MEDIOS DE CULTIVO Y

MÉTODOS DE SIEMBRA

Área de Bacteriología. Departamento de Ciencias Microbiológicas

Facultad de Veterinaria -UdelaR
MEDIO DE CULTIVO

Una sustancia líquida o

sólida, de naturaleza definida
o no, natural o sintética,
simple o compuesta que
permite el desarrollo de
diferentes microorganismos.
Preparación de medios de cultivo

A.A partir del medio comercial

deshidratado

B. A partir de sus distintos

componentes
Preparación de medios de cultivo
PROCEDIMIENTO:

1. Pesar la cantidad estimada

2. Hidratarlo con el volumen de agua destilada
correspondiente
3. Calentar agitando lentamente
hasta su disolución
4. Controlar pH y apariencia
5. Envasar y esterilizar a
121°C por 15 min
6. Enfriar y realizar control de esterilidad
 CLASIFICACIÓN
1) SEGÚN SU ESTADO FÍSICO

A. SÓLIDOS
B. LÍQUIDOS 3) SEGÚN SU USO
C. SEMISÓLIDOS
D. SEMILÍQUIDOS A. Nutrientes (sólidos y
líquidos)
B. Selectivos (sólidos)
C. Diferenciales
D. De enriquecimiento
(líquidos)
2) SEGÚN SU USO

• Medios nutrientes

•Pueden ser sólidos o líquidos

•Son aquellos que presentan los nutrientes mínimos para el
crecimiento de los microorganismos que no necesitan requerimientos
especiales

• Medios selectivos

•Favorecen el crecimiento de un determinado grupo de bacterias

•La selectividad se consigue normalmente con un producto químico
agente, tinta o antibiótico.
•Son sólidos
2) SEGÚN SU USO

• Medios diferenciales

• Sólidos o líquidos
•Permite diferenciar un microorganismo de otro según determinadas
propiedades de crecimiento en dichos medios
•Presentan algún indicador
•Ej: TSIA, Citrato, etc (T-P de pruebas bioquímicas)

• Medios de enriquecimiento

•Son medios que tienen aditivos adicionales para favorecer el

crecimiento de determinados microorganismos
•Son líquidos
Medios de cultivo MÁS COMUNES

•Agar Nutritivo (AN)

•Tryptic Soy Agar (TSA)

•Agar Sangre (AS)

•Agar Muller-Hinton (MH

•Caldo Nutriente (CN)

Medios de cultivo MÁS COMUNES

• Agar McConkey (McC)

• Xilosa-Lisina-Tergitol 4 Agar (XLT4)

• Salmonella-Shigella Agar (SSAgar)

• MSA ( Manitol Sal Agar):

MEDIOS DE CULTIVO MÁS COMUNES

•LOEWENSTEIN

•Cooked meat
¿Qué significa sembrar?

Transferir una muestra

microbiológica de un
ambiente determinado a Promover
un medio de cultivo con intencionalmente el
fines cuantitativos o desarrollo de un
cualitativos
microorganismo en
medios de cultivo y
Tener en cuenta: condiciones de
• Temperatura de
incubación
laboratorio
• Condiciones de oxígeno controladas
• Tiempo de incubación
¿Dónde sembramos? y ¿Para qué sembramos?

Sembramos en medios de cultivo

para hacer que las bacterias se
reproduzcan con el objetivo de
aumentar el número de
individuos de una población.
 Técnica Aséptica
ASÉPTICO= sin microorganismos

•Se refiere a las prácticas que reducen la

posibilidad de que mi cultivo de interés se
contamine con un microorganismos externo a la
muestra.

•Técnica usada para evitar la contaminación

durante la manipulación de cultivos y de medios
de cultivos
 Principios del cultivo microbiológico
1. Facilitar el crecimiento y el aislamiento de un
microorganismos presente en una muestra
clínica

2.Tratar de determinar que microorganismo de los

que podemos encontrar en una muestra es más
probable que sea el causante de la afección

3.Obtener un desarrollo de microorganismos

suficiente para poder identificarlos y
caracterizarlos
SIEMBRA: en medio líquido

MEDIO LÍQUIDO

MEDIO LÍQUIDO

MEDIO SÓLIDO
• Placa
•Tubo
SIEMBRA: en medio líquido

MEDIO LÍQUIDO MEDIO LÍQUIDO

Agitar el tubo Destapar el tubo y

Esterilización del
con la muestra flambear la boca
asa
(Homogenizaci
ón)
SIEMBRA: en medio líquido

Tomar la muestra Volver a flambear la Tapar el

boca del tubo tubo
SIEMBRA: en medio líquido

Destapar el tubo
con el medio a Sembrar la Flambear la boca
inocular y flambear muestra del tubo
la boca
SIEMBRA: en medio líquido

Tapar el Esterilización del

tubo asa

INCUBAR
 SIEMBRA: en medio líquido

MEDIO SÓLIDO
• Placa MEDIO LÍQUIDO
•Tubo

INCUBAR
 SIEMBRA: en medio semisólido

MEDIO SÓLIDO
• Placa MEDIO
• Tubo SEMISÓLIDO

INCUBAR
 Definición importante:

COLONIA BACTERIANA
Agrupación de bacterias originadas a partir
de una bacteria madre que se establecen y
extienden en un medio.
SIEMBRA: en medio sólido
Siembra en tubos:
Siembra en placa: A. Con agar inclinado
1. Por extensión (Columna y Pico de
2. Por inclusión flauta)
3. Por estría

B. Con medio sólido

horizontal
(Pico de Flauta)
 SIEMBRA: en medio sólido

1. Siembra en placa: Por extensión

•Se extiende el inóculo uniformemente con una varilla
acodada estéril por la superficie del medio de cultivo
•Las células diseminadas sobre la superficie formarán
colonias aisladas

2. Siembra en placa: Por inclusión

 SIEMBRA: en medio sólido
3. Siembra por estría: PARA AISLAMIENTO

Colonias aisladas
Cultivo puro: colonias de
igual morfología

Cultivo
AXÉNICO
 SIEMBRA: en medio sólido

A. Siembra en tubos: En agar inclinado

(Columna y Pico de flauta)
Se siembran por punción y estría
(con hilo)

B. Siembra en tubos: En medio sólido horizontal (Pico de

flauta)

Se siembran por estría en la superficie (con

asa)