ASIGNATURA VIRTUAL

FISIOLOGÍA Y GENÉTICA MICROBIANA 04B

TAREA 13

Ciclo académico: VII

Semestre: 2020-II

Tarea 13: Informe de práctica, Introducción enzimática del operón Lac.

Desempeño:

Explica, usando estrategias, la relación entre las funciones de replicación, transcripción y

traducción de los ácidos nucleicos y su regulación.

Informe de la Práctica

Responsables:

❖ Custodio Chininin, Mario Joseph.

❖ Díaz Villa, Alisson.

❖ Gonzalez Ballena, Dannar.

❖ Medina Ñopo, Jessica.

❖ Sandoval Flores, Juan.

 I. INTRODUCCIÓN
La regulación de la expresión genética permite a las bacterias realizar los procesos de
transcripción y traducción cuando sea necesario y detener dichos procesos cuando no lo es,
así por ejemplo, si Escherichia coli es cultivada en agar MacConkey deberá sintetizar las
enzimas necesaria para degradar la lactosa (inductor) presente en el medio y si dicha bacteria
es cultivada en agar nutritivo no deberá sintetizar las enzimas necesaria para degradar la
lactosa (inductor) ya que no está presente en el medio; este es un mecanismo de regulación
genética codificado en secuencias específicas en el ADN llamadas operones por el que las
bacterias ahorran energía.
II. OBJETIVO
● Demuestra la inducción enzimática del operón Lac en diferentes medios de cultivo.
III. MATERIALES
❖ Agar MacConkey en placas de Petri.
❖ Agar nutritivo con indicador Rojo Neutro.
❖ Agar nutritivo.
❖ Cultivos de Escherichia coli en caldo nutritivo.
❖ Cultivos de Salmonella sp. en caldo nutritivo.
❖ Mechero de alcohol, gradillas, ansas.
❖ Estufa graduada a 37°C.
IV. PROCEDIMIENTO
1. Sembrar E. coli y Salmonella sp. en Agar MacConkey, Agar nutritivo con Rojo Neutro y
en Agar Nutritivo.
2. Incubar a 37°C por 18 a 24 horas.
3. Realizar la lectura e interpretar.
 V. RESULTADOS
Figura 1
Crecimiento de Salmonella Typhimurium en agar nutritivo

Se puede observar el crecimiento de Salmonella en agar nutritivo, este medio no posee el

inductor el cual sería la lactosa. Asimismo, la bacteria tampoco posee el operón lactosa, por
lo cual no se puede llevar a cabo una degradación de este carbohidrato.

Figura 2
Crecimiento de E. coli en agar nutritivo

Se observa el crecimiento de E. coli en agar nutritivo, esta bacteria si presenta el operón

lactosa, pero a pesar de ello no se podrá realizar la degradación de la lactosa debido a que
esta no se encuentra presente en el medio y no se podrá llevar a cabo la inducción enzimática
del operón.
Figura 3
Crecimiento de E. coli y Salmonella sp en Agar MacConkey

Se observa el crecimiento de E. coli y salmonella en agar MacConkey, E. coli si presenta el

operón lactosa mientras que Salmonella no lo presenta, en el medio se encuentra presente el
inductor(lactosa) por lo cual E. coli degradará la lactosa debido a que si se podrá llevar a cabo
la inducción enzimática del operón, por el contrario Salmonella no podrá degradar la lactosa,
esto se evidenciará en la coloración del medio, ya que para E.coli el medio vira hacia color
grosella debido a un descenso del pH por la producción de compuestos ácidos, mientras que
para Salmonella ocurrirá una decoloración del medio ocasionada por un aumento del pH.

VI. CONCLUSIONES
● Se demostró la inducción enzimática del operón Lac de en los medios de cultivo:
Agar nutritivo y Agar McConkey
VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

Gil, M. (2019). Agar MacConkey: fundamento, preparación y usos. Lifeder.

https://www.lifeder.com/agar-macconkey/#:~:text=El%20agar%20MacConkey%20es

%20un,lo%20hace%20un%20medio%20diferencial.

Gil, M. (2019). Agar nutritivo: fundamento, preparación y usos. Lifeder.

https://www.lifeder.com/agar-nutriente/

Pérez, M. (2016). Modelización de la regulación génica en procariotas: El Operón Lactosa

[presentación en diapositivas].

https://www.cs.us.es/~marper/docencia/SACBS-2016/temas/SACBS-operon-2016-20

17-trans.pdf

El Operón Lac. Khan Academy.

https://es.khanacademy.org/science/ap-biology/gene-expression-and-regulation/regula

tion-of-gene-expression-and-cell-specialization/a/the-lac-operon
VIII. ANEXOS
CUESTIONARIO
1. Explique el crecimiento de E. coli y Salmonella sp en Agar MacConkey, Agar
nutritivo con Rojo Neutro y en Agar Nutritivo.
- En Agar MacConkey

E. coli presenta operón lactosa, y el medio presenta en sus componentes a la lactosa por lo
que E. coli va a proceder a degradar la lactosa realizando la inducción enzimática del operón,
virando el medio a un color grosella por el descenso de pH y esto se puede ver por la
presencia del indicador Rojo neutro.

Salmonella sp. no presenta el operón lactosa, por lo que Salmonella no podrá degradar la
lactosa, y se apreciará en que no vira la coloración del medio, por lo que se producirá una
decoloración del medio por el aumento de pH y eso gracias al indicador Rojo Neutro siendo
el agar el agente solidificante.

- En Agar Nutritivo:

E. coli en agar nutritivo, a pesar que el medio no presenta lactosa y no se podrá realizar la
degradación de la lactosa y no se podrá llevar a cabo la inducción enzimática del operón. Este
medio tiene peptonas presentes en la fórmula y proporciona nitrógeno, vitaminas, minerales y
aminoácidos esenciales aportando carbono y energía para el crecimiento de la bacteria.

Salmonella al no tener el operón lactosa no tiene problema para crecer en agar nutritivo, y el
nitrógeno, vitaminas, minerales y aminoácidos esenciales aportan carbono y energía para el
crecimiento de la bacteria.

2. Interprete la inducción y la no inducción del operón Lac en los medios de cultivo

correspondientes.
- Inducción del operón Lac en agar MacConkey:
Este medio de cultivo contiene lactosa. El operón Lac es inducido debido a la alolactosa, y
ésta a su vez modifica a la proteína represora, permitiendo la unión de la ARN polimerasa al
promotor e iniciando la transcripción de los genes, que al expresarse, formarán las proteínas
capaces de degradar la lactosa en el medio.
- No inducción del operón Lac en agar nutritivo:
Este medio no posee lactosa en su composición. Al no haber inductor del operón Lac, la
proteína represora se mantiene unida a la región promotora e impide la transcripción de los
genes, que al expresarse, forma las proteínas capaces de degradar lactosa. Esto es necesario
para que la bacteria ahorre energía.
Cabe destacar que si un medio presenta glucosa y lactosa a la vez, la bacteria preferirá
utilizar la glucosa como fuente de energía.