Practica NO.

VII
Toma de muestra
Definición de toma de muestra
La toma de muestra es el conjunto de procedimientos destinados a obtener una parterepresentativa
cuantitativamente a partir de un todo, en nuestro caso, el paciente, elmedio ambiente, etc

Paso a considerar en la toma de muestra y defínalo.

La Comunicacion entre el medico y el Iaboratorio y Ia Rotulacion del Paciente.
COMUNICACION ENTRE El MEDICO Y El LABORATORIO: El medico debe Al solicitar las pruebas
informar al personal del Iaboratorio acerca de Ia condicinn clinica y del diagnostic° tentativo (tipo de
infeccion o agente patologico del que se sospecha). La rotulaciOn apropiada de los especimenes
incluye estos datos clinicos, asi como el nombre el nombre del medico solicitante, su direccion y su
telefono.
- LOS DATOS COMPLETOS DEL PACIENTE: lncluyen nombre y apellidos del paciente, sala,
expediente, edad, direccion, fecha procedencia o lugar anatornico de donde se toma () la muestra.
Hora de Ia toma de muestra, sexo. Explicar si use recientemente antibioticos.

¿Cuáles serían las instrucciones generales para toma de muestra de cultivo

microbiológicos?
Antes de proceder a tomar cualquier tipo de muestra debe preguntarsele al paciente si ha tornado
algun tipo de antibiotico, si la respuesta es afirmativa no debe de tomarse Ia muestra, pues, los
resultados serail negativos. El paciente debe de permanecer par los menos 5 digs sin tomar ningun
tipo de antibiotic° antes de tomarsele Ia muestra. Para pacientes internos, se debera considerar un
period° minima de 48 horas sin administrarsele antibioticos antes de proceder a Ia toma de Ia muestra
del cultivo.

Enumere las reglas generales que se aplican a todas las muestras.

 La cantidad de material debe ser adecuada, es decir, debe tenerse una cantidad suficiente
del espécimen para permitir un estudio completo.

 La muestra debe ser representativa del proceso infeccioso (ejj.: esputo, no saliva; pus de la
lesión subyacente no de su trayecto fistuloso; un raspado de la profundidad de la herida, no de la
superficie).

 Hay que evitar que se contamine la muestra utilizando solo equipo estéril y precauciones
de asepsia.
 Debe enviarse el espécimen al laboratorio y examinarse con prontitud. Puede ser útilun
medio especial adecuado de transporte, así se conservan sin deterioro de los microorganismos.
Algunas muestras pueden mantenerse en la nevera dependiendo del tipo de muestra. Las
muestras para buscar virus, Rickettsias o clamidias se enviarán en hielo seco.

 Las muestras deben obtenerse antes de administrar drogas al organismo. Es decir, es

necesario asegurar la adecuada obtención de especímenes para diagnosticar infecciones
bacterianas y fúngicas. han estado dando antimicrobiano antes de obtener la muestra para el
estudio microbiológico, es posible que se requiera suspender el uso de aquellos y repetir la toma
de especímenes varios días después.

 El tipo de espécimen que se vaya a examinar se determina por el cuadro clínico. En

ausencia de signos y síntomas localizados, primero se toman muestras repetidas de sangre para
cultivo y entonces se consideran en consecuencia otros sitios.

 Tomada la muestra debe ser rotulada adecuadamente Con las instrucciones bien clara.

¿Cuáles son los requisitos para rechazar una muestra?

 Aspecto dudoso de la muestra

 Cuando el frasco tiene un dato que difiere del formulario que lo acompaña

 Cuando no tiene ningún datoen cuanto a espécimen y no especifica que hacerle

 Laboratorio de Microbiología Medica Segundo parcial
Marielena Vélez

 Se rechazan toda las muestras con estudio anaerobios si proceden de

esputo, orina de mitad intermedia, orina de catéter, secreciones vaginales
y prostáticas, lavados gástricos, lavados por broncos copia, material de
boca y piel material procedente de una fistula de colostomíae ileostomía
porque hay gérmenes que viven allí anaeróbicamente y crecerían en
mayor cantidad. Material de ulceras por decúbito.

 Rechazar muestras que vengan en transporte común o hisopo para

anaerobios.
 Rechazar esputo que sea saliva.
 Materia fijado con formalina, alcohol, etc.
 Cuando viene el culturete seco.

 Rechazar gram de hisopo rectal para buscar gonococos.

 Orina que se rechaza cuando tiene más de una horas de emitida.

Con frasco que esté derramado y mal tapado.

 Heces fecales que se rechazan.

 Las que tienen aceite y bario, las que contienen restos claros de
antidiarreicos, específicamente las que contienen caolín y pectina. Se
rechazan los materiales que estén visiblemente contaminados.

Cultivos de muestra tomados del organismo humano

1- Secreción óptica
2- Secreción óctica
3- Secreción faríngea
4- Secreción uretral o genital
5- Secreción de heridas
6- Secreción de los dientes

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 Laboratorio de Microbiología Medica Segundo parcial
Marielena Vélez

Diga como se toman estas muestras y ¿Qué material

utilizamos cada una y procedencia?

 Cultivo de secreción óptica: Muestra procedente de ojos,

tomada con hisopos estériles con medio de transporte

 Cultivo de secreción ótica: Muestra procedente de oídos,

tomada por hisopos estériles con medio de transporte

 Cultivo de secreción faríngea: Muestra procedente de

faringe, tomada con hisopos estériles con medio de transporte.

Cultivo de secreción uretral o genital: Tornada usando hisopo

estéril con medio de transporte o masaje prostático y colocado
en envase estéril.

Cultivo de heridas: Tomada con hisopo estéril con medio de

transporte de biopsia.

Cultivos de muestra tomados del organismo humano, ¿Qué

material utilizamos cada una? Y ¿Qué material utilizamos cada
una?
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 Laboratorio de Microbiología Medica Segundo parcial
Marielena Vélez

1- Coprocultivo: Cultivo de heces fecales, generalmente la

muestra se deposita en un envasé de boca ancha, otras
veces se extrae hisopo estéril con medio de transporte
directamente del paciente.

2- Urocultivo: Cultivo de orina. Se usan varios

procedimientos para la toma de muestra, generalmente se
recibe la orina directamente en un envase de boca ancha
estéril, en condiciones adecuadas, o con equipo de extracción
especial.

3- Cultivo de esputo: Muestra tomada de vías respiratorias

inferiores, través de la boca por esfuerzo de expectoración,
en un envase estéril -

¿En qué medio de cultivo la sembramos?

Coprocultivo: medio de crecimiento.
Urocultivo: CLED Agar
Cultivo de esputo: medio con base de huevo

Requisitos que se deben aplicar para tomar la muestra.

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Marielena Vélez

Coprocultivo : La materia fecal para coprocultivo debe estar libre de

contaminantes como orina o papel higiénico.
Urocultivo:
 recolectar la muestra cuando la orina haya estado en su vejiga
durante 2 a 3 horas.
 No tome antibióticos ni se aplique medicación local

Cultivo de esputo:
 Enjuagar la boca con agua antes de emitir la muestra.

 inspirar dos veces profundamente, conteniendo el aliento durante

unos pocos segundos después.

 Inspirar por tercera vez y expulsar el aire vigorosamente. Inspire

una vez más y luego toser.

 Sostener el envase cerca de los labios y depositar la muestra en el

con cuidado después de haber generado una tos productiva.

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Cultivos de muestra tomados del organismo humano

1- Líquido cefalorraquídeo
2- Hemocultivo
3- Liquido sinovial
4- Liquido del pericardio
5- Liquido ascítico
6- Líquido amniótico

1- Líquido cefalorraquídeo

Defina esta muestra- ¿Dónde se toma esta muestra?

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 Laboratorio de Microbiología Medica Segundo parcial
Marielena Vélez

Cultivo de líquido cefalorraquídeo: El líquido se extrae por

punción lumbar, haciendo punción con jeringuillas especiales
por médicos o especialista en la materia siempre en condiciones
de esterilidad.Se

¿Dónde se toma esta muestra?

Se toma : en la parte baja de la espalda, en la región lumbar

¿En qué posición se coloca el paciente para la toma de esta muestra?

Posición del feto  Acostado de lado con las rodillas encogidas hacia el
abdomen y la barbilla pegada al tórax

¿Qué sospecha el medico cuando se indica esta toma de esta

muestra?
sospecha de : meningitis bacteriana u otra infección grave, ...

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Marielena Vélez

2- Hemocultivo

1- Defina esta muestra

Hemocultivo: es una prueba de laboratorio que consiste en tomar una

muestra de sangre que se inocula en frascos que contienen medios de
cultivoCultivo de la sangre. La muestra se toma con jeringuilla estéril u otro
equipo de extracción sanguínea, en un ambiente riguroso de esterilidad.

¿Dónde se toma esta muestra?

 debe extraerse de una vena, utilizándose generalmente las del antebrazo.

¿En qué posición se coloca el paciente para la toma de esta

muestra?

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 Laboratorio de Microbiología Medica Segundo parcial
Marielena Vélez

Se Coloca al paciente en una postura cómoda y con la zona de punción

apoyada y bien visible.

Regla especial para la toma de esta muestra

 incubar los frascos durante 7 días

¿Qué sospecha el medico cuando se indica esta toma de esta

muestra?
se realiza ante la sospecha de que la sintomatología del paciente obedece a la
existencia de un proceso infeccioso en curso o la necesidad de identificar el
microorganismo que lo causa para instaurar el tratamiento farmacológico más
efectivo.

¿Quién debe tomar esta muestra?

en cualquier paciente con las siguientes características: Fiebre de origen
desconocido. Sepsis. Neumonía.

3- Liquido sinovial

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1- Defina esta muestra

El líquido sinovial : o sinovia es un fluido viscoso y transparente

¿Dónde se toma esta muestra?

se encuentra en las articulaciones.

¿En qué posición se coloca el paciente para la toma de esta

muestra?
el paciente está en decúbito supino

¿Qué sospecha el medico cuando se indica esta toma de esta

muestra?

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 Laboratorio de Microbiología Medica Segundo parcial
Marielena Vélez

cuando el médico sospecha: Sangrado en la articulación después de una

lesión en esa parte.

¿Quién debe tomar esta muestra?

Aquella persona tiene un sangrado luego de golpearse

4- Liquido del pericardio

1- Defina esta muestra:

es el líquido seroso secretado por la capa serosa del pericardio en la
cavidad pericárdica.

¿Dónde se toma esta muestra?

tórax, entre las costillas hasta el saco delgado que rodea el corazón
(el pericardio)

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Marielena Vélez

¿En qué posición se coloca el paciente para la toma de esta

muestra?
Colocar al paciente en posición supina

¿Qué sospecha el medico cuando se indica esta toma de esta

muestra?
solicita ante la sospecha de un trastorno asociado a inflamación
del pericardio y/o a efusión pericárdica.

¿Quién debe tomar esta muestra?

El cirujano cardiotorácico

5- Liquido ascítico

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1- Defina esta muestra

liquido seroso (de color claro) que se acumula en la cavidad peritoneal
(abdomen). 
¿Dónde se toma esta muestra?
se acumula en los microvilos de la capa externa

¿En qué posición se coloca el paciente para la toma de esta muestra?

decúbito supino (o decúbito dorsal)

Regla especial para la toma de esta muestra

Como regla general, tener más de 5 leucocitos por microlitro (µl)

¿Qué sospecha el medico cuando se indica esta toma de esta muestra?

sospecha que puede existir inflamación del peritoneo (peritonitis) o ascitis.

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¿Quién debe tomar esta muestra?

Proveedor de atención medica

6- Líquido amniótico

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es un fluido líquido que rodea y amortigua al embrión y luego al feto en

desarrollo en el interior del saco amniótico

- ¿Dónde se toma esta muestra?

a través del abdomen y hasta dentro del útero

¿En qué posición se coloca el paciente para la toma de esta

muestra?

posición de decúbito supino

¿Qué sospecha el medico cuando se indica esta toma de esta

muestra?
cuando se sospecha que el feto sufre una infección o alguna otra enfermedad.

Quién debe tomar esta muestra?

El obstetra

Practica VIII
Flora microbiana del cuerpo humano

¿A que llamamos flora microbiana?

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 Laboratorio de Microbiología Medica Segundo parcial
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Conjunto de microorganismos y virus que viven en un ambiente dado, como el

del cuerpo humano o en una parte de este, como es el aparato digestivo. 

¿Papel de la flora residente?

Los microorganismos presentes en la superficie del cuerpo son comensales. 
Su proliferación depende de la humedad, temperatura.  No son
indispensables para la vida, pero desempeñan una función importante para
mantener la salud y función normal.

¿A que llamamos flora normal de la piel?

La flora bacteriana normal de la piel incluye especies de estafilococos que
son ciertas bacterias que inducen inflamación cuando se presentan bajo una de
las capas de la piel pero que son inofensivas en su superficie.

¿A que llamamos flora bacteriana normal o residente de la piel?

El término microbiota de la piel también conocido comúnmente como flora de
la piel, se refiere a los microorganismos que residen en la piel, en este caso
la piel humana.

¿A que llamamos flora normal de los intestinos?

Se denomina flora o microbiota intestinal al conjunto de bacterias que viven
en el intestino, en una relación de simbiosis tanto de tipo comensal como de
mutualismo. Este conjunto forma parte de la microbiota normal.

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¿A que llamamos flora de la boca y vías respiratorias

superiores?

Las mucosas de boca y faringe casi siempre son estériles al nacimiento, pero
pueden contaminarse a su paso a través del conducto del parto. En las
primeras 4 a 12 hrs después del nacimiento.
El Estreptococo Viridans se establece como el miembro más notable de la
flora residente, y así permanece durante toda la vida. Estos microorganismos
tal vez se producen en el aparato respiratorio de la madre y de las personas
que atienden el parto en las primeras horas de vida se adquieren estafilococos
aerobios y anaerobios, diplococos gramnegativos (neisseria, moraxella
catarrhalis), difteroides y en ocasiones lactobacilos.

¿A que llamamos flora bacteriana normal o residente de uretra?

Son microorganismos fijos presentes en una región dada, cuando se altera, se
restablece por si misma.

¿A que llamamos flora bacteriana normal o residente de vagina?

La flora bacteriana vaginal, también conocida como microbiota vaginal, es un
conjunto de bacterias beneficiosasque habitan en esta zona del cuerpo y
evitan que proliferen en ella o la colonicen organismos patógenos susceptibles
de producir infecciones y problemas vaginales.
¿A que llamamos flora bacteriana normal o residente conjuntiva
Es el conjunto de gérmenes que conviven con el huésped en estado normal, sin
causarle enfermedad. 

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¿A que llamamos flora bacteriana normal o residente de fosa

nasales?
La microbiota normal o microbioma es el conjunto de microorganismos que
se localizan de ... El término "flora" es erróneo, ya se ha establecido que
las bacterias y otros

¿A que llamamos flora bacteriana normal o residente de vías

gastrointestinales y recto?
Se denomina flora o microbiota intestinal al conjunto de bacterias que viven
en el intestino,

¿A que llamamos flora bacteriana normal o residente de

genitales?
La flora vaginal, la microbiota vaginal o el microbioma vaginal son los
microorganismos que colonizan la vagina

Practica IX
Los colorantes y las coloraciones frotis o extendido.

¿Qué son los colorantes?

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 Laboratorio de Microbiología Medica Segundo parcial
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es un término genérico que se utiliza para toda sustancia química

capaz de proporcionar tintes, utilizados para dar color a productos de
la industria textil, cosmética y alimentaria.Los colorantes se han
usado desde los tiempos más remotos

¿De donde se derivan los colorantes usados en bacteriología?

Son derivados de las anilinas, sales orgánicas intensamente pigmentadas que
proceden del alquitrán

¿Como se clasifica los colorantes?

se clasifican, teniendo en cuenta si la propiedad tintorial se encuentra en el
anión o el catión de su estructura química. Sobre esta base se pueden dividir
en tres grupos: básicos, ácidos y neutros.

¿Como se clasifica los colorantes por su estructura molecular?

 Colorantes Sustantivos: Son colorantes que pueden teñir directamente
las fibras de algodón.
 Colorantes Mordientes: El mordiente es un producto que se adiciona a
la fibra y es absorbido por ella, pudiendo consecutivamente atraer el
colorante. Este término se usa principalmente para los colorantes que se
adicionan usando óxidos metálicos como mordiente. Especialmente se
emplean como mordientes los óxidos de aluminio y cromo por formar
precipitados insolubles.
 Colorantes a la Tina: Son sustancias insolubles que se pueden reducir a
materiales alquil-solubles. El colorante se aplica en su forma reducida y
se re-oxida en presencia de la fibra.
 Colorantes Directos: Se absorbe directamente por las fibras en
soluciones acuosas. Hay colorantes ácidos y básicos de este tipo. Estos
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dos tipos de colorantes se emplean especialmente en el teñido de lanas y

en poliamidas sintéticas.
1. Los colorantes básicos son sales amónicas o complejos formados por
cloruro de cinc o aminas. Algunos colorantes básicos, de elevado peso
molecular, son absorbidos por el algodón y el rayón.
2. Los colorantes ácidos son sales de los ácidos sulfúricos o carboxílicos
que se precipitan sobra la fibra.

¿A que parte de la bacteria tiñen los colorantes ácidos?

Los componentes básico del citoplasma celular

De que están formados los colorantes:

Ácidos Básicos: son sales amónicas o complejos formados por cloruro de

cinc o aminas.

Neutros: Están formados simultáneamente por soluciones acuosas

de colorantes ácido y básicos,

¿Como puede ser la tinción?

Puede ser positiva y negativa

¿Qué parte de la bacteria tiñe la tinción positiva?

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La estructura la estructura de la bacteriana o parte de ella

¿Como se agrupa la tinción positiva para su estudio y defínala?

¿Qué parte de la bacteria tiñe la tinción negativa?

El colorante no penetra ni tiñe la bacteria
¿Qué es el frotis o extensión? ¨leer las técnicas del frotis¨ y
explicarla.

Consiste en dispersar el material a observar al microscopio en lamina porta

objetos, con Ia finalidad de conocer las caracteristicas microscópicas de
microorganismos.

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El frotis es uno de los pasos previos a Coda coloración

TECNICA: En un portaobjetos limpio y desengrasado, se deposita en su
centro una gota de caldo simple, agua destilada o solucion salina fisioloogica,
con el asa de platino. El asa se esteriliza y con ella se toma una pequena
cantidad del material bacteriologico a examinar, Ia cual se diluye en la gota
previamente colocada en el portaobjetos. Con movimientos circulares de
dilucion se va extendiendo en la superficie hasta formar una Etna pellcula,
uniforrne, redonda u ovalada de unos 1.5 a 2.0 cms de diametro, Se debe
cuidar de que la extension no alcance los border de laminas.
un frotis bien hecho debe ser fino (casi transparente) para poder observar
mejor las caracteristicas micros picas del microbio_ Cuando el material
bacteriologico esta suspendido previamente en liquido (como los cultivos en
caldos) basta con tomar una gota del mismo y proceder en igual forma a lo ya
descrito.
SECADO: La preparacion esta humeda y es necesario secarla, El secado
puede conseguirse dejando la placa secarse espontaneamente al medio
ambiente. La lamina se sostiene por sus extremes y se debe tener cuidado de
no tocar con los dodos Ia extension, pues las bacterias estan vivas.
FIJAC ION: Este proceso gar con firmeza las bauerias al cristal Para que nu
se desp al agregar las sotuciones y al lavarlas AdemAsi se matan las bacterias
sin que estructura Se altre. Este paso se puede hacer ups modos. vierte oL)re el
extendido varias gotas de !icor de Hoffman (alcohol absoluto y titer sulftirico)
y se deja actuar hasta s evaporaciOn.
2_ Lin rflOtodorrias praction es pasar la preparacion por la llama con rapidez,
COn ei L4.xterldido aca arr pen iba -nitienciolk.lego el enfriarniento h i 3.
Este cid° se re res veces, la temperature la controiamo tocando con la uara
inferior de la lAmina el clorso de la mand cala vez que fa pasarnos por la
llama, la temperatura no debe servos molests nunca. Si sobre pass el puma
decoagulacion de les 1 proteirias bacterianas ostes se deforman. Pierclen su
disposición optiica y se Wien real.La temperature del Nada es air pr mayor
que la del se do, pro no debe Sobrepasar has grados centigrados,

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Practica X
tinción de Gram

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Practica XXI
Métodos para acido resistente coloración de Ziehl Neelsen

¿A que llamamos coloración de Ziehl Neelsen?

A la técnica de tinción diferencial rápida y económica, usada para la

identificación de bacterias ácido-alcohol resistentes (BAAR), como M.
tuberculosis o el Phylum Apicomplexa (coccidios intestinales) entre otros.

¿Por quien fue ideado el método de Koch?

Fue ideado originalmente por Robert koch

¿Por quién fue modificado?

Por ERLICH, ZIEHL- NEELSEN y otros
¿Cuál es el nombre correcto de esta investigación?
Los postulados de Koch

¿Cuáles es el género y especie; enumérelos? ¨leer las técnicas¨?

Genero myco- bacterium (bacterias acidorresistentes) tenemos varias especies
y algunos actinomicetos relacionados.
BACTERIAS ALCOHOL- ACIDO RESISTENTES
GENERO ESPECIES

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Marielena Vélez

 M. tuberculosis
 Mycobacterium M. Leprae
 M. Esmegmatis
 M. Lepra murium
 Nocordia N. Brasiliensis
 N. Asteroides

¿De qué color se tiñe el bacilo cuando es positivo y cuando es

negativo?

Cuando es positivo se tiñe de morado y cuando es negativo de rosado o rojo.

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 Laboratorio de Microbiología Medica Segundo parcial
Marielena Vélez

Hacer un esquema sobre los bacilos

¿Dibujar un bacilo de la tuberculosis positivo y uno negativo?

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 Laboratorio de Microbiología Medica Segundo parcial
Marielena Vélez

Cómo se llama los reactivos que se usan en este método?

Tinción de Gram

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