PREINFORME PRACTICA DE LABORATORIO CROMATOGRAFIA EN CAPA
FINA
UNIVERSIDAD DISTRITAL FRANCISCO JOSÉ DE CALDAS LICENCIATURA EN
QUÍMICA
MIGUEL ANGEL MARTINEZ
OBJETIVOS
Obtener experiencia en el manejo
experimental de la cromatografía en capa
fina
1. Separar los componentes de una mezcla
de colorantes sintéticos
2. Separar los componentes de una mezcla
incolora y seleccionar el mejor solvente
MARCO TEÓRICO
La TLC consiste en una fase estacionaria
sólida sobre un vidrio, plástico o metal y
un solvente orgánico, el eluente. La
muestra debe ser disuelta en un líquido y
luego ser depositada como un punto o
barra sobre la fase estacionaria. Los
constituyentes de la muestra pueden ser
identificados por los estándares que corren
simultáneamente con las muestras
desconocidas. La parte inferior de la placa
se coloca en una cámara que contiene el
solvente, que se desplaza hacia arriba por
la placa por una acción de capilaridad.
Los diferentes componentes de la mezcla
se mueven por la placa con diferente
velocidad, debido a su diferente afinidad
entre la fase móvil y la fase estacionaria.
TLC es una forma de cromatografía de
absorción usando una fase móvil líquida y
una fase estacionaria sólida.
En general, todos los tipos de
cromatografía dependen de una serie de
instrumentos, compuestos químicos y
determinada tecnología. Debido a ello, es
importante conocer algunos conceptos
para poder entender el funcionamiento de
las técnicas cromatográficas:
● Fase estacionaria. Es una
sustancia que se mantiene
inmóvil mientras se ejecuta la
cromatografía.
● Fase móvil. Es la sustancia que
se mueve durante la
cromatografía. Puede ser un
líquido o un gas. La muestra
que contiene el analito se
administra en la fase móvil.
● Analitos. Son las sustancias
que se van a separar, cuantificar
y/o identificar utilizando la
cromatografía, es decir, son las
sustancias que se van a analizar.
● Muestra. Es la mezcla que se
va a analizar. Puede estar
constituida por uno o varios
analitos, y otros componentes
que pueden no ser de interés, de
los que serán separados los
analitos.
● Tiempo de retención. Es el
tiempo que demora un analito
en pasar desde la columna o
sistema por donde pase la fase
móvil, hasta el detector (equipo
que puede dar una señal de
detección utilizando alguna
propiedad del analito).
● Selectividad. Es la capacidad
de diferenciar cada componente
en la mezcla.
● Eluyente. También se refiere a
la fase móvil cuando sale de la
columna cromatográfica.
La separación de los analitos dependerá de
la afinidad de cada uno de los
componentes tanto por la fase estacionaria
como por la fase móvil. Dependiendo de
su naturaleza, algunas sustancias tenderán
a moverse con la fase móvil y otras a
permanecer sobre la fase estacionaria.
La cromatografía en capa fina también
llamada TLC consiste en una técnica
analítica que sirve para separar mezclas
con moléculas orgánicas, comparar
muestras de acuerdo con su estructura
química, su liposolubilidad, su
hidrosolubilidad y determinar el grado de
pureza de un compuesto. Presenta como
fase estacionaria gel de sílice (SiO2),
alúmina (Al2O3), silicato de magnesio,
celulosa, de material adsorbente unido a
una capa o soporte de plástico con un
grosor aproximado de 0,1 mm que
interaccionan con las muestras (soluto) por
enlaces de hidrógeno y por interacciones
intermoleculares de tipo dipolo-dipolo. Por
otro lado, presenta la fase móvil es
proporcionada por un eluyente (disolvente)
cuya función es arrastrar los compuestos
de la mezcla y los disolventes mayormente
empleados son: el hexano,
tetraclorometano, cloroformo,
diclorometano acetato de etilo y acetona.
La respectiva metodología correspondiente
es:
1. Usar como base una mezcla de
sustancias, en donde se quiere verificar si
presentan compuestos polares y no
polares.
2. Se corta con un bisturí las placas
cromatográficas correspondientes al
número de muestras a analizar.
3. Se marca con lápiz y a una distancia de
1cm del borde inferior de la placa y se
marcan de forma separada (a 1cm de
distancia) los puntos correspondientes a las
muestras a analizar y del patrón a
comparar.
4. Con un capilar colocar las respectivas
muestras en pequeñas cantidades en los
puntos correspondientes
5. Se introduce la placa en el tanque
cromatográfico de forma que el líquido no
moje la línea y posteriormente cerrar la
tapa para que no se evapore la fase móvil y
se deja alrededor de 30 minutos (el tiempo
depende de la velocidad del corrido y de la
naturaleza de la muestra).
6. Se retira la placa y se marca el punto
alcanzado por la fase móvil y se secan con
aire caliente (se puede usar un secador)
hasta que no haya olor de reactivo.
7. Analizar los resultados de la placa
mediante la visualización de manchas
correspondientes a cada compuesto. Si no
son visibles, se pueden visualizar mediante
técnicas de revelado como el uso agentes
reveladores como la ninhidrina
(aminoácidos), 2,4 - dinitrofenilhidracina
(para aldehídos y cetonas), verde de
bromocresol (para ácidos carboxílicos),
entre otros y la visualización de los
compuestos por luz ultravioleta (254 nm).
8. La posición y distancia de la macha de
interés se analiza mediante la siguiente
fórmula:
MATERIAL Y REACTIVOS.
Placas de sílica Gel (10 X 3 cm) 5 por
grupo
Vasos de precipitado de 250 mL (12)
Capilares (6 por grupo) (36)
Probeta de 100 mL (2)
Probeta de 10 mL (6)
Pipetas Pasteur (6)
Cámara y Lámpara de luz UV
Papel para cubrir las cámaras (Vinipel)
Pinzas
Parte 1.
Naranja de metilo, 5 mL SLN 0,5% en
EtOH
Azul de metileno, 5 mL SLN 0,5% en en
EtOH
Rodamina, 5 mL SLN 0,5% en en EtOH
5 mL de una mezcla 1/1 Sln de rodamina y
azul de metileno
5 mL de una mezcla 1/1 Sln de Naranja de Sln Colesterol, 1 % CHCl 3 ( 5 mL)
metilo y azul de metileno 5 mL de una mezcla 1/1 Sln de Trifenil
5 mL de una mezcla 1/1 Sln de Naranja de fosfina y colesterol
metilo y rodamina 5 mL de una mezcla 1/1 Sln de
Agua destilada benzofenona y colesterol
Etanol 5 mL de una mezcla 1/1 Sln de Trifenil
Parte 2. fosfina y benzofenona
Sln Trifenil fosfina, 0,5% en CHCl 3 ( 5 Hexano, Éter etílico
mL) Hexano/éter etílico, 1/1
Sln Benzofenona, 0,5% CHCl 3 ( 5 mL)

FICHAS DE SEGURIDAD
HEXANO

n- Hexano

COMPOSICION / INFORMACION DE Nombre del producto: n-Hexano

INGREDIENTES Sinónimo: Hexano.
Fórmula química: C₆H₁₄
n-Hexano Peso Molecular: 86,18 g /mol

C: 83.62 %, H: 16.38 %.

PROPIEDADES FISICAS Y QUIMICAS

Apariencia y color: Incoloro

Olor: Destilados de petróleo
Viscosidad dinámica: 0,326 mPa.s a 20 °C
Punto de fusión: -95 °C / -139 °F
Solubilidad en agua: 0,0095 g/l a 20 °C
Densidad: 0,66 g/cm³ a 20 °C
Densidad relativa del vapor: 2,79
pH: no aplicable
Presión de vapor: 160 hPa a 20 °C

ESTABILIDAD Y REACTIVIDAD

Estabilidad: El material es estable bajo condiciones ambientales normales y en

condiciones previsibles de temperatura y presión durante su almacenamiento y
manipulación
Productos de descomposición:Productos de combustión peligrosos
Condiciones a evitar: Conservar alejado del calor.

USOS: Forma parte de la gasolina de automóviles y es utilizado en la extracción de aceite

de semillas, como disolvente en reacciones de polimerización y en la formulación de
algunos productos adhesivos, lacas, cementos y pinturas. También se utiliza como
desnaturalizante de alcohol y en termómetros para temperaturas bajas, en lugar de
mercurio. Por último, en el laboratorio se usa como disolvente y como materia prima en
síntesis.

CLASIFICACIÓN SGA DE SUSTANCIA / MEZCLA

Puede ser mortal en caso de ingestión y penetración en las vías respiratorias

Se sospecha que perjudica a la fertilidad.
Líquido y vapores muy inflamables
Puede ser mortal en caso de ingestión y penetración en las vías respiratorias
Provoca irritación cutánea
Puede provocar somnolencia o vértigo
Tóxico para los organismos acuáticos, con efectos nocivos duraderos

IDENTIFICACIÓN DE LOS RIESGOS

Enjuagarse la boca. NO provocar el vómito.

Ingestión En caso de accidente o malestar, acudase
inmediatamente al médico (si es posible,
mostrar la etiqueta).

Aclarar cuidadosamente con agua durante

varios minutos. Si aparece malestar o en
Contacto con los ojos: caso de duda consultar a un médico.

Si respira con dificultad, transportar a la

Inhalación víctima al exterior y mantenerla en reposo
en una posición confortable para respirar.
En caso de respiración irregular o de paro
respiratorio, buscar asistencia médica
inmediatamente y disponerse a tomar
medidas de primeros auxilios.

Aclararse la piel con agua/ducharse. En caso

Contacto con la piel: de irritaciones cutáneas, consultar a un
dermatólogo.

ETANOL

COMPOSICION / INFORMACION DE Nombre del producto: Etanol

INGREDIENTES Sinónimo: Bioetanol
Fórmula química: C₂H₆O
Etanol Peso Molecular: 46,07 g /mol

C: 52.13 %, H: 13.15 %. C 34.72%

 PROPIEDADES FISICAS Y QUIMICAS

Estado físico: líquido Apariencia y color: Incoloro Olor: Alcohol o parecido

Viscosidad cinemática 1,519 mm²/s a 20 °C Punto de fusión: -114 °C
Punto de ebullición: 78 °C a 1.013 hPa Hidrosolubilidad ≥1.000 g /l a 20 °C (ECHA)
Densidad: 0,79 g /cm³ a 20 °C pH: 7 (en solución acuosa: 10 g /l , 20 °C)
Presión de vapor: 59 hPa a 20 C

ESTABILIDAD Y REACTIVIDAD

Reactividad: Riesgo de ignición. Los vapores pueden formar con aire una mezcla
explosiva. Puede formar peróxidos explosivos.
Estabilidad química: El material es estable bajo condiciones ambientales normales y en
condiciones previsibles de temperatura y presión durante su almacenamiento y
manipulación. Esta sustancia contiene un estabilizante.
Posibilidad de reacciones peligrosas: Nitrato, Percloratos, Peróxidos, Ácido nítrico,
Oxígeno, Ácido sulfúrico, Muy comburente, Óxidos de nitrógeno (NOx), Peróxido de
hidrógeno
Condiciones que deben evitarse: Radiación UV/luz solar. Mantener alejado de fuentes de
calor. No fumar. Proteger de la humedad.
Materiales incompatibles: Artículos de caucho, diferentes plásticos

CLASIFICACIÓN SGA DE SUSTANCIA / MEZCLA

Líquido y vapores muy inflamables

Provoca irritación ocular grave

IDENTIFICACIÓN DE LOS RIESGOS

Enjuagarse la boca. Llamar a un médico si

Ingestión la persona se encuentra mal.

Mantener separados los párpados y enjuagar

con abundante agua limpia y fresca por lo
Contacto con los ojos: menos durante 10 minutos. En caso de
irritación ocular consultar al oculista.

Proporcionar aire fresco. Si aparece

Inhalación malestar o en caso de duda consultar a un
médico.

Aclararse la piel con agua/ducharse. Si

Contacto con la piel: aparece malestar o en caso de duda
consultar a un médico.
ETER ETÍLICO
ETANOL

COMPOSICION / INFORMACION DE Nombre del producto: Éter etílico

INGREDIENTES Sinónimo: Dietileter
ETER ETÍLICO Fórmula química: C₄H₁₀O
C: 64.81 %; H: 13.60 % y O: 21.59 % Peso Molecular: 74,12 g /mol

PROPIEDADES FISICAS Y QUIMICAS

Estado físico: líquido Apariencia y color: Incoloro Olor: Alcohol o parecido

Viscosidad cinemática: 0,331 mm²/s a 293,2 K Punto de fusión: -116 °C Punto de
ebullición: 34,58 – 34,59 °C a 760 mmHg Hidrosolubilidad ≥1.000 g /l a 20 °C (ECHA)
Densidad: 0,71 g /cm³ a 20 °C Presión de vapor: 58,96 kPa a 293,2 K

ESTABILIDAD Y REACTIVIDAD

Reactividad:Esta es una sustancia reactiva. Riesgo de ignición. Los vapores pueden

formar mezclas explosivas con el aire.
En caso de calentamiento: Riesgo de ignición.
Estabilidad química: El material es estable bajo condiciones ambientales normales y en
condiciones previsibles de temperatura y presión durante su almacenamiento y
manipulación.
Condiciones que deben evitarse: Mantener alejado del calor, de superficies calientes, de
chispas, de llamas abiertas y de cualquier otra fuente de ignición. No fumar.
Materiales incompatibles: No hay información adicional.
Productos de descomposición peligrosos: Productos de combustión peligrosos

CLASIFICACIÓN SGA DE SUSTANCIA / MEZCLA

Líquido y vapores muy inflamables

Provoca irritación ocular grave
Puede provocar somnolencia o vértigo

IDENTIFICACIÓN DE LOS RIESGOS

Enjuagarse la boca. Llamar a un médico si

Ingestión la persona se encuentra mal.

Aclarar cuidadosamente con agua durante

varios minutos. Si aparece malestar o en
Contacto con los ojos: caso de duda consultar a un médico..

Proporcionar aire fresco. Si aparece

 Inhalación malestar o en caso de duda consultar a un
médico.

Enjuáguese la boca con agua (solamente si

Contacto con la piel: la persona está consciente). Llamar a un
médico. .

DIAGRAMAS DE FLUJO
Parte 1
Parte 2

Tablas de resultados:
 Muestra Punto Inicial Distancia Rf
Recorrida

Muestra Punto Inicial Distancia Rf

Recorrida

Hexano

Eter

Mezcla 1:1

Cuestionario.
1.Dé la composición y características de la sílica gel utilizada en la experiencia
RTA:La sílica gel o Dióxido de silicio(SiO2) lo utilizamos principalmente en este montaje
como absorbentes , capaz de retener componentes polares es perfecto para esta práctica
experimental, este material sintetizado a partir del Silicato de sodio(Na2SiO3),este aunque su
nombre indica gel, en realidad es un sólido utilizado para la absorción de humedad presente
en cajas de ropa, mochilas entre otros.

2.Qué relación de polaridad debe existir entre el adsorbente, eluyente y la muestra, para
obtener una óptima separación.

RTA: deben ser polares ya que el absorbente es polar, y es necesario para que la muestra se
mueva por el absorbente de una manera óptima.

3.Indique para cada caso las estructuras de las muestras que utilizará.
naranja de metilo azul de metileno rodamina

Hexano Éter etílico

4. ¿Por qué se dice que el TLC es un criterio parcial y no total de identificación?

RTA: es un criterio parcial y no total, ya que algunos compuestos pueden tener un Rf muy
parecido o cercano.
5) ¿Cuál será el resultado de los siguientes errores en cromatografía en capa fina?

a) Aplicación de solución muy concentrada.

RTA: Puede disolver los compuestos en lugar de arrastrarlos.

b) Utilizar eluyente de alta polaridad.

RTA: Si el disolvente es muy polar la elución será muy rápida y generalmente habrá poca
separación de los componentes de la mezcla.