CENTRO DE BACHILLERATO

TECNOLOGICO INDUSTRIAL Y
DE SERVICIOS No. 76

FUNDAMENTOS DE LA TINCIÓN
EN MICROBIOLOGÍA Vol.1

EQUIPO 3:
Betsaida Candia Jiménez
Fernanda Carrillo Mora
Demian Chiguil Miranda
Danae Corrales Mendoza
Alejandro Espinoza Díaz
Lucero Yosajandy Galicia Jimenez
¿QUÉ SON LOS COLORANTES?
Los colorantes son sustancias de origen químico o biológico,
generalmente tintes, pigmentos, reactivos u otros
compuestos, empleados en la coloración de tejidos
microorganismos para exámenes microscópicos, debiendo
tener al menos, un grupo cromóforo que le proporcione la
propiedad de teñir.
Los colorantes se clasifican, teniendo en cuenta si la
propiedad tintorial se encuentra en el anión o el catión de su
estructura química.

● Colorantes básicos: Corresponden a colorantes que

tiñen estructuras de carácter nuclear o similares, que
son ácidas o ligeramente ácidas, es decir cargadas
negativamente

● Colorante acido: corresponden fundamentalmente a

colorantes citoplasmáticos, ya que los citoplasmas de
las células se consideran básicos, captando, muy bien
los colores básicos
● Colorantes neutros: son una sal compuesta de un colorante
ácido y un básico

giemsa

eosinato de azul de
metileno
Capacidad de teñir
Los colorantes suelen ser moléculas orgánicas que presentan anillos aromáticos y
que absorben la luz visible por efecto de los electrones asociados a
combinaciones de átomos llamados CROMÓFOROS.
Un cromóforo es la
parte o conjunto de
Anillo Grupo átomos de una
aromático cromóforo molécula
responsable de su
CROMÓFOROS
color.
Capacidad de unirse
Para que el colorante pueda teñir un tejido ha de ser capaz de unirse a las
estructuras celulares. El elemento químico que le confiere esta capacidad se
denomina grupo AUXOCROMO.

Es decir son grupos cargados positivamente que intensifican una sustancia o

cromóforo en la síntesis de colorantes.
CROMÓFOROS
cromóforos: Es cualquier molécula o parte de una molécula responsable por el color del material. También se puede
definir como una sustancia que tiene muchos electrones capaces de absorber energía o luz visible, y excitarse para así
emitir diversos colores, dependiendo de las longitudes de onda de la energía emitida por el cambio de nivel energético de
los electrones

TIPOS DE CROMÓFOROS:

Los cromóforos se encuentran casi siempre en una de dos formas: sistemas conjugados pi o complejos metálicos

Sistemas conjugados pi:los niveles de energía que alcanzan los electrones son orbitales pi generados a partir de series
de enlaces simples y dobles alternados, como sucede en los sistemas aromáticos. Entre los ejemplos más comunes
podemos encontrar a los colorantes retinianos, varios colorantes de alimentos, etc.

Complejos metálicos: surgen de la división de orbitales "d" al vincular metales de transición con ligantes. Algunos
ejemplos de estos cromóforos se encuentran en la clorofila, usada por los vegetales para la fotosíntesis, la hemoglobina.
 AUXOCROMO
Auxocromo:son grupos o radicales positivos de átomos, que intensifican la acción de un grupo de
átomos no saturados que, estando presentes en una molécula de una sustancia química, hacen que
esta sea coloreada. Es decir son grupos cargados positivamente que intensifican una sustancia o
cromóforo en la síntesis de colorantes

Estos no se absorbe por sí solos en la región del ultravioleta pero tiene los efectos de desplazar picos de
los cromóforos hacia longitudes de onda larga además de aumentar sus intensidades. Muchos de estos
grupos o radicales, son ácidos y bases que originan colorantes ácidos y básicos, y que fijan eficazmente
el colorante

Algunos ejemplos de auxocromos son:

Ácidos: -COOH, -OH, -SO3H. Básicos: -NHR, -NR2, -NH
¿Cuál es la función de los colorantes en microscopía?

➢ Su principal función es utilizada en microscopía para mejorar el contraste en la

imagen vista al microscopio.

➢ Los colorantes y tinturas son sustancias que usualmente se utilizan en biología

y medicina para resaltar estructuras en tejidos biológicos que van a ser
observados con la ayuda de diferentes tipos de microscopios.
➢ La tinción o coloración es un proceso por el cual las moléculas de un colorante se
absorben a una superficie.
➢ El uso de colorantes permite cambiar el color de las células de los
microorganismos y poder realizar la observación en microscopio óptico; dado que
las bacterias son casi incoloras, no presentan contraste con el medio en el cual
se encuentran suspendidas y no pueden observarse claramente sin algún
tratamiento previo.
➢ La tinción o coloración es un método sencillo y su principal función es la de
incrementar el contraste entre la célula y su entorno y por lo tanto contribuye a
mejorar la imagen observada.
Clasificación de las diferentes
tinciones.
· Tinciones simples:

Tinción negativa: se usa un colorante ácido, nigrosina o tinta china, que no entra en la célula de modo que estas no se observan
teñidas, lo que se ve de color es el fondo.

Tinciones diferenciales:

Tinción Gram: se basa en las diferencias entre las paredes de las Gram + y las Gram - , el primer colorante tiñe todas las células, en
las G+ entra y con la acción del lugol formará una molécula muy grande que no sale de la célula, pero el disolvente, etanol,
disolverá la capa de lipopolisacáridos de las Gram negativas donde esta el 1º colorante, ya que no pudo atravesar esta barrera, de
modo que al añadir el 2º será este el único que les de color.
 fijación de la muestra ¿Cuál es su utilidad?

un fijador inmoviliza y estabiliza los elementos celulares, bien sea por precipitación de las proteínas y
demás sustancias celulares activas, ya sea mediante un bloqueo químico de su actividad, siendo estos
fenómenos permanentes.

un fijador tiene como misión:

* Evitar la autolisis debida a los propios enzimas.

* Proteger el corte o la pieza del ataque bacteriano.

* Insolubilizar los componentes celulares que se desean estudiar.

* Preparar a las distintas estructuras para posteriores tratamientos.

* Evitar la disolución de determinados compuestos en el fijador.

* Conservar o provocar determinadas reacciones químicas.

* Mantener las propiedades físicas.

para la elección de un fijador, hay que tener en cuenta, además de lo señalado anteriormente,
unas características que son intrínsecas al mismo, como son la velocidad de penetración, la
velocidad de fijación y el coeficiente de endurecimiento, así como el efecto de la retracción. Estos
factores son de gran importancia a la hora de elegir un fijador.