CROMATOGRAFÍA EN CAPA

FINA.

Karla Meza Frausto

LABORATORIO DE QUÍMICA ORGÁNICA. GRUPO 33.
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1 ANTECEDENTES

1.1 CONCEPTO DE CROMATOGRAFÍA. TIPOS DE CROMATOGRAFÍA DE ADSORCIÓN Y

CROMATOGRAFÍA DE PARTICIÓN.

• La cromatografía es una técnica usada para separar e identificar componentes de

una mezcla y se usa como un criterio de pureza. Se basa en la diferente afinidad de
las moléculas por un disolvente y por la trama porosa de la matriz a través de la que
fluyen.
• La cromatografía de adsorción se basa principalmente en las diferencias en la
afinidad relativa de los compuestos por el sólido utilizado
como fase estacionaria. Las separaciones obtenidas se
determinan casi exclusivamente por interacciones polares (la
fase estacionaria es más polar que la fase móvil).
La fase móvil puede ser un líquido (cromatografía sólido-
líquido) o un gas (cromatografía gas-sólido). Los tipos de
adsorción son física, iónica, hidrofóbica y por afinidad.
• La cromatografía de partición se basa en la distribución
selectiva del soluto entre la fase
estacionaria y la fase móvil. La
fase estacionaria es un líquido
soportado en un sólido inerte y la
fase móvil puede ser un líquido
(cromatografía de partición
líquido-líquido) o un gas
(cromatografía de partición gas-
líquido). Un tipo de
cromatografía de partición sería
la cromatografía en papel (PC).

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1.2 FENÓMENO DE ADSORCIÓN. LA PROPIEDAD DE RETENCIÓN. CONCEPTO DE RF.

• El fenómeno de adsorción es un proceso por el cual los átomos, iones o moléculas
quedan retenidas en la superficie de un material. La adsorción de una sustancia es
su acumulación en una determinada superficie interfacial entre dos fases.
• La propiedad de retención es el volumen de fase móvil requerido para eluir un
compuesto cuya concentración en la fase estacionaria es despreciable comparada
con la de la fase móvil.
• El factor de retención es una medida de la relación entre el tiempo que las moléculas
del analito están en la fase estacionaria y el tiempo que permanecen en la fase
móvil.

𝑑𝑖𝑠𝑡𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑟𝑒𝑐𝑜𝑟𝑟𝑖𝑑𝑎 𝑝𝑜𝑟 𝑒𝑙 𝑠𝑜𝑙𝑢𝑡𝑜

𝑅𝑓 =
𝑑𝑖𝑠𝑡𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑟𝑒𝑐𝑜𝑟𝑟𝑖𝑑𝑎 𝑝𝑜𝑟 𝑙𝑎 𝑓𝑎𝑠𝑒 𝑚ó𝑣𝑖𝑙

1.3 CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA. CARACTERÍSTICAS Y APLICACIONES.

• La cromatografía en capa fina se basa en la preparación de una capa uniforme de un

absorbente mantenido sobre una placa de vidrio u otro soporte. La fase móvil es
líquida y la fase estacionaria consiste en un sólido (componente polar). Mientras los
componentes se desplacen con mayor velocidad, serán los menos polares.
• La cromatografía en capa fina puede tener ventajas como que el tiempo que se
necesita para conseguir las separaciones es mucho menor y la separación es mejor.
El método es simple y esto hace que sea adecuado para fines analíticos.
• Algunas de sus aplicaciones son en la industria farmacéutica (separación y
cuantificación de ingredientes activos), en la industria de alimentos (cuantificación
de edulcorantes, preservantes y vitaminas C), en materias primas (cuantificación de
pureza), entre otros (separación de
componentes en muestras
botánicas, de productos naturales
y bioquímicos).

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1.4 ELUYENTES, SOPORTES Y REVELADORES MÁS COMUNES PARA LA CROMATOGRAFÍA EN CAPA

FINA.

• Los eluyentes más comunes en una cromatografía en capa fina son éter de petróleo,
cloruro de metileno, n-hexano, acetato de etilo, ciclohexano, acetona, dietil-éter,
etanol, f-butil-éter, metanol, cloroformo, ácido acético.
• Como soportes para la cromatografía en capa fina, comúnmente se usan el gel de
sílice, alúmina, celulosa o poliamidas.
• Los reveladores más comunes para la cromatografía en capa fina son:
o Luz UV: si la sustancia absorbe luz ultravioleta, se puede usar una fase
estacionaria impregnada con un indicador fluorescente (F25a o F366), el
número que aparece como subíndice nos indica la longitud de onda de
excitación del indicador utilizado.
o La introducción de la placa en vapores de yodo.
o El rocío con una solución de agualH2SOa 1 :1 (dentro de un compartimiento
especialmente protegido y bajo una campana de extracción de gases).

1.5 FACTORES QUE INFLUYEN EN UNA SEPARACIÓN POR CROMATOGRAFÍA DE CAPA FINA.

• Algunos de los factores que pueden influir en los resultados de l cromatografía por
capa fina son.
o Temperatura: a menor temperatura las sustancias se adsorben más en la
fase estacionaria.
o La cromatografía debe llevarse a cabo en un área sin corrientes de aire.
o Limpieza de las placas. Muchas placas están contaminadas con grasa o
agentes plastificantes o adhesivos. Para el trabajo a pequeña escala, éstas
deben limpiarse corriendo primero una mezcla de cloroformo y metanol y
después dejar secar completamente antes de aplicar la muestra.
o Pureza de los disolventes.

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1.6 ESTRUCTURA, PROPIEDADES FÍSICAS, PROPIEDADES QUÍMICAS, RIESGOS A LA SALUD, DE

INFLAMABILIDAD Y ACCIONES EN CASO DE EMERGENCIA DE LOS PRODUCTOS QUÍMICOS A

UTILIZAR.

1.6.1 Gel de sílice.

Sólido blanco, incoloro, inodoro.

• Es una sustancia química de aspecto

cristalino, porosa, inerte, no tóxica e
inodora, insoluble en agua ni en cualquier
otro solvente, químicamente estable.

Este gel no es tóxico, inflamable ni químicamente reactivo. Sin embargo, las bolsitas de
bolitas de gel, llevan un aviso sobre su toxicidad en caso de ingestión. Se debe a que el
Cloruro de Cobalto que se suele añadir para indicar la humedad del gel, sí es tóxico. El
Cloruro de Cobalto reacciona con la humedad, cuando está seco es de color azul y se vuelve
rosa al absorber humedad.

1.6.2 Benzoína.
Sólido blanco cristalino con un olor a alcanfor que consiste de un compuesto orgánico.

• Punto de ebullición: 344 °C.

• Punto de fusión: 137 °C.
• Solubilidad en agua: Prácticamente
insoluble.
• pH: En solución alcohólica es ácida.

La benzoína por contacto produce enrojecimiento e irritación de piel y los ojos. Por
inhalación del polvo del compuesto, se produce una irritación de las vías respiratorias,
manifestada por tos. Sin embargo, en general no es un compuesto muy tóxico.

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1.6.3 Ácido acetilsalicílico

Sólido incoloro en forma de aguja e inodoros.

• Densidad 1.443 g/cm3

• Masa molar 138,12 g/mol
• Punto de fusión 158,6 °C
• Punto de ebullición 200 °C

Su ingesta abusiva produce nefritis, que son los procesos inflamatorios y/o disfuncionales
del riñón y vasodilatación periférica por acción directa sobre el músculo liso. Con dosis aún
mayores de salicilatos aparece una respiración profusa y coma, resultado de un efecto
directo sobre el bulbo raquídeo.

1.6.4 Cafeína
Sólido (polvo) blanco en forma de aguja, sin olor.

• Densidad y fase 1.2 g/cm³

• Solubilidad in Agua Ligeramente soluble
• Punto de fusión 237 °C
• Punto de ebullición 178 °C
• Acidez (pKa) 10.4 (40 °C)

Los efectos de la cafeína sobre las personas (así como del resto de las drogas tanto legales
como ilegales) dependerán de: Las características de la sustancia y la forma en que la
consumas; Las características personales: personalidad, peso, edad, estado de salud y de
ánimo, así como tu experiencia pasada como consumidor de la droga en cuestión; Las
circunstancias en las cuales consuman la droga: (compañía, lugar, legalidad).

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1.6.5 Acetona

Líquido incoloro.

• Densidad: 0.316
• Punto de fusión: -94.3°C
• Punto de ebullición: 56.1°C

Si una persona se expone a la acetona, ésta pasa a la sangre y es transportada a todos los

órganos en el cuerpo. Si la cantidad es pequeña, el hígado la degrada a compuestos que no

son perjudiciales que se usan para producir energía para las funciones del organismo.

1.6.6 Acetato de etilo.

Líquido incoloro con olor a frutas.

• Solubilidad: 1 mL en 10 mL de
agua a 25°
• Densidad: 0.902 a 20°C/ 4°C
• Punto de ebullición: 77° C
• Punto de fusión: -83° C

El acetato de etilo puede irritar la piel, los ojos, la nariz y la garganta, el contacto repetido

puede causar sequedad y grietas en la piel. La exposición a largo plazo puede afectar al

hígado y riñón. El acetato de etilo es un líquido inflamable y presenta peligro de incendio.

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1.6.7 Hexano
Líquido inoloro con olor fuerte.

• Poco no polar o combinable con el agua.

• Momento dipolar cero
• Punto de ebullición de 68.85 °C
• Punto de fusión de - 95.15 °C

Respirar grandes cantidades produce adormecimiento de los pies y las manos, seguido de
debilidad muscular en las piernas y los pies.

1.6.8 Metanol
Líquido incoloro, sabor y olor semejante al etanol.

• Densidad 0.7918 g/cm3

• Punto de fusión -97.16 °C
• Punto de ebullición 64,7 °C
• Momento dipolar 1.69 D

A concentraciones elevadas el metanol puede causar dolor de cabeza, mareo, náusea,

vómitos y muerte (en el peor de los casos). Una exposición aguda puede causar ceguera o
pérdida de la visión, ya que puede dañar seriamente el nervio óptico. Una exposición
crónica puede ser causa de daños al hígado o de cirrosis. La dosis letal de metanol para los
humanos, varía entre 0.3 gramos y 1 gramo por kilogramo de masa corpórea.

El metanol, a pesar de su toxicidad, es muy importante en la fabricación de medicinas.

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