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Cromatografía en Capa Fina

La cromatografía en capa fina es una técnica analítica rápida y sencilla que permite identificar y determinar la pureza de compuestos. Consiste en una fase estacionaria, como una capa fina de gel de sílice, y una fase móvil que se desplaza a través de la fase estacionaria separando los componentes de una mezcla. Se usa principalmente en la industria farmacéutica, laboratorios clínicos y de investigación para separar mezclas como aminoácidos, alcaloides, azúcares

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Cromatografía en Capa Fina

La cromatografía en capa fina es una técnica analítica rápida y sencilla que permite identificar y determinar la pureza de compuestos. Consiste en una fase estacionaria, como una capa fina de gel de sílice, y una fase móvil que se desplaza a través de la fase estacionaria separando los componentes de una mezcla. Se usa principalmente en la industria farmacéutica, laboratorios clínicos y de investigación para separar mezclas como aminoácidos, alcaloides, azúcares

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Integrantes:

Natalia Bautista
Gabriel Becerril
Emerson Lara
Karla Jurez
CROMATOGRAFA EN CAPA FINA
Grupo: BI02Q
Mdulo IX: Evaluacin de la
calidad de los medicamentos.
1
M. en C. FRANCISCO
LOPEZ NARANJO
UNIVERSIDAD AUTNOMA METROPOLITANA UNIDAD
XOCHIMILCO

LICENCIATURA QUMICA FARMACETICA BIOLGICA
DIVISIN DE CIENCIAS BIOLGICAS DE LA SALUD
Cromatografa
Mtodo fsico muy utilizado que consiste en la
separacin de una mezcla de compuestos o
iones, debido a la distribucin de la muestra
entre dos fases; una fase estacionaria y otra
mvil. Cada uno de los componentes es retenido
selectivamente por la fase estacionaria.
2
Clasificacin de la cromatografa
Tcnica analtica rpida y sencilla que permite:

Identificar y determinar la pureza de los compuestos
Determinar el progreso de una reaccin y establecer
con cierta precisin el tiempo que tarda en consumirse
un reactivo y transformarse en producto.
Cromatografa en capa fina
Consiste:
En una fase estacionaria y una mvil , en esta tcnica la fase
estacionaria es una capa fina de gel de slice u otro soporte con
propiedades adsorbentes dispuesta sobre un soporte de vidrio, plstico
o aluminio que denominaremos placa.

La fase mvil se desplaza a travs de la fase estacionaria por accin
capilar, a veces ayudada por la gravedad o por la aplicacin de un
potencial elctrico.

Similares a la cromatografa de lquidos
Industria farmacutica.
Laboratorios clnicos
Estructura de apoyo en estudios bioqumicos y biolgicos
Laboratorios industriales

carcter
polar
- La almina es el mas activo de los dos retiene con mas
fuerza a los compuestos apolares

- La gel de slice se utiliza para preparar sustancias mas polares

Composicin de las fases
Caractersticas del adsorbente:

Inertes con las sustancias a analizar.
No actuar como catalizador en reacciones de descomposicin.
Presentar gran selectividad hacia los compuestos a separar



Interacciones intermoleculares entre compuestos y el adsorbente

Molcula no polares fuerza de Van der Walls
Compuestos polares interacciones de tipo dipolo-dipolo (complejos
de coordinacin, puentes de hidrgeno o formacin de sales)

Separacin de distintos componentes en base al adsorbente.
Adsorbente Separacin
Slica
Aminocidos, alcaloides,
azcares, cidos grasos, aceites
esenciales, esteroides,
terpenoides.
Almina
Alcaloides, colorantes en
alimentos, fenoles, esteroides,
vitaminas, carotenos,
aminocidos.
Kieselguhr
Azcares, oligosacridos, cidos
dibsicos, cidos grasos,
triglicridos, aminocidos,
esteroides.
Polvo de celulosa
Aminocios, colorantes en
alimentos, alcaliodes,
nucletidos.
Almidn Aminocidos
Esta formada por un liquido, en esta el orden de elucin
depender de la polaridad del eluyente.



obliga a las sustancias a migrar y esto produce una competencia entre la
tendencia del soluto a quedarse retenido en la fase fija o correr con el
eluyente.
Las sustancias altamente polares tendrn mayor afinidad por la fase
estacionaria (que es polar) y por lo tanto, eluirn en segundo trmino
respecto a una sustancia menos polar que, al ser poco retenida por la
fase estacionaria, ser fcilmente arrastrada por el solvente
11
Caractersticas del eluyente:

El disolvente no debe disolver al adsorbente
No debe reaccionar de forma irreversible con el adsorbente ni con los
compuestos que se desea separar
Preferentemente tener bajo punto de fusin para facilitar su eliminacin
despus de la separacin

ter de petrleo
Ciclohexano
Tetracloruro de carbono
Tolueno
Cloroformo
Cloruro de metileno
ter dietlico
Acetato de etilo
Acetona
Piridina
Etanol
Metanol
Agua
cido actico
Disolventes para cromatografa
Incrementa el poder eluyente
La muestra se
aplica a 1 o 2 cm
del borde de la
placa.
El punto de
aplicacin debe
tener un dimetro
alrededor de 5 mm
(separacin mas
eficaz).
De soluciones
diluidas se realizan
3 o 4 aplicaciones
superpuestas
cercano a la zona
entre aplicacin y
aplicacin.
Se deje secar el
disolvente que
disolvi a la
muestra.

Se retira y se deja
secar
Inmediatamente
visibles
Se requiere:
Cmaras de luz UV
Vapores de yodo
Roco con una solucin de acido sulfrico.
Caractersticas Cromatografa en
Capa Fina
Factor de Retencin




Cuando se desarrolla el cromatograma, mientras el solvente alcanza
una determinada altura en la placa los componentes de la muestra
se movern una distancia menor o igual a la del solvente.

El cociente entre la distancia recorrida por el solvente y la recorrida
por un determinado componente recibe el nombre de relacin de
frente y naturalmente es siempre menor o igual a 1.

Ventajas
Slo se necesitan pequeas cantidades de muestras de
adsorbentes.
Tcnica ms rpida.
Mejor resolucin (adsorbente mayor capacidad)
Es fcil de recuperar una sustancia individual, despus
de la separacin.
Separar sustancias hidrofbicas
Desventajas
Cromatogramas son difciles de conservar.
La reproducibilidad de los valores de R
F
no son fciles de
lograr.
No se pueden tener materiales voltiles como parte de la
mezcla.
El tiempo empleado para encontrar el eluyente
adecuado.
Se puede aplicar:
Anlisis cuantitativo y cualitativo de un componente.
Identificacin de sustancias conocidas (comparadas con
un patrn de la sustancia pura).
Medir el grado de pureza de una mezcla (si existen
varias manchas en el cromatograma, existen varios
componentes en la mezcla).

Fenmeno de particin
Fenmeno de particin
La separacin se basa en la distinta solubilidad de las sustancias en dos
fases diferentes. Esta diferencia se expresa mediante coeficientes de
reparto y puede ser de dos tipos:

Cromatografa de particin lquido-lquido.- la fase fija es la acuosa
que est sujeta en un slido, y la fase mvil es la orgnica. Segn el
soporte puede ser de varios tipos:
Papel: el soporte es la celulosa
Columna o capa fina: el soporte es silicagel, almidn, etc.

Cromatografa de particin lquido-gas.- la fase fija es un lquido
orgnico no voltil soportado en un slido y la mvil un gas inerte.
21
En funcin de la polaridad de la fase lquida
estacionaria:
Cromatografa en fase normal.
Se utiliza para la separacin de
compuestos muy polares
22
Cromatografa en fase reversa. Se
emplea para la separacin de
mezclas de compuestos de
polaridad baja
Mezclas de
disolventes
apolares con
disolventes
polares
Lquido
de
carcter
polar.
Mezclas de
agua con
disolventes
polares
miscibles
Lquido
de
carcter
apolar
Fase mvil
Fase mvil
Fase
estacionaria
Fase
estacionaria
Constante de distribucin
23
La constante de distribucin, K
d
, que se define como la
concentracin de una sustancia A en la fase orgnica dividida
por la concentracin de la misma sustancia en la fase acuosa.
A esta constante se la denomina tambin constante de
particin.
Referencias
Cromatografa. Disponible en:
[Link]
0/[Link]
Qumica analtica instrumental II, Tcnicas cromatogrficas. Disponible en:
[Link]
SoriaA.O; Romero M. A. Fundamentos de qumica orgnica experimental,
Tcnicas de separacin y purificacin de compuestos orgnicos.
Universidad Autnoma Metropolitana, Unidad Xochimilco, 2009
24

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