Benemérita Universidad Autónoma de Puebla

Lic. Químico Farmacobiólogo

Microbiología Laboratorio

Cuestionario. Práctica tinciones

Erick Saúl Enriquez Basilio

201842283

Dra. María de la Cruz Meneses Sánchez

Cuestionario

1. ¿Qué es un frotis y para qué se utiliza?

Se denomina frotis a la extensión que se realiza sobre un portaobjetos de una muestra o
cultivo con objeto de separar lo más posible los microorganismos, ya que si aparecen
agrupados en la preparación es muy difícil obtener una imagen clara y nítida. Este frotis
debe ser posteriormente fijado al vidrio del portaobjetos para poder aplicar los métodos
habituales de tinción que permiten la observación al microscopio de las bacterias sin que la
muestra sea arrastrada en los sucesivos lavados con la finalidad de realizar un análisis
clínico.

2. ¿Qué es un colorante? ¿Cómo está constituido? ¿Cómo es que se combina con los
diferentes componentes celulares?
Los colorantes son sustancias de origen químico o biológico, generalmente tintes,
pigmentos, reactivos u otros compuestos, empleados en la coloración de tejidos
microorganismos para exámenes microscópicos, debiendo tener al menos, un grupo
cromóforo que le proporcione la propiedad de teñir.
La molécula de un colorante tiene normalmente dos componentes importantes: uno que
aporta el color, denominado cromógeno, y otro que posibilita la unión a elementos del
tejido denominado auxocromo. El cromóforo es la organización molecular dentro del
cromógeno responsable de la absorción de un espectro determinado de longitudes de onda.
El auxocromo que se une al cromógeno puede influir en su coloración y muchos colorantes
tienen más de un grupo auxocrómico. El auxocromo puede ser un grupo ionizable, un grupo
que reacciona covalentemente con iones metálicos (mordientes) o puede reaccionar
covalentemente con el sustrato, en este caso el tejido. Los colorantes son normalmente
hidrosolubles, aunque hay colorantes que carecen de grupos ionizables y sirven para teñir
sustancias grasas, como gotas de lípidos.
La mayoría de los colorantes son compuestos orgánicos que tienen alguna afinidad
específica por los materiales celulares. Muchos colorantes utilizados con frecuencia son
moléculas cargadas positivamente (cationes) y se combinan con intensidad con los
constituyentes celulares cargados negativamente, tales como los ácidos nucleicos y los
polisacáridos ácidos.
Otros colorantes son moléculas cargadas negativameute (aniones) y se combinan con los
constituyentes celulares cargados positivamente, tales como muchas proteínas.
Otro grupo de colorantes son sustancias liposolubles; los colorantes de este grupo se
combinan con los materiales lipídicos de la célula, usándose a menudo para revelar la
localización de las gotículas o depósitos de grasa. 
3. ¿Qué factores intervienen para que los colorantes se combinen con los componentes
celulares?
Tipos de colorante
Casi todos los colorantes son sales, compuestos formados por iones cargados.
Colorantes básicos: Son aquellos en los cuales el agente que tiñe es el ión cargado
positivamente (el cromóforo) y se combinan con los componentes acidos de la célula como
ADN y ARN.
Colorantes acidos: Son aquellos en los que el ión está cargado positivamente se combina
con los componentes básicos de la célula, como el citoplasma; es decir se combinan con los
componentes celulares en función de sus respectivas cargas; por lo tanto, los factores como
fuerza iónica, composición del medio, temperatura y pH afectan las tinciones.

4. ¿Qué es un mordente? Menciona tres ejemplos.

Los mordientes intensifican la tinción porque aumentan la afinidad de la célula por el
colorante. También se pueden utilizar para producir un engrosamiento de ciertas estructuras
celulares externas, como los flagelos, que debido a su delgadez no podrían ser visualizados
de otra forma.
Muchos colorantes se aplican en unión de sustancias que actúan como mordientes, tales
como: 
Alumbre
Bicromato potásico
Tanino

5. ¿Cuál es el objetivo de calentar en la tinción de esporas?

La envuelta de la endospora es más compleja e impermeable que la envuelta de las células
vegetativas en las que se forma. Solo se puede teñir el contenido de la espora alterando
su envuelta. La impermeabilidad de las cubiertas dificulta que las endosporas se decoloren
una vez teñidas.
El verde de malaquita es un colorante débilmente básico (tiene una carga positiva débil) y
por tanto, se une débilmente a la bacteria. Penetra en las células vegetativa. Cuando se
calienta la preparación también penetra las endosporas.