidrogeniones en los liquidos
extracelulares.
El ph de la orina es de 4,7 a 7,8.

Variaciones diumas: por procesos patoló gicos o dietas.

Ph urinario: los indicadores rojo de metilo y azul de bromotimol dan una

gamma de colores naranja, verde y azul a medida que se eleva el ph.

PROTEINURIA: presencia de proteínas en orina. Normalmente hay escasa

cantidad de proteínas en la orina, <150mg/24hr

Pruebas selectivas: puede evaluarse con tiras reactivas y debe confirmarse

con otros métodos.

-Las tiras reactivas son mas sensibles a la albumina

-Se basa en el error proteico de los indicadores para producir una reacció n
colorimétrica visible.
-El punto de cambio de color en algunos indicadores de Ph es diferente en
presencia de proteínas.

-Por lo general las tiras está n impregnadas de azul de tetrabromofenol y un

tampó n que lo mantiene en ph entre 3 y 4. Orinas muy alcalinas pueden
superar al buffer con cambio de color no correspondiente a presencia de
proteínas (falso positivo)

Proteinuria (método de Robert) : á cido nítrico y sulfato de magnesio: El á cido

nítrico transforma las proteínas en meta proteínas las cuales son insolubles y
producen un anillo blanquecino en la interfase

Pasos:

-Rotule un tubo de centrifuga y coloque 10 ml de muestra de orina.

-Centrifugue la muestra a 1500 rpm durante 5 min.
-En otro tubo de ensayo coloque 1 ml del reactivo de Robert.
-Deje caer lentamente por las paredes del tubo 1ml de sobrenadante de la
orina centrifugada.
-Observe en la interfase la formació n o no de anillo.

REPORTE: negativo si no se observa anillo blanquecino, positivo si se

observa anillo cuyo grosor determina la forma de reporte (+, ++, +++)

GLUCOSURIA: es la presencia de glucosa en la orina a niveles elevados.

depende de la cifra de glicemia, filtrado glomerular y grado de reabsorció n.

Aparece cuando se supera el umbral renal 180mg/dl

Causas:
-Diabetes mellitus
-Acromegalia
-Sindrome de Cushing
-Tumores de las células pancreá ticas
-Hipertiroidismo
-Embarazo: por aumento de filtració n glomerular
-Enfermedades hereditarias: disfunciones tubulares

Métodos para determinar glucosuria:

-Mediante la tira reactiva que utiliza el método de la glucosa oxidasa.

-Metodo de benedict: carbonato de sodio, citrato de sodio y sulfato de cobre.

Los grupos aldehídos de los azucares reducen hidró xidos metá licos con la
posterior oxidació n de los azú cares.

Se utiliza para detectar sustancias reductoras (Fructosa, pentosa, galactosa,

maltosa)

Reporte: azul (negativo), verde (+) , pardo verduzco (++), amarillo (+++)

Cuerpos cetó nicos: son productos de desecho de las grasas. Se forman

durante el catabolismo de los á cidos grasos: acido acetoacético, acido B
hidroxibutírico y la cetona.

Encontramos:

-Reduccion de ingesya de hidratos de carbono.

-Disminucion de la utilizació n de los hidratos de carbono.
-Trastornos digestivos.
-Eclampsia.
-Vó mitos de larga duració n
-Embarazos
-Deportistas
-Hiperactividad

Bilirrubina: pigmento biliar de color amarrillo anaranjado que proviene del

desdoblamiento de la hemoglobina. La bilirrubina no conjugada esta unida a
la albú mina y no puede atravesar la barrera glomerular.

Bilirrubina en orina se llama bilirrubinuria: se debe a enfermedades

hepá ticas principalmente infecciosas o tó xicas.
Caracteristicas de la orina con billirubinuria: color oscuro y presencia de
espuma amarilla.

Urobilinó geno: es la bilirrubina conjugada excretada al tracto intestinar que

por acció n bacteriana se convierte en urobilinó geno, mesobilirrubinó geno y
estercobilinó geno.

Excrecion aumentada: anemias hemolíticas y disfunciones hepá ticas.

Escrecion disminuida en lactantes por carecer de bacterias intestinales y en
terapias con antibió ticos.

Nitritos: nitratos de la orina que por acció n enzimá tica de ciertas bacterias
presentes en la orina (Gram-) se transforman en nitritos.

Importante para la prueba:

-La muestra debe ser la primera de la mañ ana (las bacterias requieren
minimo de 4 horas para metabolizar nitratos)

-La prueba debe realizarse inmediatamente después de ser emitida para

evitar el desarrollo de microorganismos contaminantes.

MÉ TODO: tira reactiva donde se hace reaccionar el nitrito con á cido p-

arsinilico o sulfanilamida y sugiere la presencia de 10( a la 5) o má s
organismos x ml de orina.

Hemoglobinuria: presencia en exceso de hemoglobina en la orina. La

hemoglobina es el pigmento que contienen los eritrocitos y para que
aparezca en la orina es necesario que se produzca hemó lisis.

Aparece hemoglobinuria: anemias hemolíticas, agentes químicos o parasitos

del paludismo, transfusiones incompatibles, quemaduras graves, ejercicios
intensos.

Se determina en un laboratorio por tiras reactivas cuya superficie está

impregnada de un cromó geno orgá nico (ortotoluidina) y un peró xido
orgá nico.

Hematuria: presencia de sangre o hematíes intactos en la orina.

Causas de hematuria:

-Orinas muy alcalinas o de muy baja densidad pueden provocar lisis de los
eritrocitos, liberando hemoglobina.

-Hematuria por causas renales: glomerulonefritis aguda, nefritis

hemorrá gica.

-Hematuria por causas no renales: hipertensió n maligna, poliquistosis renal,

nefritis lupica, infarto renal, tumores renales, cá lculos, etc.

Tira reactiva: se basa en la actividad de la hemoglobina y mioglobina que

catalizan la oxidació n de un peró xido organico.

ANALISIS MICROSCOPICO DEL SEDIMENTO URINARIO:

Pasos para servir el sedimento:

-Centrifugar la orina 1500x5min

-Descartar el sobrenadante.
-Colocar 20 landas de sedimento urinario en una lá mina portaobjetos.
-Cubrir la gota con una lamina cubreobjeto.
-Llevar al bioanalista encargado.

Valores normales: (reporte)

Leucocitos: 0-3 xC
Bacterias: escasas xC
Hematíes: 0-3 xC
Células epiteliales planas: 0-3 xC
Células epiteliales redondas: 0-3 xC
Cristales: escasos, moderados o abundantes xC.
Espermatozoides, levaduras, pará sitos: presentes.

Aná lisis de liquidos bioló gicos:

Suero sanguíneo: es el liquido sanguíneo que queda después de eliminar los

elementos formes de la sangre y el fibrinó geno. Es de un color amarillo opaco
y transparente que queda después de la coagulació n de la sangre.

Se centrifuga a 3500 RPMx5 min

Tipos de sueros patoló gicos:

-Suero ictérico (amarillo debido a su tenor de bilirrubina). Ictericia de la piel
en la insuficencia hepá tica.

Suero lipémico. Consiste en el aspecto lechoso de una muestra de laboratorio

debido al alto contenido de grasa plasmá tica.

Suero hemolizado: rojizo debido a una lisis o ruptura de los globulos rojos)

Liquido cefalorraquídeo:
-Es un liquido de aspecto claro, transparente que bañ a al encéfalo y la medula
espinal , circulando por los ventrículos cerebrales y el canal medular.

-Se forma en los plexos coroideos de los ventrículos laterales por

ultrafiltració n desde la sangre a través de la barrera hematoencéfalica y por
secreció n activa.

-Su funció n principal es actuar como colchó n protector para el SNC, ademas,
recoge los desechos y permite la circulació n de nutrientes del mismo.

Liquido seroso:

-Ascítico, pleural, pericá rdico.

-Son líquidos corporales que derivan del ultra filtrado del plasma a través de
la red capilar de las membranas serosas que delimitan diversas cavidades
corporales.

-Su formació n es similar a la del liquido extravascular en cualquier otra parte

del organismo y en ella intervienen la presió n hidrostá tica, la presió n
coloidosmó tica y la permeabilidad capilar.

Líquido sinovial:

-Se produce por diá lisis del plasma a través de la membrana sinovial al que
se le añ ade el acido hialuró nico secretado por las células b de dicha
membrana.

-El acido hialuró nico le confiere su viscosidad característica, que le diferencia

de otros liquidos bioló gicos.

-En condiciones fisioló gicas todas las articulaciones diartroidales contienen

solo una pequeñ a cantidad de liquido en su interior.