Tarea qPCR – RTqPCR

Integrantes del grupo:

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En grupos de trabajo, respondan:

En el laboratorio de Biología Molecular de la Universidad de los Andes se evaluó mediante la

técnica de q-PCR la expresión del gen PARD3B en diferentes tejidos humanos. La expresión de
este gen se ha relacionado con la aparición de diferentes tipos de cáncer. En este ensayo se
utilizó como calibrador el tejido de riñón y la expresión del gen se normalizó utilizando el gen
GAPDH como Housekeeping.

 A partir de la siguiente tabla:

Target: PARD3B Housekeeping: GAPDH    

  Replic Replic Replic Promedi Replic Replic Replic Promedi ΔC ΔΔC 2-
ΔΔCt
a1 a2 a3 o a1 a2 a3 o t t
Calibrado
Riñón 34,8 38,3 35,9   22,6 23,4 21,8        
r
Test Hígado 23,4 28,5 26,8   23 22,3 25,7        
Páncrea
Test 24,01 27,5 25,04   22,3 20,9 23,4        
s
Test Útero 30,5 35,2 33,8   23,7 21,8 24,5        
Test Médula 27,2 29,9 28,5   21,8 19,9 23,8        
Corazó
Test 24,5 31,7 27,7   25,3 24,7 26,6        
n

a) Busque la función tanto del gen PARD3B como la de GAPDH.

b) Complete los valores faltantes en la tabla y usando el método ΔΔCt, evalúe los niveles de
expresión de PARD3B en cada tejido con respecto al riñón. Tenga en cuenta las
siguientes fórmulas.

c) Realice un gráfico con los resultados obtenidos, graficando en el eje X el tejido y en el

eje Y la expresión relativa con respecto al riñón (2ΔΔCt)

d) De acuerdo con los resultados obtenidos, qué puede concluir sobre la expresión del gen
PARD3 en cada tejido.