Universidad Nacional Autónoma de Honduras en el Valle de Sula

Departamento de Química Industrial

Integrantes: Dulce María Fajardo.

Número de Cuenta: 20172000407.

Nombre Instructor(a): Omar Mejía.

# Practica: Extracción de ADN.

Sección y Día de Laboratorio: viernes 14:00.

Fecha: domingo 25 de julio, 2021

Elementos del Reporte Valor Puntaje

Objetivos
Procedimiento Experimental
Análisis de Resultados
Gráficos/Cálculos
Conclusiones
Nota
Objetivos

General
Realizar la técnica de extracción de ADN en una muestra de fresas.

Específicos
Preparar solución lisis de agua, sal y jabón líquido para el rompimiento de la pared celular.
Resumen

En la práctica anterior, se realizó la técnica de extracción de ADN en una muestra de

fresas, esta consistió en introducir una cantidad de fresas en una bolsa plástica y se
procedió a macerarlas hasta que quedaran totalmente maceradas.

Seguidamente, en un vaso de vidrio se preparó la solución lisis, la cual se preparó a base

agua, jabón líquido y sal. Luego, esta solución se vertió dentro de la bolsa con las fresas
maceradas y se mezcló totalmente. Se vertió en un vaso de vidrio mediante un colador
para poder separar la pulpa de la solución y para finalizar, se agregó alcohol etílico al
vaso con la solución. Cuando se agregó alcohol a la solución, se procedió a observar la
separación y se observaron los cambios en la solución.
Procedimiento experimental

1. Se introdujeron las fresas en la bolsa plástica.

2. Se procedió a macerar las fresas.

3. Se agregó agua hasta la mitad en un vaso de vidrio, a este se le agregó dos cucharadas de,
media cucharada de sal y se mezcló.
4. Se agregó la solución lisis a la bolsa con las fresas maceradas y se mezcló.
5. Con ayuda de un colador, se agregó esta solución a un vaso de vidrio.

6. Se agregó alcohol etílico 70% al vaso con la mezcla, hasta una cantidad considerable
7. Se observó los resultados.
Resultados: Se observó la formación de precipitado que hacía que la solución se viera
como un color degradado, ya que se concentró en la parte superior de la solución, este
precipitado se definió como el ADN contenido en la muestra.
 Análisis de Resultados

La extracción de ADN de una muestra celular se basa en el hecho de que los iones salinos
son atraídos hacia las cargas negativas del ADN. Permitiendo su disolución y posterior
extracción de la célula. Esta técnica requiere una serie de etapas, primero es necesario
romper la pared celular y la membrana plasmática para poder acceder al núcleo de la
célula. Por lo que debe romperse también la membrana nuclear para dejar libre el ADN.

El primer paso en la purificación del DNA consiste en homogeneizar las células de los
cuales se extrae el ADN. Se empezó por realizar una solución de lisis (agua,sal y
jabón/detergente) que se vertió sobre la muestras de fresas maceradas(las cuales se
colaron ),la cual rompió las células mediante un detergente, la solución con detergente y
sal fue capaz de romper la pared celular y la membrana plasmática, junto con la nuclear,
por lo que este se encargó también de romper la membrana nuclear y llegar al núcleo
donde se encontraba el material genético o ADN y liberarlo.

Para poder realizar la extracción, se necesitó alcohol etílico al 70%, el alcohol se utilizó
para precipitar el ADN, pues como éste es soluble en agua, cuando se encuentra en alcohol
se desenrolla y precipita en la interfase entre el alcohol y el agua. El alcohol también sirve
para proteger el ADN de enzimas que puedan degradarlo, por lo que se necesita que sea
precipitado.

Existen también, otros factores que afectan el rendimiento, calidad y pureza del ADN,
los cuales se pueden mencionar como:
 Cantidad de material de partida o Cantidad de tejido.
 Condiciones en las que se encuentra el material de inicio (fresco, congelado,
fijado)
 Contaminantes e interferentes en el material biológico.

Es importante recalcar, que para la extracción de ADN es indispensable provocar una lisis
celular, ya que es la que se encarga de inactivar las nucleasas celulares y separar los ácidos
nucleicos de los restos de células. El procedimiento de lisis idóneo suele consistir en un
equilibrio de técnicas y ha de ser suficientemente fuerte para romper el material inicial
complejo (un tejido, por ejemplo), pero suficientemente suave para preservar el ácido
nucleico.
 Conclusiones

 En conclusión, se especificó que, para lograr una óptima extracción de ADN, se

requiere una serie de etapas, como ser, que es necesario romper la pared celular y
la membrana plasmática para poder acceder al núcleo de la célula. Por lo que debe
romperse también la membrana nuclear para dejar libre el ADN.

 Se determinó que la solución lisis la solución con detergente y sal fue capaz de
romper la pared celular y la membrana plasmática, junto con la nuclear, por lo que
este se encargó también de romper la membrana nuclear y llegar al núcleo donde
se encontraba el material genético o ADN y liberarlo.

 Se concluyó que el alcohol al 70% se utilizó para precipitar el ADN, pues como
éste es soluble en agua, cuando se encuentra en alcohol se desenrolla y precipita
en la interfase entre el alcohol y el agua, este también sirve para proteger el ADN
de enzimas que puedan degradarlo, por lo que se necesita que sea precipitado.

 Se analizó que el procedimiento de lisis idóneo suele consistir en un equilibrio de

técnicas y ha de ser suficientemente fuerte para romper el material inicial
complejo (un tejido, por ejemplo), pero suficientemente suave para preservar el
ácido nucleico.