MEDIO DE CULTIVO

Bacteriología General
_ Catálogo 1202

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BASE MEDIO OF ( De Hugh y Leifson )

USO
Para diferenciar bacterias Gram negativas, basándose en la degradación oxidativa y fermentativa de carbohidratos, a partir de
diversas muestras.

PRINCIPIO
La triptosa proporciona al medio los nutrientes necesarios para el crecimiento de las bacterias, el fosfato dipotásico controlan el
pH del medio y el cloruro de sodio ayuda a mantener el equilibrio osmótico. El carbohidrato adicionado funciona como la fuente
fermentable y la degradación se manifiesta por el vire del medio de cultivo de verde a amarillo. El azul de bromotimol es el indicador de
cambios de pH.
El indicador de pH es el azul de bromotimol y la degradación del carbohidrato en estudio se manifiesta por vire del medio de
cultivo de verde a amarillo.
La prueba se debe realizar en presencia y en ausencia de aire, por lo que se inoculan 2 tubos por picadura a partir del cultivo puro
en estudio. A uno de los tubos agregar de 1 a 1.5 ml de aceite mineral estéril y el otro permanece sin éste. Incubar 24 – 48 h a 35ºC.
El vire a amarillo de los tubos con aceite, se interpreta como degradación fermentativa del carbohidrato de ensayo. Si el vire a
amarillo es exclusivamente en los tubos no cubiertos significa que la degradación es oxidativa y se observa solamente en la superficie del
medio de cultivo o en la parte próxima a la superficie, en cambio la fermentativa se extiende desde la superficie hasta la profundidad del
tubo.
En este medio también se puede determinar la movilidad, si la turbidez del crecimiento se observa únicamente en la línea de
inoculación, se trata de una cepa inmóvil y si está presente en todo el medio es una cepa móvil.

FORMULA EN GRAMOS POR LITRO DE AGUA DESTILADA

Agar 2.0 Fosfato dipotásico 0.3
Azul de bromotimol 0.08 Triptosa 2.0
Cloruro de sodio 5.0
pH 6.8 ± 0.2

PREPARACION
Rehidratar 9.4 g del medio en un litro de agua destilada. Reposar 10 a 15 minutos. Calentar agitando frecuentemente hasta el
punto de ebullición durante 1 minuto para disolverlo por completo. Distribuir volúmenes de 5 ml en tubos d e ensayo. Esterilizar en
autoclave a 121ºC (15 lbs de presión) durante 15 minutos. Enfriar aproximadamente a 45ºC y adicionar por microfiltración de 5 a 10 g de
los carbohidratos a probar. Distribuir volúmenes de 5 ml en tubos de ensayo estériles. Enfriar en posición vertical. Conservar en
refrigeración de 2º a 8ºC.

CONTROL DE ACTIVIDAD
MICROORGANISMO CEPA RESULTADO
ATCC Testigo Dextrosa Lactosa Sacarosa
A C A C A C A C
Escherichia coli 25922 Al Al Ac G Ac G Ac G Ac G Al Al
Enterobacter aerogenes 13048 Al Al Ac G Ac G Ac G Ac G Ac G Ac G
Pseudomonas aeruginosa 27853 Al Al Ac Al Al Al Al Al
Salmonella enteritidis 13076 Al Al Ac G Ac G Al Al Al Al
Shigella flexneri 9199 Al Al Ac Ac Al Al Al Al

Al = alcalino (verde, sin cambio)

Ac = ácido (amarillo)
G = gas
A = tubo sin sello de aceite mineral
C = tubo con sello de aceite mineral

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Bacteriología General
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BIBLIOGRAFIA
Haley, Trans. N. Y. Acd. Sci. Series 11, 21 : 708, 1959
Mac Faddin. Media for isolation-cultivation-identification-maintenance of medical bacteria, vol. 1. Williams & Wilkins,
Baltimore. 1985

PRESENTACION
No. Cat. 1202 Deshidratado 1000 g No. Cat. 1202-A Deshidratado 450 g
1202-E Deshidratado 500 g 1202-B Deshidratado 100 g

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