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EVALUACIÓN DE LA CALIDAD FISICOQUÍMICA Y MICROBIOLÓGICA, Y VULNERABILIDAD DEL RECURSO HÍDRICO DE LOS ACUÍFEROS PRESENTES EN EL MUNICIPIO DE TENJO
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Evaluación de la incidencia de los microorganismos aerotransportados por la lluvia horizontal del salto del tequendama (Cundinamarca, Colombia) sobre la microbiota del
suelo adyacente a la caída del agua. View project
All content following this page was uploaded by Janeth Del Carmen Arias on 12 April 2017.
Lena Carolina Echeverri Prieto,1 Gloria Clemencia Cifuentes Orjuela,1 José Manuel Granados
Ramírez,2 Janeth Arias Palacios3 y Cindy Fernández López1
Resumen
Para evaluar la actividad desinfectante de cada agente químico se implementó una metodología
cuantitativa por medio de la neutralización de estos con el medio Dey-Engley y recuperar las
células viables después de cada ensayo y calcular la cinética de desinfección la cual es expresada
como coeficiente de letalidad (k). Se observó que este valor era inversamente proporcional al
tiempo de contacto para los tratamientos con B. subtilis frente a todos los desinfectantes, y para
A. niger con el alcohol etílico al 70 %, el amonio cuaternario catiónico y el hipoclorito de sodio.
Métodos
Microorganismos: Los microorganismos que se utilizaron para este estudio fueron Staphylococcus
aureus ATCC 25923, Escherichia coli ATCC 25922, Candida albicans ATCC 9341, Aspergillus
niger ATCC 16404 y Bacillus subtilis ATCC 21556. Se utilizó el medio Plate Count para el
mantenimiento y la numeración de los microorganismos viables, y se incubaron a 35 ± 2 °C para S.
aureus, E. coli, y B. subtilis; a 22 ± 2 °C para C. albicans y A. niger. El tiempo de incubación fue de
24 h, con excepción para el hongo que fue de 10 días.
La evaluación de los desinfectantes se realizó tomando tubos estériles, los cuales tenían 3,75 mL
de cada desinfectante y para el control se utilizó agua destilada estéril. Se inoculó cada tubo con
0,25 mL de la suspensión inicial del microorganismo; a partir de este momento se empezaron a
cronometrar los tiempos de evaluación establecidos para cada microorganismo (C. albicans, S.
aureus y E. coli: 5, 10 y 15 min; B. subtilis: 15, 30, 45 y 60 min y A. niger: 15, 30 y 60 min); al
finalizar cada tiempo se adicionaron según cada desinfectante el volumen de neutralizante D/E
correspondiente. Se centrifugaron los tubos a 3 000 rev/min durante 15 min a 5 ± 1°C, se descartó
el sobrenadante y el botón de células se resuspendió en 1 mL del medio D/E 1X, se agitaron los
tubos y se inoculó el medio Plate Count con 0,1 mL de cada muestra por triplicado. El
procedimiento anterior se repitió a los 7 y 15 días de preparadas las soluciones de los diferentes
desinfectantes; su efectividad se evaluó durante el tiempo de almacenamiento.
Cinética de desinfección: La ley de Chick-Watson ha sido usada para definir el grado de
desinfección con respecto a los microorganismos empleados para el ensayo, con la ecuación:
log10 (No/N) = k * C * t
donde:
Resultados
Acción biocida de los desinfectantes: luego de los tratamientos con los diferentes tiempos de
contacto y los desinfectantes, se obtuvo que hubo una reducción total de las poblaciones
microbianas de C. albicans, S. aureus y E. coli con los 5 desinfectantes de evaluación, lo mismo se
apreció hacia A. niger con el desinfloor y el desinmur. Esto no sucedió con B. subtilis en ninguno de
los tratamientos durante los días de almacenamiento evaluados, sin embargo la reducción que
existió oscila entre el 57-99 % hablando en mortandad.
Discusión
Contra C. albicans, S. aureus y E. coli la cinética de desinfección es cero ya que en todos los
tiempos de contacto con los 5 desinfectantes evaluados la mortalidad fue del 100 % y el modelo
matemático no es aplicable, pero se puede inferir que la actividad de este desinfectante
permanece a través del tiempo de almacenamiento contra estas poblaciones microbianas, lo
mismo se observó con el desinfloor 2 % contra A. niger.
Es importante resaltar que el desinfloor tiene como principio activo el glutaraldehído y este agente
químico actúa sobre las membranas externas de los microorganismos e inhibe la actividad de la
enzima deshidrogenada, lo que favorece la lisis celular.6
Asimismo, se logró evidenciar que los 5 microorganismos usados para la evaluación son
susceptibles a la acción del cloro, el cual tiene como mecanismo de acción inhibir enzimas
esenciales, al oxidar los grupos tiol (S-H), también puede producir cambios en la permeabilidad de
la membrana celular.7
La constante de letalidad para A. niger solo se calcula para los días 7 y 15 de almacenamiento con
el alcohol etílico porque el número de sobrevivientes fue nulo en el día cero y por lo tanto la
constante es cero. También se calculó la constante para el decol-NV y el sanivec, y se pudo
comprobar que su efectividad se mantuvo durante el tiempo de evaluación.
Summary
Referencias bibliográficas
2. Sykes G. Chemical Disinfectants. Part V. In: Disinfection and Sterilization. 2 nd ed. Londres: Ed.
Chapman & Hall. 1965. p. 311-426.
3. Gerhardt P. Methods for general and molecular bacteriology. Washington, DC: American
Society for Microbiology; 1994. p. 726-729.
7. McDonnell G, Russell AD. Antiseptics and disinfectants: Activity, Action and Resistance. Clin
Microbiol Rev. 1999;12(1):147-79.