BIOPROCESOS

Bioproceso: Cualquier operación que involucre la transformación en productos a partir de un sustrato determinado
mediante microorganismos, cultivos de células animales o vegetales o por moléculas derivadas de éstos, como las
enzimas.

Los procesos biotecnológicos basados en la acción de mo. como agentes transformadores dentro de sistemas
productivos a nivel industrial, están orientados a la producción de distintos productos tales como: enzimas,
vitaminas, aminoácidos, aditivos, antibióticos, proteínas, y otros productos de uso alimenticio y de salud para uso
diagnóstico o terapéutico.

Dentro de estos bioprocesos se destaca la aplicación en biotecnología industrial que combina conocimientos
científicos y tecnológicos en la intervención en la solución de problemas asociados a productos y procesos de
múltiples sectores de actividad: agropecuario, alimentos, textil, salud, celulosa y papel, medio ambiente, entre otros.

La utilización de estos bioprocesos reporta múltiples beneficios en simplificación de procesos, mejoras en la calidad
de los productos, menor impacto ambiental, y ahorro de costos.

Han permitido el desarrollo de nuevos productos. Por ejemplo, las tecnologías de ADN recombinante que han
permitido la producción de proteínas terapéuticas, que serían económicamente inviables de obtener por métodos
extractivos.

PRINCIPALES BIOPROCESOS INDUSTRIALES

 Producción de alimentos
 Industria textil
 Biotecnología sanitaria
 Industria del papel
 Medio ambiente
 Energía
 Industria química
 Agro
 Producción animal

PRODUCCIÓN DE ALIMENTOS

Los bioprocesos vinculados al sector de alimentos son los más antiguos y tradicionales tales como: procesos de
fermentación en productos panificados, bebidas alcohólicas (vino, cerveza) y lácteos (quesos, yogures).

Tienen una larga tradición de utilización y pueden ser mejorados utilizando métodos de ingeniería genética que
pueden mejorar parámetros de calidad sensorial, producir compuestos antimicrobianos, etc.

Enzimas naturales y recombinantes se aplican en procesos y productos alimenticios:

 Industria del almidón y del azúcar

 Fabricación de jarabes de glucosa y fructuosa de maíz y dextrosa
 Producción de quesos, para romper la caseína de la leche y permitir su coagulación, para resaltar el sabor y
para acelerar la maduración
 Elaboración de leche deslactosada
 Panificación, para blanquear la harina, facilitar la acción de la levadura, mejorar la estructura de la masas,
etc.

Clarificación de jugos de frutas, para evitar su turbidez

 Optimización del proceso de extracción y refinación de aceites

 Enología, para acelerar el tiempo de prensado, acelerar el proceso de maduración, la liberación de aromas, y
mejorar el color y sabor. Para remover la urea producto de la fermentación y contrarrestar los beta glucanos
producidos por Botrytis cinerea
  Industria cárnica para favorecer su tiernización, facilitar la remoción de la carne de los huesos y en la
producción de hidrolizados de proteínas
 Elaboración de cerveza, para evitar su enturbiamiento durante el almacenamiento

Los aportes de los bioprocesos y productos en la industria alimentaria incluyen:

 Productos con mayor valor nutricional y organoléptico

 Nuevos alimentos funcionales para la prevención de enfermedades según los diferentes grupos de
consumidores
 Nuevas fuentes de materias primas (algas, invertebrados, etc.) por medio de la introducción y expresión de
genes específicos que incrementan el contenido de sustancias de interés para la industria alimentaria
(pigmentos, proteínas, etc.)

Uso de biosensores para control de procesos (PH, detección de contaminantes, etc.)

Enzimas con características específicas (termorresistentes, mayor velocidad de reacción) para su utilización en
procesos de fermentación en distintos sectores

INDUSTRIA TEXTIL Y CURTIEMBRE

Uso de enzimas en la industria textil ha tenido un alto impacto en los procesos productivos, en la producción de
hebra; el hilado, tejido; acabado y fabricación del producto.

En la industria textil las enzimas se pueden aplicar para al tratamiento de fibras proteicas naturales (lana y seda),
como en fibras celulósicas (algodón, lino y cáñamo) y en fibras sintéticas.

Amilasas: Utilizadas para el tratamiento de la fibra. Actúan extrayendo el almidón que la recubre (proceso llamado
desengomado)

Pectinasas: extracción pectinas de la pared de las células primarias del algodón

Lipasas: desgrasado de las fibras

Catalasas: descomponer en oxígeno y agua el peróxido de hidrógeno residual después del blanqueo de las fibras de
algodón

Peroxidasa: elimina restos de peróxido de hidrógeno utilizados en la etapa de blanqueo

Celulasas: para hacer a los tejidos más lisos y blandos

Lacasas: para la oxidación de colorantes fenólicos utilizados en la preparación de telas para jeans.

En elaboración del cuero las enzimas son utilizadas en los procesos de remojo, pelambre enzimático y rendido o
purga (lipasas, proteasas)

Nutrición y salud: Solucionar problemas específicos que afectan a grupos de personas, como es el caso de
determinadas alergias o enfermos diabéticos

Diagnóstico: Nuevas técnicas para diagnóstico clínico para el remplazo de las pruebas serológicas clásicas, y nuevos
métodos para el diagnóstico de enfermedades infecciosas y genéticas:

 Técnicas de base inmunológica basadas en la reacción antígeno-cuerpo. Ej: producción de anticuerpos

monoclonales, por su especificidad se usan en diagnóstico por técnica ELISA, citometria de flujo,
inmunofluorescencia, etc.)
 Técnicas de base genética (PCR) para amplificar pequeñas fracciones de ADN para su posterior análisis

Biofármacos: Con función de reemplazo de moléculas naturales tales como: hormonas, interferón, factores de
coagulación sanguínea, etc. y medicamentos de diseño como la estreptoquinasa, la uroquinasa, los anticuerpos
monoclonales y los antígenos para inmunoterapias.

Vacunas: vacunas recombinantes y vacunas de ADN.

Vacunas recombinantes: Genes clonados que codifican para proteínas que provocan respuesta inmune se
introducen en un huésped alternativo no patógeno (bacterias, levaduras o células de mamíferos) para producción. •
Vacunas de

ADN desnudo: Se utiliza una porción de ADN producido y purificado que codifica para la proteína que estimula la
respuesta inmune.

Nuevos antibióticos: Producción de antibióticos y sustancias con efecto antibiótico a partir de cultivos de m.o,
células de plantas y animales con relevancia clínica

BIOPROCESOS VINCULADOS A LA INDUSTRIA DEL PAPEL

Tecnología enzimática en la industria de pulpa y papel para mejorar el producto y procesos, con reducción de costos
y disminución del impacto ambiental

 La reducción del uso de agentes químicos contaminantes en la etapa de pre-blanqueo (xilanasas) •

 Blanqueamiento de pulpa (xilanasas; celulasas)
 Reciclado de fibras. (endoglucanasas para mejorar la velocidad de drenaje de fibras recicladas; celulasas para
incrementar la densidad de la hoja de papel y reducir su rusticidad; alfa amilasas para mejorar las
propiedades del drenaje).
 Disminución de residuos y contaminantes en el proceso de reciclado (producción de esterasas, amilasas y
proteasas para la remoción del lodo; lipasas para controlar la acumulación de lodo)
 Modificación de fibras (celulasas para incrementar la flexibilidad de las fibras, celulasas, xilanasas y lacasas
para incrementar la densidad de las hojas, etc.)
 Tratamiento de efluentes de la industria (enzimas y biodispersantes)

Bioprocesos vinculados al medio ambiente

“Biotecnologías blancas”: buscan reemplazar las tecnologías contaminantes en procesos industriales disminuyendo
a la vez la emisión de residuos. Las tecnologías enzimáticas permiten reemplazar o reducir la utilización de sustancias
químicas agresivas con el ambiente

Biorremediación: Utilización de microorganismos, enzimas, hongos o plantas especializados capaces de degradar

deshechos peligrosos para remover los contaminantes orgánicos (efluentes y residuos sólidos domésticos e
industriales, petróleo, pesticidas, etc.), inorgánicos (mercurio, plomo, cobre, cianuros, etc.) y gaseosos (metanos,
compuestos volátiles, etc.) del medio ambiente.

A partir de la modificación genética es posible incrementar su capacidad de degradación de los contaminantes

BIOPROCESOS Y ENERGÍA

Producción de energía a partir de biomasa para generar fuentes de energías limpias.

 Bioetanol: Acción fermentativa de las levaduras sobre un sustrato adecuado. Con ingeniería genética se
obtiene m.o. más productivos y tolerantes al etanol, o capaces de fermentar diferentes materias primas.
 Biodiesel: Transformación química de aceites vegetales. El biodiesel es un combustible formado por ésteres
(etílicos o metílicos) producidos a partir de la reacción química entre aceites vegetales y el alcohol.
 Biogas: El gas producido por la digestión microbiana de la materia orgánica en un biorreactor (o biodigestor)
y puede ser usado como fuente de energía térmica, eléctrica o como combustible. La biodigestión se
desarrolla sobre residuos rurales, agro-industriales, domésticos, municipales y sobre plantas. El biogas se usa
directamente o puede almacenarse para consumo doméstico y encendido de motores de automóviles.

BIOPROCESOS y QUÍMICA

 Remplaza la síntesis química por m.o capaces de realizar la secuencia de reacciones necesarias entre el
sustrato y el producto final.
 Se usa en procesos de producción farmacéutica, agroquímica, de aditivos alimentarios, aminoácidos,
vitaminas y enzimas.
  Mejoramiento de las cepas industriales por ingeniería genética permite aumentar la eficiencia de los
procesos y obtener productos nuevos.

Ej.: Los plásticos convencionales representan un problema ambiental porque se obtienen a partir de combustibles
fósiles y no son biodegradables. Desarrollo de plásticos biodegradables a partir de materias primas renovables,
derivadas de plantas y bacterias (plásticos a partir de almidón, bacterias o plantas modificadas genéticamente)

BIOPROCESOS CON PLANTAS

Biocontrol: Control biológico de plagas y enfermedades incluyen la utilización de mo. como Azetobacter, bacterias
del género Bacillus y Streptomyces que compiten por los nutrientes con los patógenos u otorgan resistencia a las
plantas, por su capacidad de producir sustancias con propiedades antimicrobianas.

Bacillus thuringiensis (BT) produce cristales constituidos por proteínas que tienen propiedades insecticidas. Estas
endotoxinas forman parte de formulaciones comerciales de bioinsecticidas.

Biofábricas: Plantas desarrolladas para producir fármacos, vacunas y plásticos. Ej.: producción de anticuerpos
monoclonales humanos para combatir el virus de la hepatitis B (VHB) a partir de células transgénicas de la planta del
tabaco

BIOPROCESOS USANDO ANIMALES

Producción de moléculas de interés para diferentes industrias (farmacéutica, alimenticia y química)

Proteínas recombinantes de interés farmacológico a partir de la leche de animales transgénicos de granja (ovejas,
vacas, cerdos, cabras, etc.). Ej.: ovejas transgénicas que producen la proteína alfa1proteinasa y factores de
coagulación VII y IX. Vacas que producen hormona de crecimiento humano.

Suplementación con enzimas (amilasas, betaglucanasas, xylanasas) para mejorar la digestibilidad de las mezclas
nutricionales para animales. Empleo de fitasas exógenas para mejorar la biodisponibilidad de fósforo en las dietas.

ETAPAS GENERALES DE UN BIOPROCESO

Un bioproceso está compuesto de tres etapas principales:

 Preparación de la materia prima: para llevar a cabo las biotransformaciones (tamizado, reducción de
tamaño, hidrólisis y otras operaciones comunes a procesos industriales). Incluye operaciones como la
formulación de los medios de cultivo y la esterilización.

Bioreacción: Se producen las transformaciones del sustrato para convertirlo en biomasa o en biomasa más
metabolitos primarios o secundarios. Se emplean bioreactores o fermentadores de diferentes tipos y volúmenes
desde la escala de laboratorio hasta nivel industrial.

Tratamiento de los productos de la bioreacción donde se realizan las operaciones de separación mecánica,
extracción, concentración y purificación del producto.
Fermentación

Cualquier proceso para la producción de un determinado producto mediante el cultivo de biomasa de un mo.

5 clases grupos de fermentaciones importantes a nivel industrial:

 Producto mo es la biomasa
 Producto mo son las enzimas
 Producto mo son los metabolitos
 Productos recombinantes
 Modificación de un compuesto que es agregado a la fermentación-transformación del proceso

Producción de Biomasa

2 grandes procesos:

 Producción de levaduras para panificación

 Producción de células para alimentación humana y animal (proteínas unicelulares)
Producción de enzimas microbianas

 Distintas enzimas producidas a través de plantas, animales y mo.

 Ventajas de las enzimas de mo es la gran producción que se puede obtener mediante fermentación
(mejoramiento con ADN recombinante)
Producción de metabolitos microbianos

Metabolitos según la fase de crecimiento

En fase log metabolitos esenciales para el crecimiento celular: metabolitos primarios (aminoácidos, nucleótidos,
proteínas, ácidos nucleicos, lípidos, carbohidratos) → Mejoramiento con recombinantes → En fase estacionaria
metabolitos no esenciales para el metabolismo: metabolitos secundarios

Metabolitos primarios vs. secundarios

Metabolismo primario Metabolismo secundario

Productos de metabolismo general
Ampliamente distribuidos en plantas y
microorganismos
Indispensables para la vida
Aminoácidos de proteínas, monosacáridos, lípidos,
ácidos derivados del ciclo de los ácidos tricarboxilados,
glúcidos, etc.
Productos del metabolismo especial
Biosintetizados a partir del metabolismo primario
Distribución restringida a ciertas plantas,
microorganismos
Distribución taxonómica restringida (a veces
característico de un genero dado o de una especie)
No indispensable para la vida
Alcaloides, terpenos, flavonoides, etc.

PROCESOS DE TRANSFORMACION

 Convertir un compuesto en una estructura relacionada

 Proceso microbiano es más específico que el químico
 Opera a relativamente baja temp. y presión y sin la catálisis de agentes contaminantes
 El más conocido es el proceso de producción de vinagre (pero hay otros de valor agregado como esteroides,
antibióticos y prostanglandinas)
 Transformación a través de enzimas o células inmovilizadas

INGENIERIA METABOLICA

 La versatilidad del metabolismo microbiano ofrece la posibilidad de obtener una gran variedad de
metabolitos de interés biotecnológico.
 El análisis de flujos metabólicos basado en marcación con sustratos que contienen 13C se ha convertido en
una importante herramienta de análisis aplicada en Ingeniería Metabólica, y permite la cuantificación de los
flujos intracelulares del metabolismo central de un mo. proveyendo una visión completa del mismo.
 El conjunto de metodologías utilizadas para este tipo de análisis ha evolucionado considerablemente en los
últimos años y la introducción de nuevas técnicas ha permitido la implementación de análisis de flujos
metabólicos en períodos de tiempo relativamente cortos.
  La redundancia de enzimas individuales y de caminos metabólicos completos en numerosas especies
bacterianas indica la flexibilidad del metabolismo mo.
 Dado que estas vías metabólicas son activas solamente bajo ciertas condiciones específicas, en cada
ambiente o condición de crecimiento opera una determinada distribución de flujos metabólicos que permite
a la célula acoplar la generación de energía y el catabolismo de la fuente de carbono con los requerimientos
anabólicos para alcanzar un crecimiento óptimo.
Por este motivo, conocer, identificar, y, consecuentemente, manipular las vías metabólicas activas en
distintas condiciones de crecimiento es un requerimiento esencial para el diseño de bioprocesos destinados
a la obtención biotecnológica de productos derivados del metabolismo microbiano.
 Obtención de fenotipos industriales han evolucionado hacia estrategias más sistemáticas.
 Tradicionalmente, el fenotipo de los mo. utilizados en bioprocesos industriales fue consecuencia de un
programa de desarrollo que típicamente incluye varios ciclos de mutagénesis al azar y selección, lo cual
lógicamente trae aparejados cambios a nivel molecular y celular que no pueden ser predichos con exactitud.
 Ing. Metabólica permite estudio más sistemático.
 Expresión de ciertos genes y la concentración intracelular de proteínas y metabolitos proveen información
importante acerca del comportamiento de la red metabólica.
 Pero hay limitaciones inherentes a esta metodología para la descripción del fenotipo celular debido a la falta
de información que integre estos parámetros y los correlacione para una comprensión holística del
metabolismo.
 Otro problema es que se ignora el bioproceso in toto, es decir, desde el diseño, construcción, y mejora de la
cepa hasta el cultivo de la misma en un biorreactor.
 Los flujos metabólicos es una forma de representar el fenotipo de una célula como resultado de la
interacción entre varios componentes celulares; los flujos observados reflejan las consecuencias conjuntas
de los procesos de transcripción, traducción, y actividad enzimática, además de los procesos regulatorios
que los controlan.
 La cuantificación de estos flujos in vivo es de especial importancia en el contexto de la fisiología celular para
implementar estrategias efectivas de Ingeniería Metabólica
 A futuro la integración de las tecnologías disponibles para el análisis del comportamiento metabólico,
permitirá la comprensión de la dinámica celular in vivo y conducirán al desarrollo eficaz y racional de
bioprocesos industriales.
 Actualmente estas metodologías están comenzando a ser utilizadas durante el desarrollo de procesos
biotecnológicos, pero aún así se recurre a las técnicas clásicas de mejora y selección para la mayoría de los
protocolos de obtención de fenotipos industriales.
 La elucidación de la distribución de flujos metabólicos in situ permitiría tomar acciones correctivas del
bioproceso e indudablemente conduciría a una mejora del mismo.
 Aún está en fase de desarrollo temprana

ETAPAS GENERALES DE UN BIOPROCESO

Un bioproceso está compuesto de tres etapas principales:

 Preparación de la materia prima: para llevar a cabo las biotransformaciones (tamizado, reducción de
tamaño, hidrólisis y otras operaciones comunes a procesos industriales). Incluye operaciones como la
formulación de los medios de cultivo y la esterilización.

Bioreacción: Se producen las transformaciones del sustrato para convertirlo en biomasa o en biomasa más
metabolitos primarios o secundarios. Se emplean bioreactores o fermentadores de diferentes tipos y volúmenes
desde la escala de laboratorio hasta nivel industrial.

Tratamiento de los productos de la bioreacción donde se realizan las operaciones de separación mecánica,
extracción, concentración y purificación del producto.

Fase pre fermentación:

 Formulación del medio de cultivo durante el desarrollo del inóculo y en la producción de fermentación
  Esterilización del medio, fermentador y demás equipamiento
 Obtención de un cultivo puro en cantidad que permita la inoculación del fermentador
 El crecimiento del mo. en fermentador en óptimas condiciones para la producción del producto

FASE POST-FERMENTACION:

 Extracción del producto y purificación

 Eliminación de los efluentes obtenidos del bioproceso