MUESTRAS

TEMA 4
 Introducción
 El estudio microbiológico de muestras
corporales permite establecer el
diagnóstico etiológico de diferentes
enfermedades infecciosas
 Por tal motivo es importante garantizar la
calidad en la obtención de la muestra y la
información que debe acompañarla
 Solicitud de estudio
 Antes de colectar una muestra se debe hacer una
selección cuidadosa para garantizar que el sitio
fuente, representa el sitio de enfermedad activa
 Las muestras para cultivo de bacterias deben ser
obtenidas lo más pronto posible, después del
inicio de la enfermedad activa y preferiblemente
antes del inicio de antibióticos
 Recuerde:
 Especificar el estudio requerido: Ej.
Examen directo, cultivo y antibiograma
 Resumir el estudio clínico presuntivo del
paciente
 Informar el uso de antibióticos u otros
medicamentos que pueden influir y que el
personal del laboratorio puede utilizar para
orientar el análisis
 Precauciones de Bioseguridad
 La inapropiada manipulación puede
convertirse en una fuente de riesgo
biológico para las personas que
están en contacto y/o para el medio
ambiente
 Utilizar los elementos de protección
personal necesarios para evitar
exposición con riesgo biológico, de
acuerdo con la fuente de la muestra
 Identificación de Muestras
Toda muestra debe ser etiquetada con
los siguientes datos básicos:
 Nombre completo del paciente y
edad con letra legible
 Diagnóstico presuntivo, número
de historia clínica
 Habitación donde está ubicado el
paciente o servicio de localización
 Tipo de muestra y sitio anatómico
 Fecha y hora de recolección
 Iniciales de la persona que
obtiene la muestra
 Condiciones generales de
almacenamiento y transporte
 Las muestras para cultivo de bacterias no deben
ser almacenadas por más de 24 horas
independientemente del medio y la temperatura
de almacenamiento
 Según el volumen obtenido: menos de 1 mL
deben ser transportados en los primeros 15 a 30
minutos para evitar evaporización, desecación, y
exposición a condiciones ambientales
 Si los volúmenes son mayores y se almacena en
el medio y a la temperatura recomendada puede
extenderse hasta 24 horas máximo
 Las bacterias que requieren procesamiento
inmediato por su susceptibilidad al medio
ambiente son: Shigella spp, Neisseria
gonorrhoeae, N. meningitidis,
Haemophilus influenzae, Streptococcus
pneumoniae
 Las muestras para estudio de anaerobios no
deben ser refrigeradas y deben ser
colectadas en recipientes que mantengan
condiciones libres de oxígeno
 Las muestras de líquidos biológicos
no deben ser refrigeradas
 Los frascos para recolección de
líquidos deben tener tapa rosca; no
se recomienda el uso de tapones de
gasa o algodón que puedan absorber
el líquido colectado y generar el
riego de derramamiento y exposición
biológica
Obtención de muestras para
microbiología
¡No existe ningún examen en
el laboratorio que pueda
mejorar los resultados de
una muestra mal tomada!
Consideraciones
fundamentales en la toma de
muestras
Secreciones varias, heridas, úlceras,
tejidos, biopsias, etc.
1. Tomada del sitio real de infección
En lesiones cerradas, debe
procurarse levantar
costras o hacer incisiones para
obtener
secreción purulenta.
2. Cantidad de
muestra
suficiente
3. Recipientes estériles
 Adecuados para la
toma de muestra,
preferiblemente de
plástico y cerrados
herméticamente.
Ejemplo: esputos,
orina.
 Rotulados
correctamente.
4. Obtener los cultivos antes de la administración
de antibióticos

Microorganismos altamente sensibles a

los antibióticos:
•Streptococcus
•Neisseria
spp
•Haemophilus spp
 5. Transporte de muestras al laboratorio.
Tiempo critico para el transporte de
muestras al laboratorio
 Ideal: inmediatamente.
 Evaluar la toma de muestra directamente del
paciente al medio de cultivo

 En general para todas las muestras: 2 horas

entre la toma y derivación al laboratorio
Medios de Transporte
MUESTRAS INACEPTABLES
 BIOPSIAS
 Con formalina
 Envueltas en gasa

 LIQUIDO CEFALORRAQUIDEO
 Muestras refrigeradas

 ORINAS
 Menos de 20 ml

 ENVASES INCORRECTOS

 SECRECIONES
 Hisopos secos
Muestras Clínicas
 ORINA
Técnica para mujeres
 Se lavará las manos
cuidadosamente con agua y jabón,
las enjuagará con agua y las secará
con una toalla limpia
 Se separarán los labios mayores y
menores, y los mantendrá
separados en todo momento hasta
que se haya recogido la orina
 Se indicará a la paciente que orine
desechando los primeros mililitros,
tras lo cual y sin interrumpir la
micción, se recogerá el resto de la
orina en el recipiente
Técnica para hombres

 Lavado de las manos con agua y

jabón
 Retraer completamente el
prepucio, que se mantendrá así
en todo momento, hasta que se
haya recogido la orina
 Limpiar el glande con jabón
neutro
 Se pedirá al paciente que orine
desechando los primeros
mililitros y sin interrumpir la
micción, se recogerá el resto de
la orina en el recipiente estéril
 Orina vesical
 Es la orina obtenida por punción
suprapúbica
 La punción suprapúbica requiere
un buen conocimiento de la técnica
y de las precauciones que hay que
adoptar, con rigurosa asepsia,
descartando problemas de
hemostasia y con la vejiga
palpable, previa antisepsia y
anestesia local
 En caso de orina obtenida por esta
punción, se enviará al laboratorio
lo antes posible en la misma
jeringa de la extracción, indicando
en volante adjunto, procedencia de
la muestra (dato importante a la
hora de valorar el recuento de
colonias)
 Lactantes y Neonatos

• Directamente en
envases descartables
de boca ancha
• Evitar
contaminación fecal
Paciente quiere que le
devuelvan la taza jajajajaj
Proteinuria de
24 horas jajajaj Envase inadecuado
 SANGRE
Obtención de la muestra
 Retirar los tapones externos de
los frascos
 Desinfectar los tapones de goma
con alcohol iodado, dejándolo
secar al menos un minuto
 Localizar por palpación la vena
que se va a puncionar
 Realizar Antisepsia con alcohol 70% la
zona de la piel a realizar la punción. Se
comenzará por el centro y se irán
haciendo círculos concéntricos hacia el
exterior
 Extraer la sangre, si fuera necesario
palpar nuevamente la vena se utilizarán
guantes de goma estériles o se realizará
antisepsia de los dedos de la misma
manera que la piel del paciente
 Introducir la sangre en los frascos
evitando que entre aire en el frasco para
cultivo en anaerobiosis
 LÍQUIDO
CEFALORRAQUÍDEO (L.C.R.)
Obtención de la muestra
 Se obtendrá antes de instaurar
cualquier terapéutica antibiótica
 Líquido Cefalorraquídeo
obtenido por punción lumbar
 Se localiza la zona elegida para
la punción lumbar mediante
palpación de los espacios
intervertebrales una vez colocado
el paciente en la posición
adecuada
 Se realiza la antisepsia con
alcohol al 70% , 10 cm. de
diámetro en el área elegida, la
aplicación del antiséptico se
hace de forma concéntrica del
centro a la periferia. Se repite
la operación con povidona
yodada que se deja secar
durante un minuto.
 Realizar la punción entre los
espacios inter-vertebrales L3-
L4, siguiendo las normas de la
más estricta asepsia
 Al llegar al espacio
subaracnoideo dejar salir
libremente el líquido
cefalorraquídeo que se
recogerá en tubos sin
conservantes con tapón
de rosca
 HECES
Material necesario
 Recipiente de boca ancha para recoger las
heces
 No es necesario que esté estéril, sólo es
preciso que esté limpio. No contendrá
restos de jabones, detergentes,
desinfectantes o iones metálicos.
 Medios de transporte para heces, se
emplean sólo si la remisión de la muestra
se retrasa, existen sistemas comerciales
para bacterias (Cary-Blair o
modificaciones o solución de glicerol
tamponado)
 TRACTO RESPIRATORIO SUPERIOR
FARINGO-AMIGDALINO
 Bajo visión directa, con la
ayuda de un depresor lingual, se
tocará con la torunda en todas
las partes con exudado,
membranas o inflamación
 Se deben frotar las criptas y la
faringe posterior. No tocar
nunca la mucosa oral, lengua
 NASOFARINGE
Técnica
 Frotis: pasar la torunda a
través de la nariz
suavemente, hasta llegar a la
nasofaringe. Rotar la torunda
y extraerla
 Aspirado: Aspirar el moco,
pasando el tubo de teflón o
un catéter conectado a una
jeringa por vía perinasal, de
igual forma que la torunda
 CAVIDAD ORAL
Esta muestra se emplea
habitualmente para el
diagnóstico de candidiasis
Técnica
 Se pedirá al paciente que se
enjuague la boca con agua
 Tras enjuagar la boca, frotar
o raspar las lesiones con una
espátula o con una torunda y
hacer una extensión sobre un
porta
 Se repetirá la toma con una
segunda torunda para cultivo
(sólo para la investigación de
Cándida albicans)
 TRACTO RESPIRATORIO INFERIOR
ESPUTO
Técnica
 Enjuagar la boca con agua
destilada estéril o solución salina
 Obtener el esputo tras una
expectoración profunda,
preferentemente matinal
 De no producirse expectoración
espontánea, puede inducirse el
esputo con nebulizaciones de suero
fisiológico estéril (15 ml durante
10 minutos), siendo útil además
realizar un drenaje postural o
fisioterapia respiratoria
 MUESTRAS EXTRAPULMONARES
LIQUIDO PLEURAL
 Obtención por toracocentesis
 MUESTRAS DEL TRACTO GENITAL
FEMENINO Y MASCULINO
EXUDADOS VAGINALES
Técnica
 Con la paciente en posición
ginecológica se introducirá un
espéculo "sin lubricante" (si es
necesario para lubricar utilizar
agua templada)
 Recoger la muestra, bajo visión
directa, con un hisopo estéril,
de la zona con mayor exudado,
o en su defecto, del fondo del
saco vaginal posterior
EXUDADOS URETRALES
Técnica
 Limpiar cuidadosamente la
mucosa circundante con gasas
estériles
 Introducir el hisopo suavemente
con un movimiento de rotación
hasta penetrar unos 2 cm dentro
de la uretra (3-5 cm para la
investigación de Chlamydia
trachomatis)
SECRECIÓN OCULAR
 Conjuntivitis: con un
hisopo estéril,
recolectar el material
que se acumula en el
ángulo del lacrimal
 Preservar y mantener
en medio Stuart
 HERIDAS ABIERTAS Y
EXUDADOS
Se recomienda utilizar hisopos de
algodón previamente esterilizados
 En casos de heridas y exudados en
contacto con zonas sucias, se debe
lavar y secar la zona previamente.
No utilice desinfectantes para
lavar la zona, ya que lesionan los
tejidos y se altera el resultado de
los cultivos
 Con un hisopo estéril, raspar los bordes (si
es posible) de la zona afectada,
impregnando el hisopo, evitando el
contacto con cualquier otra parte.
 Introducir dentro de un tubo estéril con
medio de transporte o en un frasco con tapa
rosca con 3ml de solución salina estéril
 Romper el mango del hisopo
para eliminar la parte que ha
estado en contacto con las
manos
 Tapar el tubo evitando
contaminar su interior
 Identificar y enviar al
laboratorio