ROGELIO ARMANDO ARIAS MARQUEZ INGENIERÍA BIOQUÍMICA

B13301089 9no SEMESTRE ITVH

INGENIERÍA DE BIORREACTORES
DR. JUAN MANUEL SALTIJERAL URRIETA

ACTIVIDAD 3 “​Métodos de medición del Kla y Ley de Henry”

INSTRUCCIONES: Aprendizaje basado en investigación.

En un editor de texto investigue los métodos que existen de manera
experimental para medir el coeficiente de transferencia de masa en
Biorreactores aireados Kla.
En el mismo trabajo investigue el principio de la Ley de Henry y su
fórmula de cálculo.

Métodos de medición del Kla

La determinación de k​La ​en biorreactores es esencial para establecer la

eficiencia de la aireación y para cuantificar los efectos de las variables de
operación en la provisión de oxígeno disuelto. Diferentes métodos se han
desarrollado para determinar la tasa de transferencia de oxígeno en
biorreactores y la selección de un método en particular depende de distintos
factores:
1. Los sistemas de aireación y de homogeneización utilizados.
2. El tipo de biorreactor y su diseño mecánico.
3. La composición del medio de fermentación.
4. El posible efecto de la presencia del microorganismo.

El balance de masa para el oxígeno disuelto en una fase líquida bien

mezclada puede verse como:

dC/dt = OT R − OU R
Donde,
dC/dt = tasa de acumulación del oxígeno en la fase líquida, molxL-1xs-1
OTR = tasa de transferencia del oxígeno del gas al líquido, molxL-1xs-1
OUR = tasa de utilización del oxígeno por parte de los microorganismos,
molxL-1xs-1
 La OTR puede calcularse utilizando la ecuación N​o2 ​= J . a = k​L ​. a . ( C​A
- C​A,L​) mientras que la OUR puede ser expresada como q​02 . Cx, donde el
primer término corresponde a la tasa específica de consumo del
microorganismo empleado y el segundo a la concentración del
microorganismo en el medio.
Los métodos más comunes utilizados para medir la transferencia de
oxígeno en los bioprocesos microbianos pueden clasificarse dependiendo de
si la medición se realiza en ausencia de microorganismo con células muertas
o si se hace en presencia de biomasa que consume oxígeno durante el
periodo de medición.

MÉTODOS DE MEDICIÓN DEL K​L​a SIN CONSUMO BIOLÓGICO DE

OXÍGENO

En ausencia de biomasa, cuando se cuenta con células que no están

respirando o cuando no se están llevando a cabo reacciones bioquímicas,
OUR=0. En este caso la ecuación anterior puede simplificarse a:

Los métodos a continuación se basan en la ecuación anterior y las

técnicas para medir la concentración de oxígeno disuelto se dividen en dos
grupos: los métodos químicos y los métodos físicos.

Los métodos químicos.

Fueron los primeros en ser ampliamente aceptados. Sin embargo,

estos no se recomiendan para determinar los coeficientes volumétricos de
transferencia de masa en el caso de los biorreactores con burbujeadores
debido a los cambios en las propiedades fisicoquímicas de los líquidos,
principalmente los cambios en coalescencia, producidos por la adición de
químicos. Estos métodos pueden dar valores más altos que los reales debido
a que la tasa de absorción pueden engrandecerse por las reacciones
químicas rápidas que ocurren en la fase líquida si las condiciones
experimentales no se mantienen dentro de ciertos límites.

Métodos de Oxidación de sulfito de sodio: ​Este método se basa en la

reacción del sulfito de sodio, un agente reductor, con el oxígeno disuelto para
producir sulfato en la presencia de un catalizador ( usualmente un catión
divalente como Cu2+ o Co2+).
Método de absorción de CO2​ :​ Este método fue propuesto por Danckwerts
en 1966 y consiste en la absorción de dióxido de carbono en una disolución
alcalina.

Los métodos físicos

Emplean la respuesta de un sensor de oxígeno ante los cambios en la

concentración del gas dispersado en el medio bajo condiciones no
estacionarias. Estos métodos son actualmente los más comúnmente
utilizados para la estimación de la transferencia de oxígeno ya que se basan
en la medición de la concentración de oxígeno disuelto en el líquido durante
la absorción o desorción de oxígeno en la disolución.

Método dinámico: ​Este método analiza el cambio dinámico en la

concentración de oxígeno disuelto cuando ocurre un cambio rápido en la
concentración del gas de entrada.

MEDICIÓN DIRECTA DE LA TASA DE TRANSFERENCIA DE OXÍGENO

EN BIOPROCESOS

Análisis en fase gaseosa.

Este método utiliza un analizador de oxígeno gaseoso para medir la

concentración de oxígeno tanto en el flujo de gas a la entrada como a la
salida del biorreactor y un sensor para medir la concentración de oxígeno
disuelto en el líquido. Un balance de masa de oxígeno en estado estacionario
es el siguiente:

Donde F​in y F​out son las tasas de flujo molar de oxígeno medidas a la entrada
y la salida del biorreactor respectivamente y V es el volumen del biorreactor.
En el estado estacionario, la tasa de transferencia de oxígeno desde las
burbujas es igual a la tasa de consumo de oxígeno por parte de las células,
es decir:

Una vez que se determina la tasa de utilización de oxígeno a partir de

la medición de este en el gas de salida y al mismo tiempo se mide la
concentración de oxígeno disuelto en el medio, el k​L​a puede calcularse de
acuerdo a:

Esta técnica se basa en la medición de la concentración de oxígeno en

el aire de entrada como en el de salida y se requiere de un modelaje preciso
del mezclado en la fase gaseosa para la correcta interpretación de las
mediciones de la tasa de transferencia de oxígeno.

Otros métodos de medición de k​L​a

Se han propuesto otras técnicas para la medición del coeficiente

volumétrico de transferencia de masa las cuales mejoran ciertos aspectos de
los métodos clásicos. Algunos de ellos se basan en una reacción química
como por ejemplo la oxidación de hidracina propuesta por Onken en 1985 o la
biooxidación de catecol la cual forma un semialdehído 2-hidroximucónico y es
catalizada por la enzima catecol-2,3-dioxigenasa. Hill en 2006 elabora un
método que utiliza el cambio de pH producto de un constante burbujeo de
dióxido de carbono en un reactor bien mezclado. Si bien este método se
utiliza originalmente para la medición de la transferencia de masa del dióxido
de carbono, se puede correlacionar con la transferencia de oxígeno por medio
de la teoría de capa. Otros métodos consisten en la medición de la tasa de
crecimiento de un microorganismo estrictamente aerobio en condiciones
limitadas de oxígeno por un período de tiempo específico.

También existen técnicas para la determinación del coeficiente de

transferencia de masa basadas en métodos físicos. Carbajal en 2004 propone
el método del cambio dinámico de presión, en donde se mide el cambio en la
concentración de oxígeno disuelto cuando se cierra parcialmente la salida del
gas de un medio de cultivo para aumentar la presión parcial de oxígeno. Este
método tiene la ventaja sobre el método dinámico tradicional en el que en
ningún momento se priva a los microorganismos de oxígeno. Otra técnica es
conocida como el método dinámico con pulsos azarosos y consiste en la
generación de perturbaciones de corta duración en el aire de entrada al
biorreactor, conocidas como pulsos. Los pulsos pueden ser nitrógeno puro o
aire, por lo que la concentración del oxígeno disuelto varía al ocurrir cada
pulso y esto puede ayudar a determinar el k​L​a.
Ley de Henry

La ley de Henry fue formulada en 1803 por William Henry.

Enuncia que:

“A una temperatura constante, la cantidad de gas disuelta en un líquido

es directamente proporcional a la presión parcial que ejerce ese gas sobre el
líquido.”​

Matemáticamente se formula de la siguiente manera

donde:

es la presión parcial del gas.

es la concentración del gas (solubilidad).
es la constante de Henry, que depende de la naturaleza del gas, la
temperatura y el líquido.

Las unidades de la constante que dependen de las unidades elegidas para

expresar la concentración y la presión. Un ejemplo de la aplicación de esta
ley está dado por las precauciones que deben tomarse al volver a un buzo a
la superficie. Al disminuir la presión parcial de los distintos gases, disminuye
la solubilidad de los mismos en la sangre, con el consiguiente riesgo de una
eventual formación de burbujas. Para evitarlo, esta descompresión debe
efectuarse lentamente.