PRACTICA DE LABORATORIO No 1

RECONOCIMIENTO DE CARBOHIDRATOS

RAFAEL ARLEY VIEDA

20131181034

MARIA DEL PILAR SANTACRUZ GIL

20131181017

BIOQUIMICA

DAYSI MARGOTH BELTRAN CEPEDA

UNIVERSIDAD DISTRITAL FRANCISCO JÓSE DE CALDAS

FACULTAD DEL MEDIO AMBIENTE Y RECURSOS NATURALES

INGENIERIA SANITARIA

BOGOTÁ D.C

2014
 RECONOCIMIENTO DE CARBOHIDRATOS

RESUMEN
ABSTRACT
Los carbohidratos son biomoléculas, que
Carbohydrates are biomolecules that
contienen es sus estructuras grupos
contain functional groups are structures as
funcionales como aldehídos o cetonas
polyhydroxy aldehydes or ketones.
polihidroxilados. Los carbohidratos al
Carbohydrates to contain carbonyl and
contener grupos carbonilo e hidroxilo
hydroxyl groups present typical chemical
presentan propiedades y comportamiento
properties and behavior of these two
químico típico de estos dos grupos
functional groups, carbohydrates are
funcionales, los carbohidratos se
generally classified into monosaccharides
clasifican generalmente en monosacáridos
y polisacáridos (simples y complejos), los and polysaccharides (simple and
monosacáridos son carbohidratos que no complex), monosaccharides are
se pueden descomponer a compuestos carbohydrates that can not be
más simples por medio de hidrolisis, estos decomposed into simpler compounds by
a su vez se subdividen por el número de hydrolysis, these in turn are divided by
átomos de carbono y grupo que the number of carbon atoms in the group
contengan en: aldosas (aldehído) y containing aldoses (aldehyde) and ketoses
cetosas (cetona). Un polisacárido es un (ketone); a polysaccharide is a
carbohidrato que al hidrolizarse da dos o carbohydrate which upon hydrolysis
más unidades de monosacáridos .Los gives two or more monosaccharide units.
monosacáridos presentan reacciones The monosaccharides present
características de óxido-reducción como characteristic reactions as redox reactions
las reacciones con los reactivos de with reagents Tollens and Fehling,
Tollens y Fehling, la formación de osazones formation and training of
osazonas y la formación de furfurales. furfural.

Palabras claves: carbohidratos, Keywords: carbohydrates, chemical

propiedades químicas, clasificación, properties, classification, characteristic
reacciones características. reactions.
OBJETIVOS convierten en aquéllos, un carbohidrato
que no es hidrolizable a compuestos más
Objetivo general
simples, se denomina monosácarido. Un
Identificar mediante reacciones carbohidrato que por hidrólisis da dos
características el comportamiento moléculas de monosacárido se llama
químico de los carbohidratos, disacárido, mientras que el que da muchas
caracterizándolos en monosacáridos moléculas de monosacárido por hidrólisis
(aldosas o cetosas), en disacáridos o es un polisacárido.
polisacáridos.
Un monosacárido se puede clasificar más
Objetivos específicos precisamente: si contiene un grupo

Diferenciar mediante reacciones aldehído se le conoce como aldosa; si

cualitativas los monosacáridos de los contiene una función cetona es una

disacáridos y polisacáridos. cetosa. Según el número de átomos de

carbono que contenga, se conoce el
Reconocer y analizar las reacciones que
monosacárido como triosa, tetrosa,
se llevan en cada una de las pruebas de
pentosa, hexosa, y así sucesivamente.
Molish, Azúcares reductores, Barfoed,
Bial, Seliwanoff, Prueba del ácido Los carbohidratos que reducen los

músico, Formación de osazonas y Prueba reactivos de Fehling (o Benedict) y

de Wolhk en los carbohidratos. Tollens, se conocen como azúcares

Reconocer la capacidad oxido-reductora
de los monosacáridos.
Identificar los carbohidratos en una
muestra problema.
reductores. Todos los monosacáridos,
sean aldosas o cetosas, son azúcares
reductores, como lo son también la
mayoría de los disacáridos, siendo una
excepción importante la sacarosa (azúcar
de mesa común), la que no es reductora.

MARCO TEORICO
MATERIALES Y REACTIVOS
Los carbohidratos son  Una gradilla para tubos de ensayo
polihidroxialdehídos, polihidrixicetonas o  Tubos de ensayo (1= Blanco-
compuestos que por hidrolisis se Glucosa- y 2= Patrón-Fructosa)
 Alfa Naftol 10%. Formula:  C10H7O
 Ácido sulfúrico concentrado.  Galactosa 1%. Formula: C6H12O6
Formula : H2SO4  Reactivo de Benedict. Formula:
 Solución de almidón. Formula: CuSO4.5H2O/ CNa2O3/ CKNS
C6H10O5  Sacarosa. Formula : C12H22O11
 Ácido clorhídrico. Formula: HCl  Fructosa. Formula: C6H12O6
 Reactivo de lugol. Formula: I2 (1%)  Lactosa. Formula: C12H22O11
en equilibrio con KI (2%) en agua  Reactivo de Fehling.
destilada.
 RESULTADOS

Tabla 1 Reconocimiento de Carbohidratos Prueba de Molish

PRUEBA DE MOLISH ( C10H7O/ H2SO4 )
Compuesto Características Resultado
Sacarosa
C12H22O11

Se observó la aparición de dos capas, la

primera de color violeta y un precipitado de Positivo
color rojo

Fructosa
C6H12O6
Se observó la aparición de dos capas, la
primera de color violeta, el precipitado de
color rojo pero en mayor cantidad que la Positivo
presentada por la sacarosa

Tabla 2 Reconocimiento de Carbohidratos Prueba de Fehling

PRUEBA DE FEHLING
Compuesto Característica Resultado
Fructosa Precipitado rojo
Positivo
C6H12O6
Precipitado rojo
Sacarosa
Negativo
C12H22O11

Tabla 3 Reconocimiento de carbohidratos prueba de lugol o yodo

PRUEBA DE LUGOL : I2 (1%) en equilibrio con KI (2%) en agua destilada
Compuesto Característica Resultado
Almidón Coloración café-rojiza oscura Positivo
 C6H10O5
Tabla 4 Reconocimiento de carbohidratos reactivo de Tollens
PRUEBA CON EL REACTIVO DE TOLLENS
Compuesto Características Resultado
Fructosa Coloración rojiza
C6H12O6 Positivo

Sacarosa
C12H22O11 se mantiene la coloración Negativo
azul

Tabla 5 Reconocimiento de carbohidratos – reactivo de Benedict

PRUEBA CON EL REACTIVO DE BENEDICT
Compuesto Características resultado
Sacarosa No se produjo ningún Negativo
C12H22O11 cambio de coloración

Galactosa Se produjo un cambio de Positivo

C6H12O6 coloración del azul claro a
rosado evidenciando el
proceso de reducción
Tabla 6 Reconocimiento de carbohidratos- prueba de Barfoed
PRUEBA DE BARFOED
Compuesto Características Resultado
Sacarosa Coloración azul Negativo
C12H22O11

Fructosa Coloración azul Negativo

C6H12O6

Tabla 7 Reconocimiento de carbohidratos- prueba de Seliwanoff

PRUEBA DE SELIWANOFF
Compuesto Características Resultado
Sacarosa Coloración rosada clara Positivo
C12H22O11

Fructosa Coloración rosada intensa Positivo

C6H12O6

Tabla 8 Reconocimiento de carbohidratos- prueba de Bial

PRUEBA DE BIAL
Compuesto Características Resultados
Sacarosa Coloración anaranjado claro Negativo
C12H22O11
Fructosa Coloración anaranjado oscuro Negativo
C6H12O6

Tabla 9 Reconocimiento de carbohidratos- prueba del Ácido Músico

PRUEBA DEL ÁCIDO MÚSICO
Compuesto Características Resultado
Galactosa Se forman los cristales Positivo
C6H12O6

Sacarosa No se forman cristales Negativo

C12H22O11

Tabla 10 Reconocimiento de carbohidratos- formación de osazonas

FORMACION DE OSAZONAS
Compuesto Características Resultado
Galactosa Coloración amarilla y cristales Positivo
C6H12O6 del mismo color

Fructosa Coloración amarilla pero no Negativo

C6H12O6 aparecen cristales
Tabla 11 Reconocimiento de carbohidratos- Prueba para disacáridos
PRUEBA PARA DISCARIDOS – SACAROSA
Tubo con Características Resultado
HCl Coloración amarilla Positivo

NaOH Coloración ligera rosada Negativo

H2O Traslucido Negativo

Tabla 12 Reconocimiento de carbohidratos- Prueba para disacáridos

PRUEBA DE WOLHK
Compuesto Características Resultado
Lactosa Ligera capa superior rojiza Positiva
C12H22O11

Fructosa Traslucido Negativo

C6H12O6

ANALISIS DE RESULTADOS

Ensayo
Prueba de La reacción de la fructosa con el H 2SO4 concentrado, forma un furfural o
Molisch un derivado del furfural, que se reconoce con el alfa naftol por formación
de un color purpura violeta, el H2SO4 concentrado descompone el
carbohidrato presentándose una hidrolisis en los enlaces glucosidicos.
Este tipo de reacción es de adicción nucleofilica y de tipo SN1, en el cual
el H2SO4 concentrado presenta una hidrolisis de los enlaces glucosidicos y
con el alfa naftol se precipitan para dar una coloración violeta que es el
positivo para los hidratos de carbono.

Ilustración 1. Reacción del Monómero con el H 2 S O 4 concentrado

Ilustración 2 Reacción del derivado furfural con el Alfa naftol

Reactivo de En este ensayo se identifican los azucares reductores, todos los monómeros
Benedict contienen en sus extremos funciones químicas (Aldehídos y Cetonas) que pueden
reducir otras sustancias.
En la reacción con el reactivo de Benedict, la galactosa al ser una aldosa reduce
el complejo cúprico, desapareciendo el color azul intenso, por un color rojo
ladrillo que el cual es positivo para este ensayo.
La sacarosa es la unión por los dos extremos reductores de la glucosa y la
fructosa, por lo consiguiente no podrá efectuar esta reducción del ion cúprico.

Ilustración 3 Reacción de la glucosa con el Reactivo de Benedict

Reactivo de En presencia de agentes oxidantes, iones metálicos como el Cu+2, los
Fehling monosacáridos presentan varias reacciones de oxidación. Presentándose un
cambio de coloración a rojo ladrillo indicando la presencia de un azúcar reductor,
Para el ensayo con la sacarosa al ser esta la unión de los extremos nucleofilicos
de la glucosa y la fructosa no posee iones libres para formar la reacción de
reducción.

Ilustración 4 Reacción de los Carbohidratos con el Reactivo de Fehling

Reactivo de El ensayo con el reactivo de Tollens es una reacción de oxidación, en la cual se
Tollens identifica a las aldosas, ya que las cetosas no reaccionan. En la reacción el
reactivo de Tollens se oxida totalmente, y genera el espejo de plata, ya que el ion
de plata se reduce a plata elemental. Sin embargo la fructosa si reduce el reactivo
de Tollens, esto se debe a que la fructosa se isomeriza fácilmente en una mezcla
de aldosas (glucosa y manosa) en una disolución básica por una serie de
 desplazamiento tautomericos ceto-enol1.

Ilustración 5 Reacción de los Carbohidratos con el Reactivo de Tollens

Prueba de El reactivo de Barfoed es una prueba para distinguir entre monosacáridos y

Barfoed disacáridos, en nuestro ensayo el resultado no fue representativo ya que la
sacarosa que trabajamos no era la indicada, para esta prueba.
Teóricamente la velocidad de reacción al reducir el ion Cu+2 , por parte del
monómero debe ser más rápida que la del disacárido, Esta reacción está limitada
al tamaño de la molécula, siendo la reacción de los monómeros mucho más rápida
que los disacáridos

Ilustración 6 Reacción de los Carbohidratos con el Reactivo de Barfoed

Prueba de El yodo se introduce en las espiras de la molécula del almidona, por lo cual
lugol este toma una coloración oscura. El almidón es coloreado de azul en
presencia de Lugol, debido a una adsorción o fijación del I- 3sobre las
unidades de glucosa de la amilosa.

Prueba de Tanto las aldosas como las cetosas en presencia de ácidos minerales y en un
Seliwanoff medio caliente sufren procesos de deshidratación, lo cual da como producto un
anillo pentagonal de furfural o hidroximetilfurfural, según sea el monosacárido
pentosa o hexosa, los furfurales se condensas dando una coloración roja. Las
cetosas se deshidratan más rápido que las aldosas, lo cual permite
diferenciarlos. En la prueba de Seliwanoff la fructosa al ser una cetohexosa da
un resultado positivo, en cuanto a la sacarosa esta al contener fructosa da
también positivo si se deja correr el tiempo adecuado para que se efectué la
hidrolisis acida en donde la sacarosa libera fructosa.
 Ilustración 7. Reacción de las cetohexosas con el reactivo de Seliwanoff
Prueba de Bial Esta prueba se basa en la formación de furfural, al hacer reaccionar pentosas
con HCl y posteriormente con orcinol. El furfural es un aldehído electrofilico, en
presencia de ácido, adiciona fenoles (con pérdida de agua) produciendo
sustancias altamente coloreadas, las pentosas originan una coloración azul-
verde. En la prueba de Bial no se contó con la ribosa, procedimos a realizar la
prueba con fructosa y sacarosa. Tanto la fructosa como la sacarosa al no ser
pentosas no dan una coloración positiva, sin embargo las hexosas al reaccionar
con el reactivo de Bial originan una coloración verde, café o café-rojiza, razón
por lo cual en la fructosa se observó una coloración café –rojiza oscura y en la
sacarosa una coloración similar pero clara. Para la pentosas la reacción es:

Ilustración 8. Reacción de las pentosas con reactivo de Bial

Prueba del La prueba de ácido músico permite identificar la galactosa. El HNO 3 oxida tanto
ácido músico al grupo aldehído como al alcohólico primario para formar ácidos dicarboxilico,
el ácido músico insoluble se forma gracias a la oxidación de la galactosa, este
ácido dicarboxilico al ser insoluble precipita en forma de cristales.
 Ilustración 9. Reacción de la galactosa con HNO 3
Formación de Las aldosas y las cetosas al poseer un grupo aldehído y cetona respectivamente
osazonas pueden reaccionar con la fenilhidrazina para formar fenilhidrazonas, si se utiliza
un exceso de fenildidrazina se forma una osazona que contiene dos residuos de
fenilhidrazina por molécula, mientras que una tercera molécula del reactivo se
convierte en anilina y amoniaco1. La osazona formada por la galactosa (aldosa)
es insoluble y se presenta en forma de cristales amarillos.

Ilustración 9 . Formación de osazonas

Prueba para La sacarosa es un disacárido que carece de poder reductor, esto se debe a que
disacáridos no posee en la molécula un grupo aldehído o cetona en forma de
Sacarosa hemiacetálitica, el HCl hidroliza la sacarosa dando lugar a la glucosa y la
fructosa, sus monosacáridos integrantes. Al aplicar la prueba de Benedict y la de
Seliwanoff estas dan positivo. La hidrolisis acida de su enlace glicosidico permite
que sus mono sacáridos glucosa y fructosa (azucares reductores) reaccionen
con el reactivo de Benedict, por otro lado la glucosa y la fructosa en la prueba
de Seliwanoff también arroja un resultado positivo, a causa de las razones
Prueba de anteriormente expuestas (ver prueba de Seliwanoff).
La prueba de Wolhk permite identificar la lactosa. Lactosa es un azúcar
Wolhk
reductor, forma una osazona y existe en formas alfa y beta que mutarrotan., se
toma como resultado positivo la aparición de una coloración rojiza; en nuestra
muestra de lactosa se observó una ligera capa superior rojiza mientras que en
nuestro blanco no hubo ningún cambio.
hemiacetales otorgándoles la
capacidad de reducir.
CUESTIONARIO
3. Consulte las estructuras en forma
1. ¿Qué diferencia existe entre
azucares reductores y no abierta o cerrada de los

reductores? siguientes azucares y consulte de

donde se extraen o en donde
Los azucares reductores poseen un
abundan y para que se emplean
grupo carbonilo libre, lo cual les
cada una de ellas:
permite reducirse, en cambio en los
a) Manosa

azucares no reductores el grupo

carbonilo se encuentra combinado en
unión glicosidica, haciendo que estos
carezcan de capacidad reductora.

2. ¿cómo puede justificar el hecho de

que la glucosa, al igual que la
fructosa de prueba positiva para
azucares reductores?

Tanto la glucosa como la fructosa son

considerados azucares reductores, es
Forma abierta Forma
decir se oxidan fácilmente con
cerrada
oxidantes suaves, los dos poseen
carbonos libres en forma de
 La manosa se encuentra en las gomas
vegetales y es constituyente de muchas
c) Lactosa
proteínas.

b) Galactosa

Está presente en todas las leches de los

mamíferos. La lactosa representa una
fuente energética de fácil utilización y
favorece la absorción de calcio y
magnesio.

d) Fructosa

La galactosa es sintetizada por las

glándulas mamarias para producir lactosa,
que es un disacárido formado por la unión
de glucosa y galactosa, por tanto el mayor
aporte de galactosa en la nutrición
proviene de la ingesta de lactosa de la
leche. Es un monosacárido que se obtiene
en el intestino, por medio de la acción de
la enzima lactasa. se convierte en glucosa
en el hígado como aporte energético,
forma parte de los glucolípidos y
glucoproteínas de las membranas Se encuentra en los vegetales, las
celulares de las células sobre todo de las frutas, la miel, la hidrolisis del azúcar
neuronas de caña y de la inulina. El hígado la
 almacena en forma de glucógeno
también es convertida en glucosa y
utilizada por el organismo.

e) Almidón

Se encuentra en la cerveza, en los

granos de cebada, se puede obtener
por hidrolisis de almidón y
glucógeno. Se usa como edulcorante y
en jarabes.

Es un homopolisacárido de reserva
h) Ribosa
energética predominante en las plantas,
constituido por la unión de grandes
cantidades de monómeros de glucosa.El
almidón se encuentra en los amiloplastos de
las células vegetales, sobre todo en las
semillas, las raíces y los tallos, incluidos
los tubérculos.

f) Sacarosa

La fuente principal de la ribosa son

los ácidos nucleicos, es vital para los
elementos estructurales de los ácidos
nucleicos y de las coenzimas como
ATO, NAD+, NADP+,
flavoproteinas, intermediario en la via
Abundante en la frutas y vegetales, es
de las pentosas.
usado por la abejas para hacer miel, es
usada como edulcorante, fuente de CONCLUSIONES
energía y conservante.
Los carbohidratos al poseer en su
g) maltosa estructura aldehídos o cetonas,
presentan un comportamiento químico
ligado a los grupos funcionales de
 estos, como por ejemplo la capacidad
de oxidarse con agentes oxidantes 1. Morrison, J.Boyd, R. (1976). Química

suaves como el reactivo de fehling o orgánica: Bioquímica. Estados Unidos

de Tollens o la capacidad de formar 2. Morales. (2005)Reconocimiento de los

osazonas, además esta clase de monosacáridos, disacáridos y de los
reacciones permiten diferenciar polisacáridos, Universidad Nacional del

monosacáridos de disacáridos como la Callao, Lima-Perú

sacarosa. J. Ernesto Luquet. (2010). Bioquímica:

Carbohidratos, San Juan de Pasto
Los monosacáridos se diferencia de
3. Teijón, J.Garrido, A, Villaverde, C.
los disacáridos (sacarosa) por su
Blanco, M. Mendoza, C. Ramirez, J. (2005).
poder reductor, poder que es otorgado Fundamentos de Bioquímica Estructural:
por el carbono libre que posee, los Hidratos de Carbono. México, D.F.
monosacáridos a su vez se subdividen
4. Brown, L.Bursten, M. (2009). Química, La
en aldosas y cetosas, y en pentosas o
ciencia central: Carbohidratos. México, D.F.
hexosas, estos fueron identificados y
5. Wade L.G. (2004). Química Orgánica.
diferenciados mediante la prueba de
Madrid, España: Pearson Educación S.A.
Tollens, de Seliwanoff y de Bial, en
las que se evidencio la velocidad de
6. McMurry, John. Quimica organica.
deshidratación de las aldosas y
(2008) .CengageLearning Editores, S.A.
cetosas, y la formación de furfural o
hidroximetil furfural, según provenga
una pentosa o hexosa.

La sacarosa al hidrolizarse libera a sus

monosacáridos constituyentes: la
glucosa y la fructosa, debido a esto la
sacarosa presento resultados positivos
en la prueba para disacáridos y en la
prueba de Seliwanoff.

BIBLIOGRAFIA