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Entonces, para poder entender este esencial proceso biológico, primero debemos saber a qué fuerzas
mecánicas se encuentra sujeto el ADN y cómo hace para lidiar con ellos.
El material genético debe ser capaz de portar gran cantidad de información necesaria para todas
las actividades de los seres vivos. Según el modelo de Watson y Crick, los nucleótidos situados en
cualquiera de las cadenas de la doble hélice podían acoplarse en cualquier orden o secuencia.
Dado que una molécula de DNA puede tener miles de nucleótidos de largo, es posible obtener una
gran variedad de secuencias de bases diferentes. La variedad es uno de los requisitos primarios
del material genético.
4.3.¿Cuáles son los pasos por medio de los cuales Griffith demostró la
existencia del factor transformador?
Griffith estaba interesado en descubrir si las inyecciones de neumococos virulentos muertos por
calor, que no causaban la enfermedad, podrían utilizarse para inmunizar contra la neumonía.
Inoculó ratones, simultáneamente, con bacterias virulentas muertas por calor y bacterias no
virulentas vivas; cada una de ellas por separado era inofensiva pero, al inocularlas juntas, todos los
ratones murieron. Cuando Griffith efectuó las autopsias, encontró que los cuerpos tenían gran
cantidad de bacterias encapsuladas vivas y, por lo tanto, virulentas (véase la fig. 14-2 del libro).
"Algo" se había transferido de las bacterias muertas a las vivas que las dotaba de la capacidad
para formar cápsulas de polisacáridos y causar neumonía. Este "algo" fue aislado; luego se
encontró que era DNA.
La replicación del DNA en los organismos eucarióticos es similar que en los procariotas, con la
diferencia de que cada cromosoma eucariótico tiene muchos orígenes de replicación.
Los eucariotas tienen mucho más DNA que los procariotas. La cantidad de DNA es constante en
las células de una especie dada, pero no se correlaciona con el tamaño, complejidad o posición en
la escala evolutiva del organismo. Las células eucarióticas parecen tener una gran cantidad de
DNA "sin sentido".
Cuestionario:
10. En la burbuja de replicación diagramada, marque los extremos 5' y 3' de cada cadena de
nucleótidos e identifique la cadena adelantada y la cadena rezagada. Describa qué ocurrirá
luego.
11. Distinga entre los siguientes términos: mRNA/tRNA/rRNA; código/codón/anticodón;
transcripción/traducción; sitio P/sitio A; iniciación/elongación/terminación.
12. Una persona heterocigótica para el alelo de anemia falciforme fabrica las moléculas de la
variante de hemoglobina pero no sufre de anemia. ¿En qué aspecto esta situación se
relaciona con las definiciones de "dominante" y "recesivo" dadas en el capítulo 12?
13. Defina el "dogma central" y describa su importancia en la teoría de la evolución.
14. La mayoría del DNA bacteriano codifica para mRNA. Pero el análisis del contenido de RNA
de una célula muestra que, típicamente, el rRNA constituye aproximadamente el 80% del
RNA celular y que el tRNA constituye la mayor parte del resto. Sólo aproximadamente el
2% es normalmente mRNA. ¿Cómo explica estos hallazgos? ¿Qué explicación funcional
podría darles?
15. Aun antes de que se descifrara el código genético, se creía que éste era degenerado.
Explique por qué.
16. La transcripción y la traducción en los procariotas son procesos "ligados" pero, como
veremos en el capítulo 17, esto no ocurre en los eucariotas. Sobre la base de su
conocimiento de la estructura celular, proponga una explicación probable.
17. En un segmento hipotético de una cadena de DNA, la secuencia de bases es (3')-
AAGTTTGGTTACTTG-(5'). ¿Cuál sería la secuencia de bases en una cadena de mRNA
transcripta a partir de este segmento de DNA? ¿Cuál sería la secuencia de aminoácidos
codificada por el mRNA? ¿Es importante en qué punto de la cadena molde comienza la
transcripción de DNA a mRNA? Explique su respuesta.
18. Suponga que usted tiene un péptido arg-lys-pro--met y usted sabe que las moléculas de
tRNA usadas en su síntesis tienen los siguientes anticodones: (3')-GGU-(5') (3')-GCU-(5')
(3')-UUU-(5') (3')-UAC-(5') Determine la secuencia de nucleótidos de DNA para la cadena
molde del gen que codifica para este péptido.
¿De qué manera se altera la secuencia de aminoácidos resultante? ¿De qué manera la
adición de un par C-G a la molécula original afecta la secuencia de aminoácidos?
Respuestas:
Hay cinco bases nitrogenadas diferentes en los nucleótidos, que son los sillares de construcción de
los ácidos nucleicos. Dos de ellas, la adenina y la guanina, tienen una estructura de dos anillos y
se conocen como purinas. Las otras tres, citosina, timina y uracilo, tienen una estructura de anillo
único y se conocen como pirimidinas. La adenina, la guanina y la citosina se encuentran tanto en el
DNA como en el RNA, mientras que la timina se encuentra sólo en el DNA y el uracilo sólo en el
RNA.
Para que ocurra la síntesis de una nueva cadena complementaria de DNA es necesaria la
presencia de la cadena vieja que sirve de molde pero, además debe estar presente una secuencia
de inicio para la nueva cadena. Esta secuencia de inicio es provista por un cebador o primer,
formado por nucleótidos de ácido ribonucleico (RNA). En la cadena simple abierta de DNA, la
síntesis del cebador de RNA es catalizada por una enzima conocida como RNA primasa. Con los
cebadores de RNA colocados en el lugar correcto y apareados a la cadena complementaria, las
DNA polimerasas comienzan a sintetizar nuevas cadenas complementarias de DNA a lo largo de
las cadenas molde, añadiendo nucleótidos, uno por uno, a las cadenas en crecimiento.
Aunque la cadena 5' a 3' se sintetiza continuamente como una sola unidad, la cadena 3' a 5' se
sintetiza de manera discontinua, como una serie de fragmentos, cada uno de los cuales es
sintetizado en la dirección 5' a 3'. La cadena que se sintetiza de manera continua se conoce como
cadena adelantada, y la cadena que se sintetiza como una serie de fragmentos se conoce como
cadena rezagada.
2.¿Cuáles son los pasos por medio de los cuales Griffith demostró la
existencia del factor transformador?
Griffith estaba interesado en descubrir si las inyecciones de neumococos virulentos muertos por
calor, que no causaban la enfermedad, podrían utilizarse para inmunizar contra la neumonía.
Inoculó ratones, simultáneamente, con bacterias virulentas muertas por calor y bacterias no
virulentas vivas; cada una de ellas por separado era inofensiva pero, al inocularlas juntas, todos los
ratones murieron. Cuando Griffith efectuó las autopsias, encontró que los cuerpos tenían gran
cantidad de bacterias encapsuladas vivas y, por lo tanto, virulentas (véase la fig. 14-2 del libro).
"Algo" se había transferido de las bacterias muertas a las vivas que las dotaba de la capacidad
para formar cápsulas de polisacáridos y causar neumonía. Este "algo" fue aislado; luego se
encontró que era DNA.
Las características que hacen que los bacteriófagos sean herramientas experimentales útiles son:
son virus poco exigentes y fáciles de mantener en el laboratorio ya que no necesitaban mucho
espacio ni instrumental complejo; producen una gran cantidad de progenie en poco tiempo; tienen
una forma altamente distintiva que permite identificarlos fácilmente con el microscopio electrónico.
El material genético debe ser capaz de portar gran cantidad de información necesaria para todas
las actividades de los seres vivos. Según el modelo de Watson y Crick, los nucleótidos situados en
cualquiera de las cadenas de la doble hélice podían acoplarse en cualquier orden o secuencia.
Dado que una molécula de DNA puede tener miles de nucleótidos de largo, es posible obtener una
gran variedad de secuencias de bases diferentes. La variedad es uno de los requisitos primarios
del material genético.
Uno de los datos proviene de los experimentos de Erwin Chargaff quien rompió moléculas de
ácidos nucleicos en sus bases constitutivas y las separó mediante cromatografía en papel. De esta
manera pudo analizar el contenido de purinas y pirimidinas del DNA de muchos tipos diferentes de
seres vivos y encontró que las bases nitrogenadas no siempre aparecían en proporciones iguales.
Las proporciones de las cuatro bases nitrogenadas son iguales en todas las células de todos los
individuos de una especie dada, pero varían de una especie a otra. Por lo tanto, las variaciones en
la composición de bases bien podrían proporcionar un "lenguaje" en el cual estarían escritas las
instrucciones que controlan la actividad celular. Dentro del error experimental, la cantidad de
adenina (A) es igual que la de timina (T) y la de guanina (G) es igual que la de citosina (C): A=T y
G=C.
El otro dato provino de los físicos Maurice Wilkins y Rosalind Franklin que aplicaron la técnica de
difracción de rayos X al estudio del DNA. Las fotografías obtenidas mostraban patrones que casi
con certeza reflejaban los giros de una hélice gigante. De acuerdo con las mediciones efectuadas
mediante rayos X, la distancia entre los dos lados o parantes de la hélice es de 2 nanómetros. Dos
purinas combinadas tendrían más de 2 nanómetros y dos pirimidinas no alcanzarían para cubrir
esta distancia. Pero si una purina se apareara en cada peldaño con una pirimidina, habría un ajuste
perfecto y la molécula tendría el mismo ancho en toda su longitud. Por consiguiente, las bases
apareadas deben ser siempre combinaciones de una purina con una pirimidina.
7.Suponga que se está hablando con alguien que nunca ha escuchado acerca
del DNA. ¿Cómo respaldaría el argumento de que el DNA es el material
genético? Haga una lista de por lo menos menos cinco puntos fuertes de su
argumentación.
a. El experimento de Griffith y los posteriores experimentos de Avery mostraron que el DNA era
"algo" que era transferido de las bacterias virulentas muertas a las no virulentas vivas produciendo
bacterias virulentas vivas.
b. Los bacteriófagos están compuestos de DNA y tienen una cubierta proteica. Los estudios
realizados mostraron que cuando el bacteriófago ataca a la célula, el DNA entra a la célula y la
cubierta proteica es dejada afuera. La progenie del bacteriófago, formada dentro de la célula
hospedadora, consiste en nuevo DNA viral en una nueva cápside proteica.
c. Casi todas las células somáticas de cualquier especie dada contienen cantidades iguales de
DNA y los gametos de esa especie contiene la mitad de DNA de las células somáticas.
d. La molécula de DNA tiene el tamaño y la complejidad necesarios para contener una gran
cantidad de información.
e. Contener información para producir una copia de sí mismo, dado que se copia en cada división
celular y con gran precisión.
Esto confirma el experimento de Meselson-Stahl que fue realizado para determinar que la
replicación es semiconservativa. Esto se evidencia en la microfotografía b) en la que se conserva
una cadena original y una nueva más clara.
Las moléculas de mRNA son largas copias (o transcriptos) de secuencias de DNA -de 500 a
10.000 nucleótidos- y de cadena simple pero, a diferencia de las moléculas de DNA, las de RNA se
encuentran en su mayoría como moléculas de cadena única. El rRNA junto con un grupo de
proteínas asociadas forma los ribosomas. Cada ribosoma es una gran maquinaria de síntesis de
proteínas. Los ribosomas consisten en dos subunidades. En los ribosomas de E. coli, la subunidad
más pequeña (30S) tiene un tipo de rRNA, conocido comúnmente como rRNA 16S, y una sola
molécula de cada una de 21 proteínas diferentes. La subunidad de mayor tamaño (50S) tiene dos
tipos de rRNA, uno conocido como rRNA 5S y el otro como rRNA 23S, además de 34 proteínas
diferentes. Las moléculas de tRNA presentan una estructura tridimensional (estructura secundaria)
similar a una hoja de trébol con regiones de la molécula formando doble cadena. De este
plegamiento depende su función. Estas moléculas pequeñas pueden llevar un aminoácido en un
extremo y tienen un triplete de bases, el anticodón, en un asa central, en el extremo opuesto de la
molécula. La molécula de tRNA es el adaptador que aparea el aminoácido correcto con cada codón
de mRNA durante la síntesis de proteínas. Hay al menos un tipo de molécula de tRNA para cada
tipo de aminoácido presente en las células.
Código se refiere al código genético que establece la forma en que las 4 bases nitrogenadas de la
molecula de DNA dictan la secuencia de los 20 aminoácidos que forman las proteínas. La unidad
del código genético son tres nucleótides o tripletes, el codón de la molécula de RNA
complementaria a la cadena de DNA. De las 64 combinaciones posibles de tripletes del código de
nucleótidos de cuatro letras, se han identificado 61 combinaciones correspondientes a los 20
aminoácidos que constituyen las moléculas de proteínas. Cada molécula de tRNA tiene dos sitios
de unión importantes. Uno de ellos, conocido como el anticodón, es el que se acopla con el codón
de la molécula de mRNA.
Las moléculas de mRNA son largas copias (o transcriptos) de secuencias de DNA. El proceso de
síntesis de RNA se conoce como tra-nscripción. La síntesis de proteínas se conoce también como
traducción, dado que es la transferencia de información del lenguaje de los nucleótidos al de los
aminoácidos.
El sitio P (peptídico) y el sitio A (aminoacil) son dos sitios de la subunidad más grande de los
ribosomas a los que se unen las moléculas de tRNA. En primer lugar, el complejo tRNA-fMet ocupa
el sitio P. El sitio A (aminoacil) está vacante. Luego, un segundo tRNA, con su aminoácido unido,
se coloca en el sitio A y su anticodón se acopla con el mRNA. Se forma un enlace peptídico entre
los dos aminoácidos reunidos en el ribosoma. Al mismo tiempo, se rompe el enlace entre el primer
aminoácido y su tRNA. El ribosoma se mueve a lo largo de la cadena de mRNA en una dirección 5'
a 3', y el segundo tRNA, con el dipéptido unido, se mueve desde el sitio A al sitio P, a medida que
el primer tRNA se desprende del ribosoma. Un tercer aminoacil-tRNA se coloca en el sitio A y se
forma otro enlace peptídico.
En el capítulo 12 del libro, una característica dominante fue definida como una característica que
aparece en la generación F1 y una característica recesiva como una característica que no aparece
en la F1. En una persona heterocigota para el alelo de la anemia falciforme, ambos alelos, el
normal y el de anemia falciforme, se expresan, es decir, ambos alelos dirigen la síntesis de
hemoglobina. Por lo tanto, se sintetiza suficiente hemoglobina normal por el alelo normal y los
síntomas de la anemia falciforme no aparecen. A nivel macroscópico, se aplica la definición de
dominante y recesivo: la característica recesiva no aparece en el fenotipo. A nivel molecular, sin
embargo, como evidencia la electroforesis, la definición no se aplica; ambos, dominante y recesivo
se expresan en el fenotipo.
El "dogma central" establece que la información fluye del DNA al RNA y de éste a las proteínas en
una única dirección. Así, el genotipo (DNA) determina el fenotipo, dictando la composición de las
proteínas. Sin embargo, las proteínas no alteran el genotipo, es decir, las proteínas no envían
instrucciones de regreso al DNA.
14.La mayoría del DNA bacteriano codifica para mRNA. Pero el análisis del
contenido de RNA de una célula muestra que, típicamente, el rRNA constituye
aproximadamente el 80% del RNA celular y que el tRNA constituye la mayor
parte del resto. Sólo aproximadamente el 2% es normalmente mRNA. ¿Cómo
explica estos hallazgos? ¿Qué explicación funcional podría darles?
En procariotas, el DNA, aunque está localizado en una región de la célula, no está físicamente
separado de los otros contenidos celulares por una membrana. Por lo tanto, a medida que se
transcribe el mRNA a partir del molde de DNA, la traducción comienza casi inmediatamente y los
dos procesos están relacionados en el espacio y el tiempo. En los eucariotas, en cambio, el DNA
está físicamente separado del citoplasma por la envoltura nuclear. La transcripción del mRNA
ocurre en el núcleo, pero la traducción tiene lugar en el citoplasma.
5'- UUCAAACCAAUGAAC-3'
18.Suponga que usted tiene un péptido arg-lys-pro--met y usted sabe que las
moléculas de tRNA usadas en su síntesis tienen los siguientes anticodones:
(3')-GGU-(5') (3')-GCU-(5') (3')-UUU-(5') (3')-UAC-(5') Determine la
secuencia de nucleótidos de DNA para la cadena molde del gen que codifica
para este péptido.
5'-CCA-3'
5'-CGA-3'
5'-AAA-3'
5'-AUG-3'
5'CGAAAACCAAUG-3'
3'GCTTTTGGTTAC-5'