LABORATORIO 7 - Grupo 4

“Año del Fortalecimiento de la Soberanía Nacional”
UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS
(Universidad del Perú, Decana de América)
FACULTAD DE QUÍMICA E INGENIERÍA QUÍMICA
DEPARTAMENTO ACADÉMICO DE QUÍMICA ORGÁNICA
E.P. DE INGENIERÍA AGROINDUSTRIAL
MICROBIOLOGÍA GENERAL
Práctica N.º 6
Métodos de cuantificación de microorganismos mediante el recuento de
células viables en la placa
Horario: Jueves de 4 p.m. a 6 p.m.
Profesora: MSc Miriam Estela Memenza Zegarra
Fecha de realización: 14 de julio del 2022
Fecha de entrega: 21 de julio del 2022
Integrantes:
● Carlita Rodriguez Paz
● Marcos Estéfano Manrique Malla
● Gianfranco Raúl Celis Alcántara
● Diego Jesús Osorio Huamán
● Abner Leonard Velásquez Mamani
2022
Resumen
El presente informe tuvo como objetivo instruir en los métodos usados en la cuantificación
de microorganismos mediante el recuento de células viables en placa, lo cual permite
determinar la cinética de los bioprocesos o el grado de contaminación de un producto
determinado. Para ello, se utilizaron muestras obtenidas del suelo que presentan
componentes salinos. Las muestras fueron llevadas a solución acuosa para luego ser
colocadas en un matraz para proceder con las diluciones seriadas. En la dilución seriada las
muestras pasan por las siguientes fases: Muestra en tubo de ensayo con 90 ml de sol. Salina
estéril a una concentración de 0.85%, 1 ml de la dilución pasa a un tubo de ensayo con sol.
Salina estéril de 9 ml, repetir 2 veces el proceso de dilución con agua destilada estéril. Luego
realizar el recuento de microorganismos mediante el transporte de la última dilución más el
inóculo a la placa Petri, donde se adicionará el agar para facilitar el crecimiento microbiano.
Para luego realizar la incubación de la bacteria Bacillus subtilis y posterior contabilización de
colonias. Se obtuvieron el número de colonias durante un intervalo de tiempo, desde el
tiempo de 1 hora con 16 colonias hasta el tiempo de 10 horas con 109 colonias y la tasa
−1
específica de crecimiento con un valor de 2, 13 × 10 . Se concluye que el método de
diluciones seriadas tuvieron resultados aceptables para la cuantificación de bacterias y
permite determinar la viabilidad del cultivo. La bacteria tiene una producción factible para
los bioprocesos.
1. Introducción
En microbiología es necesario la cuantificación de microorganismos, ya que es
ampliamente utilizada para determinar las poblaciones microbianas viables en los alimentos,
aguas y otros productos. La cuantificación de microorganismos es importante para los
estudios de ecología microbiana y microbiología clínica. Es necesario para establecer si serán
capaces de desarrollar una función benéfica o perjudicial (Corral et al. 2012).
La bacteria B. Subtilis según Kunst et al. (1997) es una bacteria aeróbica, que forma
endosporas y tiene forma de bastón. Es una fuente importante de enzimas industriales. Es por
ello, que presenta gran interés comercial al tener la capacidad de secretar enzimas en
concentraciones de gramo por litro.
La bacteria B. Subtilis se encuentra con mayor frecuencia en forma vegetativa cuando
es asociada con el material orgánico en descomposición. Por ello, que presenta un estilo de
vida saprófito, que proviene del experimento con las condiciones: Inoculación de esporas en
microcosmos de suelo artificial saturados con filtro esterilizado y materia orgánica soluble
extraída del suelo (Earl, Losick y Kolter 2008).
Por lo tanto, el presente informe tiene como objetivos instruir en los métodos
relacionados con la determinación del número de microorganismos por medio del recuento de
células viables en placa. Con ello, determinar la cinética en los casos de bioprocesos o el
grado de contaminación de un producto.
2. Objetivos
● Adiestrar al alumno en los métodos usados en la determinación del número de
microorganismos mediante el recuento de células viables en placa
● La cuantificación permitirá determinar la cinética en el caso de los Bioprocesos o el
grado de contaminación de un producto determinado.

3. Marco Teórico
3.1. Dilución seriada y factor de dilución
La dilución seriada es la disminución o reducción progresiva de la concentración de
un soluto de una determinada solución original en diferentes recipientes (como tubos de
ensayo), por medio de un diluyente en proporción de un volumen fijo, formándose
suspensiones (Blaize et al., 2022). Nos permitirá obtener cantidades adecuadas de alguna
muestra que deseamos.
El factor de dilución (FD) es la reducción logarítmica, donde comparamos la
concentración de soluto entre la solución original y la solución final obtenida, mediante ello
se puede calcular también la cantidad de diluciones repetidas a lo largo del proceso.
Normalmente, se aplica el factor de base 10 (diluciones decimales) para este método, ya que
es más factible.
3.2. Muestra/solución estéril
La muestra o solución deben encontrarse estériles, es decir, libres de
microorganismos que alteren el proceso de cultivo, donde se evaluará el número de colonias
formadas. La esterilización es la eliminación total de estos microorganismos, a diferencia de
la desinfección, que es una eliminación parcial. (Acereda, 2019)
Los materiales que también deben ser esterilizados son principalmente las asas,
seguidas de las pipetas, los tubos de ensayo donde se diluyen las soluciones, y por supuesto,
el diluyente (agua destilada) debe encontrarse libre de patógenos.
3.3. Recuento de microorganismos por placa
Está entre uno de los métodos más aplicados donde se determina el número de
colonias de microorganismos que se han podido desarrollar en la suspensión del medio de
cultivo tras la incubación. La muestra se deposita en la cámara de recuento, esta se acomoda
en el microscopio y podemos observar las colonias.
Una de las ventajas del recuento de células viables es precisamente que forman
Unidades Formadoras de Colonias (UFC), sin embargo, entre sus desventajas están el tiempo
prolongado que se necesita para la preparación de los medios y el riesgo de contaminación

por otros microorganismos. Por otro lado, Corral et al. (2012) señalan que la importancia del
recuento de microorganismos nos permite establecer cuán capaces son de desarrollar su
función, sean de carácter beneficioso o perjudicial (en muchos casos, patógenos).
Existen dos tipos de recuento de microorganismos, los cuales se presentan a continuación:
3.3.1. Por difusión o profundidad
Se añade un medio de agar como cultivo fundido, a la placa Petri donde está la
muestra diluida (esta última con un volumen no mayor a 1 ml), mezclados ambos, y luego
esperando a que se solidifique para la incubación, la cual dura hasta que se desarrollen las
colonias tanto dentro de la solución como en la superficie de esta. Este mecanismo es
facultativo en microorganismos anaerobios o microaerófilos. (Aldana et al, 2017).
3.3.2. Por diseminación
Las células microbianas colonizan la placa de agar mediante una cantidad
predeterminada de cultivo diluido (menor a 0.1) en la superficie del medio. De igual manera
se incuban esperando la aparición de colonias para su contabilización. Las bacterias son
aerobias (Alonso y Poveda, 2008): en este grupo está incluida la Bacillus subtilis.
3.4. Unidad formadora de colonias (UFC/ml)
Representa cada colonia cuantificada. Se suele seleccionar aquellas muestras que
contienen desde 30 hasta 300 UFC/ml, debido a que son más accesibles al momento de
contabilizar estas colonias.
La fórmula para determinar la UFC/ml es:
𝑁° 𝑑𝑒 𝑐𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖𝑎𝑠 𝑝𝑜𝑟 𝑝𝑙𝑎𝑐𝑎 × 𝐹𝑎𝑐𝑡𝑜𝑟 𝑑𝑒 𝑑𝑖𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛

𝑈𝐹𝐶/𝑚𝑙 = 𝑉𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒𝑛 𝑙𝑎 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎 𝑠𝑒𝑚𝑏𝑟𝑎𝑑𝑎 (𝑚𝑙)
El número de colonias lo obtenemos de la siguiente manera:
(𝐶𝐴+𝐶𝑀 +𝐶𝐵)
𝑁° 𝑐𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖𝑎𝑠 = 3
× 65
Donde CA: colonias del cuadrante de carga alta
CM: colonias del cuadrante de carga media
CB: colonias del cuadrante de carga baja
Las fórmulas han sido extraídas de la fuente: Izurieta (2011).

4. Materiales y procedimiento
4.1. Materiales
Los materiales a usar en el presente trabajo son el matraz, las pipetas, suelo salino
(componente salino), tubos, gradillas, muestras, placas Petri, agar, además de la solución
diluyente. Todos estos deben encontrarse en condiciones estériles.
También están la cámara de recuento y el microscopio.
4.2. Procedimiento
4.2.1. Obtención de la muestra
La muestra a obtener será el suelo, que presenta componentes salinos. Extraemos 10
g de este colocándolo en un matraz para proceder a las diluciones seriadas. Previo a la
dilución, esa muestra de suelo salino lo llevamos a solución acuosa y asimismo debe estar
esterilizada.
4.2.2. Diluciones seriadas
Las diluciones se aplican principalmente cuando hay una alta concentración de soluto
en la solución, ya que el crecimiento puede ser muy excesivo.
Luego de tomar los 10 mg de la muestra, la llevamos a un tubo de ensayo con 90 ml
de solución salina estéril a una concentración de 0.85%, constituyendo así la primera
0
dilución, que en este caso le llamaremos dilución 10 . Debe distribuirse homogéneamente.
Posteriormente, tomamos 1 ml de la anterior dilución mediante la pipeta y la
pasamos a otro tubo de ensayo de solución salina estéril, de 9 ml, formando un volumen de
10 ml, y también una proporción 1/10 respecto al ml transferido a la presente dilución. De
1
esta manera tenemos la dilución 10 .
2 3
Repetimos el proceso para la dilución 10 y la dilución 10 , estos dos últimos se
llevarán a cabo en tubos de ensayo con agua destilada estéril.

Figura 1
Diluciones seriadas.
Fuente: Elaboración propia
4.2.3. Realización del recuento de placas microorganismos
4.2.3.1. Transporte de la última dilución más el inóculo a la placa Petri
Figura 2
Transporte de inóculo.
● Debemos tomar la última
dilución, ya que es la menos
concentrada respecto a las
anteriores y permitirá un
crecimiento controlado de
microorganismos.
Fuente: Elaboración propia
● Respecto a la dilución, se extrae 1 ml si el recuento es mediante el
método de difusión; si es por el método por diseminación, se extrae
solamente 0.1 ml.
● El inóculo se deposita luego de echar la dilución a la placa Petri, en
este caso la bacteria Bacillus subtilis.

4.2.3.2. Adición de agar
● El agar PCA es un agente importante, ya que facilita el crecimiento
microbiano. Contiene triptona, extracto de levadura, glucosa como
azúcar reductor, entre otros componentes. (Castañeda, 2017)
● El agar tiene que estar preparado.
● Se adiciona entre 10-15 ml a una temperatura de 45 °C.
● Si se aplica mediante el método de diseminación, como en el presente
caso, la adición del agar se realiza antes del inóculo.
● Debe distribuirse homogéneamente.
Figura 3
Adición de agar.
Fuente: Elaboración propia.
4.2.3.3. Incubación de la Bacillus subtilis
● Se realizará a 28 °C, por un lapso de 10 horas y a 150 rpm.
4.2.3.4. Contabilización del número de colonias
● Para ello tenemos la cámara de recuento y el microscopio que nos
ayudará a determinar este parámetro. En la cámara de recuento está la
muestra extraída.
● Como ya se mencionó anteriormente, solo se seleccionan aquellas
muestras de 30 a 300 UFC/ml.
Figura 4
Microscopio óptico (arriba) y cámara de recuento (abajo).
4.2.4. Obtención de resultados
● Se puede apreciar en la sección Resultados y Discusión de resultados.
Figura 5
Resumen del proceso.

*Dato a tomar en cuenta: En el método de diseminación, la adición del agar se lleva a
cabo antes de la inoculación de la bacteria o microorganismo en general.
5. Resultados
Recordando que la siembra se realizó a través del método de recuento en placa por
diseminación y el cultivo de Bacillus Subtilis en un medio con azúcares reductores fue
realizado a 28 °C y 150 rpm por 10 horas; transcurrido el tiempo se obtuvo una tabla
compuesta por los muestreos realizados en cada hora de incubación, dicha tabla fue
extendida agregando una columna correspondiente al valor calculado de UFC/mL (Véase
Tabla 1) para el cual asumimos 0.1 mL de volumen de siembra por haberse utilizado el
método de diseminación, además del valor de UFC/mL, también se calculó la tasa específica
de crecimiento.
Tabla 1
Datos obtenidos del muestreo y resultados de UFC/mL en cada hora
Tiempo
Dilución FDD Nro. Colonias UFC/mL
(horas)
1 1E-01 1,00E+01 16 1.600
2 1E-03 1,00E+03 91 910.000
3 1E-04 1,00E+04 45 4.500.000
4 1E-04 1,00E+04 88 8.800.000
5 1E-05 1,00E+05 23 23.000.000
6 1E-05 1,00E+05 47 47.000.000
7 1E-05 1,00E+05 98 98.000.000
8 1E-05 1,00E+05 110 110.000.000
9 1E-05 1,00E+05 108 108.000.000
10 1E-05 1,00E+05 109 109.000.000

Figura 6
Gráfico de de UFC/mL por Tiempo en horas.
Cálculo de la tasa específica de crecimiento:
𝑑𝑁 (𝑙𝑛𝑁−𝑙𝑛𝑁0)
µ·𝑁 = 𝑑𝑡
→ µ = (𝑡−𝑡0)
(𝑙𝑛109−𝑙𝑛16)
µ = 10−1
−1
µ = 2, 13 × 10
6. Discusión de resultados
Una investigación importante es la de Álvarez et al., (2016) en la que evalúa el
crecimiento de cuatro especies diferentes de Bacillus, en la cual una de ellas es de la especie
Subtilis. Se obtuvieron resultados en base al análisis por ensayo directo de recuento en placa
en medio de cultivo agar MMS con composición de 1.2 g/L (NH4 )2 SO4, 0.1 g/L CaCl2 ·2H2
O, 0.1 g/L MgSO4 ·7H2O, 0.01 g/L FeSO4 ·7H2O, 0.2 g/L K2 HPO4 y 0.1 g/L KH2 PO4,
ajustado a pH 6,0. Además, se preparó el inóculo de la bacteria Bacillus Subtilis en 10 ml de
caldo MMS a 180 rpm y 37 °C durante 12 horas. Seguido a esto, se evaluó durante 24 horas.
Comparándolo con nuestro caso, la bacteria B. Subtilis fue incubada en un medio
concentrado de azúcares reductores que se realizó a 150 rpm y 28 °C y se evaluó durante 10
horas; así mismo podemos dilucidar que la temperatura óptima para el conteo de este
microorganismo estaría en un rango de 28 °C hasta 37 °C. En estos dos documentos se
recontaron las células cada hora con el mismo método de siembra de recuento en placa con
la diferencia de que el tiempo de duración para el presente informe fue menor (10 horas)
comparado con la investigación de Álvarez et al. (24 horas).
Figura 7
Curvas de crecimiento por ensayo directo de recuento en placa.
Fuente: Adaptado de Curvas de crecimiento por ensayo directo de recuento en placa
[Imagen], por Álvarez et al., 2016, scielo.org
(http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1794-24702016000200006)
En Álvarez et al., (2016) Se apreció una fase Lag corta de hasta 3 horas
aproximadamente, seguidamente de una fase exponencial no mayor a 5 horas después de la
fase anterior. En esta última fase se visualiza mayor crecimiento en UFC/ml comparada al
resto de la curva. Posterior a esto siguieron las fases de latencia y muerte ocasionadas
probablemente por el incremento de otros metabolitos posiblemente tóxicos, la acidificación
del pH y disminución de nutrientes. La especie Subtilis fue la de mayor velocidad de
crecimiento y muerte, como se aprecia en la gráfica. De igual modo, en el presente informe se
obtuvo la curva de UFC/mL por tiempo en la cual se observó una fase de adaptación (Lag)
bastante más extendida de 6 horas para luego pasar a un crecimiento acelerado
(exponencial) hasta una hora después. Esto nos indica que las muestras de B. Subtilis
necesitaron mayor adaptación a las condiciones y medio de azúcares reductores utilizados en
el presente informe en comparación al hecho por Álvarez et al., el cual tuvo la mitad de fase
de adaptación. También se observa que la fase de latencia, posterior a la fase exponencial, se
mantiene hasta luego de las 10 horas de evaluación, esto nos indica que el tiempo de
evaluación no fue el suficiente para poder ver su terminación y siguiente fase de muerte.
En el proyecto de investigación realizado por Cobo, (2017) se estableció la búsqueda
de medios de cultivo líquidos para la multiplicación de B. subtilis mediante cuatro sustratos,
los cuales fueron sustrato a base de leche azucarada adicionada con caldo rico en minerales,
sustrato a base de subproducto de lactosuero, sustrato a base de bebida de soya fortificada y
sustrato a base de levadura activada; cada una de las muestras se realizaron con 3
repeticiones. En cuanto a medios de cultivo; este proyecto , en comparación con el
presentado en este informe, utiliza sustratos alternativos para la replicación del B. subtilis
pero utilizando el mismo proceso de diluciones seriadas como método de conteo de células.
Además, sus parámetros de incubación fueron de 121 rpm, 37 °C y se evaluó durante 12 días.
Estos parámetros son notablemente diferentes a los mostrados en este informe,
principalmente en el tiempo de evaluación, el cual fue muy superior (de 10 horas a 12 días),
el rpm menor (de 150 a 121 rpm) y en el caso de la temperatura (de 28 °C a 37 °C) fue
equivalente al mostrado por Álvarez et al.

En la siguiente Figura se visualiza la curva del crecimiento de B. subtilis en todos los
tratamientos frente al crecimiento microbiano.
Figura 8
Gráfico de curvas de crecimiento de B. subtilis en cuatro medios de cultivo líquidos
frente a la fase del crecimiento microbiano.
Fuente: Adaptado de Gráfico de curvas de crecimiento de B. subtilis en cuatro medios de
cultivo líquidos frente a la fase del crecimiento microbiano.[Imagen], por Cobo, 2017,
repositorio.usfq.edu (https://repositorio.usfq.edu.ec/handle/23000/6598)
En dicho gráfico se apreció tendencias bastante similares entre las muestras líquidas.
Además, en contraste con la fase Lag del informe realizado, en este proceso los cuatro
tratamientos tuvieron un crecimiento acelerado desde su inicio, denotando la nula fase de
adaptación, su paso directo a la fase exponencial y su tendencia a estabilizarse (fase
estacionaria) sin entrar en fase de muerte. De todo lo dicho anteriormente se deduce que el
mejor tratamiento para la replicación de B. subtilis es la bebida de soya por su alta
concentración de UFC/mL finales y tendencia de producción constante.

7. Conclusiones
El método utilizado para la cuantificación de bacterias permitió determinar la
viabilidad del cultivo. Lo cual permite obtener los datos mediante gráficas, que proporcionan
el estado de crecimiento del microorganismo analizado en un tiempo determinado.
El método de diluciones seriadas utilizado tuvo resultados aceptables en el recuento
−1
de células siendo la tasa específica µ = 2, 13 × 10 . Sin embargo, al momento de su
comparación con investigaciones que utilizaron el mismo método para la misma bacteria B.
subtilis, esta quedó por debajo debido a la diferencia en los medios de cultivos utilizados en
los otros trabajos, las cuales maximizaron el rendimiento y velocidad de replicación de la B.
subtilis en sus procesos. A pesar de ello, con los resultados obtenidos si es viable para los
bioprocesos a realizar.
8. Recomendaciones
- Tener el laboratorio limpio, la superficie de trabajo debe estar desinfectada para así
evitar el contacto con otros microorganismos que pueden alterar el recuento.
- Proporcionar los parámetros adecuados para cada microorganismo a cultivar
- Adiestrar al alumno en los métodos usados en la determinación del número de
microorganismos mediante el recuento de células viables en placa.

Referencias bibliográficas
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microbiana. Base de datos de educación científica de JOVE.
https://www.jove.com/es/v/10507/serial-dilutions-and-plating-microbial-enumera
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http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0123-3475201200020
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Izurieta, N. (2011) Recuento bacteriano. Práctica 4: Laboratorio de Bacteriología y
Micología.
https://es.slideshare.net/nataliaizurieta/laboratorio-no-4-recuento-bacteriano-7723
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Alonso, L. y Poveda, J. (2008). Estudio comparativo en técnicas de recuento rápido en el
mercado y placas Petri 3MTM para el análisis de alimentos.
https://repository.javeriana.edu.co/bitstream/handle/10554/8238/tesis230.pdf?seq
uence=1
Acereda, P. (2019). Descontaminación, desinfección y esterilización: los tres niveles de
limpieza.
https://aldabacee.com/descontaminacion-desinfeccion-esterilizacion-los-tres-nivele
s-la-limpieza/#:~:text=La%20esterilizaci%C3%B3n%20es%20la%20completa,limpie
za%2C%20la%20elimina%20al%20completo
Aldana, A.; Parra, J. & Ramírez, J. (2017). Análisis de técnicas de recuento de
Microorganismos. Mente Joven, 6, 01-08.
https://revistas.unilibre.edu.co/index.php/mente_joven/article/view/3665
Castañeda, C. (2017). Agar Conteo en placa (PCA). Métodos Estándar Agar granulado.
https://www.medioscultivo.com/plate-count-agar-pca/
Castañeda, A. y Consuelo, L. (2016). Evaluación del crecimiento de cuatro especies del
género Bacillus sp., primer paso para entender su efecto biocontrolador sobre
Fusarium sp. Scielo.
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Cobo, C. (2017). Evaluación de medios de cultivo líquidos para la multiplicación de la
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Kunst, F., Ogasawara, N., Moszer, I., Albertini, A. M., Alloni, G. O., Azevedo, V., ... &
Yoshikawa, H. (1997). The complete genome sequence of the gram-positive
bacterium Bacillus subtilis. Nature, 390(6657), 249-256.
https://www.nature.com/articles/36786

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● Carlita Rodriguez Paz

● Marcos Estéfano Manrique Malla

● Gianfranco Raúl Celis Alcántara

● Diego Jesús Osorio Huamán

● Abner Leonard Velásquez Mamani

de microorganismos mediante el recuento de células viables en placa, lo cual permite

determinar la cinética de los bioprocesos o el grado de contaminación de un producto

realizar el recuento de microorganismos mediante el transporte de la última dilución más el

Para luego realizar la incubación de la bacteria Bacillus subtilis y posterior contabilización de

colonias. Se obtuvieron el número de colonias durante un intervalo de tiempo, desde el

diluciones seriadas tuvieron resultados aceptables para la cuantificación de bacterias y

En microbiología es necesario la cuantificación de microorganismos, ya que es

aguas y otros productos. La cuantificación de microorganismos es importante para los

estudios de ecología microbiana y microbiología clínica. Es necesario para establecer si serán

capaces de desarrollar una función benéfica o perjudicial (Corral et al. 2012).

concentraciones de gramo por litro.

La bacteria B. Subtilis se encuentra con mayor frecuencia en forma vegetativa cuando

extraída del suelo (Earl, Losick y Kolter 2008).

grado de contaminación de un producto.

● Adiestrar al alumno en los métodos usados en la determinación del número de

microorganismos mediante el recuento de células viables en placa

● La cuantificación permitirá determinar la cinética en el caso de los Bioprocesos o el

grado de contaminación de un producto determinado.

3.1. Dilución seriada y factor de dilución

La dilución seriada es la disminución o reducción progresiva de la concentración de

un soluto de una determinada solución original en diferentes recipientes (como tubos de

ensayo), por medio de un diluyente en proporción de un volumen fijo, formándose

muestra que deseamos.

El factor de dilución (FD) es la reducción logarítmica, donde comparamos la

se puede calcular también la cantidad de diluciones repetidas a lo largo del proceso.

3.2. Muestra/solución estéril

La muestra o solución deben encontrarse estériles, es decir, libres de

microorganismos que alteren el proceso de cultivo, donde se evaluará el número de colonias

formadas. La esterilización es la eliminación total de estos microorganismos, a diferencia de

la desinfección, que es una eliminación parcial. (Acereda, 2019)

el diluyente (agua destilada) debe encontrarse libre de patógenos.

3.3. Recuento de microorganismos por placa

colonias de microorganismos que se han podido desarrollar en la suspensión del medio de

cultivo tras la incubación. La muestra se deposita en la cámara de recuento, esta se acomoda

en el microscopio y podemos observar las colonias.

prolongado que se necesita para la preparación de los medios y el riesgo de contaminación

recuento de microorganismos nos permite establecer cuán capaces son de desarrollar su

función, sean de carácter beneficioso o perjudicial (en muchos casos, patógenos).

Existen dos tipos de recuento de microorganismos, los cuales se presentan a continuación:

3.3.1. Por difusión o profundidad

colonias tanto dentro de la solución como en la superficie de esta. Este mecanismo es

facultativo en microorganismos anaerobios o microaerófilos. (Aldana et al, 2017).

3.3.2. Por diseminación

Las células microbianas colonizan la placa de agar mediante una cantidad

se incuban esperando la aparición de colonias para su contabilización. Las bacterias son

3.4. Unidad formadora de colonias (UFC/ml)

● Se adiciona entre 10-15 ml a una temperatura de 45 °C.

● Se realizará a 28 °C, por un lapso de 10 horas y a 150 rpm.