COLECTA, EVALUCION SEMINAL Y CRIOPRESERVACION DE

SEMEN EQUINO EN EL MUNICIPIO DE GIRARDOTA, ANTIOQUIA

Manuela Correa Ríos & Sara Galvis Zorrilla

2019.

Politécnico Colombiano Jaime Isaza Cadavid

Antioquia.
Reproducción Animal
 COLECTA, EVALUCION SEMINAL Y
CRIOPRESERVACIÓN DE SEMEN EQUINO EN EL
MUNICIPIO DE GIRARDOTA, ANTIOQUIA
RESUMEN
La criopreservación de semen permite
promover la conservación y difusión del
material vegetal, disminuye costos en
cuanto a transporte y alimentación de los
toros. El objetivo principal de la práctica
fue realizar la colecta de semen en el
criadero la Montana en el municipio de
Girardota, para posteriormente realizar las
evaluaciones macroscópicas y
microscópicas, para su congelación en un
equino por medio de la técnica con vagina
artificial utilizando una yegua como
maniquí. Posterior a esto se realizó
evaluaciones de volumen, concentración,
movilidad, vitalidad, integridad de las
membranas plasmáticas, morfología
anormal para determinar la calidad del
eyaculado para su criopreservación.
Palabras claves: Criopreservacion,
conservación, vagina artificial, calidad
del eyaculado.
INTRODUCCIÓN
La crio preservación de semen es una
importante biotecnología reproductiva,
que busca promover la conservación del
germoplasma masculino por tiempo
indeterminado. Esta biotecnología,
cuando se asocia a la inseminación
artificial, representa un mecanismo
eficiente para la promoción y difusión de
material genético de excelente calidad. La
crio preservación de semen proporciona
una economía para el productor, al
reducir los costos de alimentación y
transporte de los reproductores, así
como los riesgos de transmisión de
ABSTRACT
Cryopreservation of semen allows to
promote the conservation and diffusion of
plant material, decreases costs in terms of
transport and feeding of bulls. The main
objective of the practice was to collect the
semen in the Montana farm in the
municipality of Girardota, to later
perform the macroscopic and microscopic
evaluations, for freezing in an equine by
means of the artificial vagina technique
using a mare as a mannequin. After this,
evaluations of volume, concentration,
mobility, vitality, integrity of the plasma
membranes, abnormal morphology were
performed to determine the quality of the
ejaculate for its cryopreservation.
Keywords: Cryopreservation,
preservation, artificial vagina, ejaculate
quality.
enfermedades sexualmente transmisibles
(Castelo et al 2008 citado en Ribeiro et al,
2014)
De esta forma la utilización de
espermatozoides congelados,
provenientes del eyaculado o del
epidídimo, es indispensable para un buen
programa de inseminación artificial, ya
que la manipulación de espermatozoides
frescos o congelados otorga una
viabilidad corta del material. El objetivo
de congelar células espermáticas es la
producción de un banco de estas, teniendo
a disposición un material sin plazo de
vencimiento, potencializando la eficiencia
de la reproducción animal (Amirat et al
2004 citado en Ribeiro et al, 2014). Sin
embargo, el proceso de crio preservación
resulta en la disminución de la fertilidad
cuando se compara con semen fresco
(González 2004 citado en Ribeiro et al,
2014).
Una de las cuestiones importantes
relacionadas con la eficiencia de las
técnicas de crio preservación es la
velocidad de reducción de la temperatura
durante el congelamiento. El tipo de
curva utilizada durante la congelación
tiene influencia directa en el grado de las
lesiones celulares, debido a procesos de
deshidratación y formación de cristales de
hielo intracelulares (Moore et al, 2006
citado en Ribeiro et al, 2014).
Además de prevenir el riesgo de
transmisión de enfermedades venéreas
(Loomis et al, 2008 citado en Castro et al,
2016), minimizando la posibilidad de
llegada de bacterias al útero
potencialmente presentes durante la
monta y causantes de endometritis, dado
que el diluyente contiene antibiótico
(Clement, 1993 citado en Castro et al,
2016).
Actualmente los diferentes estudios, se
enfocan en el perfeccionamiento en las
técnicas de biotecnología de la
reproducción como congelación de
semen, inseminación artificial y
transferencia de embriones. (Castro et al,
2016)
La crio preservación, conlleva a
alteraciones en la membrana plasmática
de los espermatozoides debido a cambios
en la temperatura o shock térmico,
deshidratación, toxicidad de las sales,
formación de hielo intracelular,
fluctuaciones del volumen celular o
alteraciones en el equilibrio metabólico
(Brinsko et al, 1992 citado en Wernli,
2010), es por esta razón que se debe
implementar el uso de herramientas
necesarias para evitar al máximo estos
procesos. Para esto es necesario, realizar
un manejo apropiado durante todo el
proceso para congelación de semen, como
el uso de diluyentes con componentes
efectivos que provean al espermatozoide
los suplementos necesarios para un
adecuado metabolismo espermático
(Wernli, 2010).
OBJETIVO ESPECIFICO
Esta práctica tuvo como objetivo
principal comprender y realizar la colecta
de semen en equinos para posterior a esto
realizar el proceso de congelación.
OBJETIVOS GENERALES
Observar y detallar las características
tanto microscópicas como macroscópicas
del eyaculado obtenido, determinar la
capacidad reproductiva del macho y
finalmente realizar el proceso de crio
preservación seminal para evaluar las
características de este después de ser
descongelado.
MATERIALES Y METODOS
Recolección de semen
Esta práctica se realizó en el municipio de
Girardota, Antioquia con un macho
reproductor llamado Escape. Se inicio
con el reconocimiento de la condición
corporal de la yegua la cual fue utilizada
para la monta del macho y su
estimulación, se prosiguió a sujetar la
yegua de forma correcta para evitar
contratiempos en el momento de la
monta, posterior a esto se preparó la
vagina artificial, se puso a calentar el
agua, se colocó el condón o la funda
plástica dentro de la vagina, se ubicó al
final de esta la bolsa de colecta del
eyaculado con un filtro que separa las
partes seminales, en el momento en el que
estuvo lista la temperatura del agua se
añadió a la vagina, y finalmente se le
aplico lubricante.
Figura I: Amarre de extremidades
anteriores y posteriores de la yegua
Después de realizado este proceso se
continuo con la limpieza de la zona
prepucial y ventral del macho, con ayuda
de agua tibia y papel, se llevó el macho
hacia la yegua para que realizara la monta
y finalmente se procedió desviar el pene
para llevar a cabo la colecta. Este
procedimiento se realizó con dos machos
debido a que la evaluación de movilidad
del eyaculado de la primera colecta tuvo
bajo porcentaje lo cual no iba a soportar
el proceso de crio preservación.
Figura II: Monta de equino
Evaluación de la calidad seminal
Se efectuaron las evaluaciones tanto
macroscópicas como microscópicas del
eyaculado obtenido, las cuales fueron,
volumen, concentración, movilidad,
progresividad, vitalidad, morfología
anormal, integridad de la membrana
plasmática del semen en fresco y algunas
de estas postdescongelado.
Criopreservación de semen
El semen se centrifugo por 12 minutos
para la formación del pellet con los
espermatozoides, en el caso de la
preparación del diluyente se utilizó 5% de
yema de huevo, 5% de dimetrilformamida
y 90% de diluyente base, se refrigero y se
empacaron las pajillas, se colocaron en
una nevera de icopor con vapores de
nitrógeno, continuo a colocar las pajillas
en un termo de nitrógeno y se
descongelaron para realizar las pruebas.
Figura III: Nevera de icopor con
vapores de nitrógeno
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Equino: Escape
Volumen: 22ml
Concentración inicial: 340x106 ml
 SEMEN EN FRESCO cual fue 38,4%, igualmente el porcentaje
Movilidad 78,56% de movilidad progresiva en la practica fue
Progresividad 22,14% de 7,24% diferente al obtenido por
No progresivos 56,42% (Restrepo et al, 2013) que fue de 25,5%.
Inmóviles 21,44%
Morfología anormal 20% En las variables evaluadas anteriormente
Integridad de 40% se puede determinar que el semen en
membranas fresco obtenido en la practica tuvo
Vitalidad 38% porcentajes muy bajos en cuanto a
Tabla I: Evaluaciones microscópicas en movilidad progresiva, lo que influyo que
semen fresco en el momento de hacer la
descongelación se redujeran
SEMEN POSTDESCONGELADO considerablemente los porcentajes, en
Movilidad 33,51% comparación con otros estudios
realizados. Lo que hace inviable el semen
Progresividad 7,24%
para hacer el proceso de criopreservación,
No progresivos 26,27%
ya que los valores obtenidos hacen que
Inmóviles 66,49%
las prácticas de inseminación artificial no
Morfología anormal 21%
sean efectivas.
Integridad de 17%
membranas Las comparaciones de las tablas
Vitalidad 32% presentadas anteriormente nos muestran
Tabla II: Evaluaciones microscópicas que hubo diferencias significativas para la
en semen postdescongelado mayoría de las variables evaluadas, el
porcentaje de movilidad en fresco fue de
¿ Pajillas=¿ 340x106 ml x 22ml = 75 78,56% y en postdescongelado fue de
pajillas 33,51% teniendo una diferencia de
100x106 45,05%, para la movilidad progresiva en
fresco el valor adquirido fue de 22,14% y
Semen/ pajilla=¿22/75 = 0,29 en postdescongelado fue de 7,24 con una
Diluyente=¿ 0,5- 0,29= 0,21 diferencia entres estos dos porcentajes de
14,9%.
En las tablas I y II se pueden observar las
evaluaciones microscópicas realizadas en En el porcentaje de espermatozoides no
el semen fresco y criopreservado en el móviles hubo diferencias significativas
equino Escape, tuvo una movilidad en entre los dos valores obtenidos, se puede
fresco de 78,56% resultado que es inferior determinar que en la evaluación
al obtenido por (Restrepo et al, 2013) el postdescongelado se obtuvo un porcentaje
cual fue de 83,3%, en el caso de la mayor (66,49%) al de la evaluación de
movilidad postdescongelación obtenida semen en fresco (21,44%). En la
fue de 33,51% el cual fue superado por el integridad de la membrana plasmática el
obtenido por (Restrepo et al, 2013) el cual valor obtenido en fresco fue de 40% y en
fue de 59,8%, en la práctica realizada en el momento de ser descongelado el
Girardota en semen congelado se adquirió porcentaje bajo a 17%, este último valor
un porcentaje de espermatozoides fue superado por los obtenidos por
inmóviles de 21,44% el cual fue diferente (Cabrera et al, 2014) los cuales fueron
al adquirido por (Restrepo et al, 2013) el 54,3%, 36,1% y 34,4%.

En las variables de vitalidad y morfología
anormal no se presentaron diferencias
significativas en fresco y
postdescongelado, para la primera
variable en fresco el porcentaje fue de
38% y postdescongelado fue de 32% y
para la segunda variable en fresco fue de
20% y en postdescongelado fue de 21%.
CONCLUSIONES
Se colecto un animal en el municipio de
Girardota, se realizaron las evaluaciones
seminales respectivas, los resultados
obtenidos en la mayoría de las variables
fueron bajos tanto en fresco como en post
descongelado, se observaron diferencias
significativas en la gran parte de estas
variables antes y después de ser
congelado el semen, lo que nos indica que
el semen nos es viable para la realización
del proceso de criopreservación.
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