Relación Dosis-Respuesta Gradual

Autores
Cabrera Flores Karla Patricia
Jiménez Sandin Jhostin Gamaliel
Maldonado Reyes Juan Manuel
San Juan Tercero Luis Antonio
Solano Ibañez Erika

Facultad de Estudios Superiores Zaragoza

Av. Guelatao no. 66, Col. Ejército de Oriente,
Delegación Iztapalapa, Ciudad de México

Resumen

Para la práctica “Relación Dosis-Respuesta Gradual.” se utilizó el simulador “Organ Bath

Simulation” para trabajar con el tejido de músculo liso de cobayo. Se determinó la relación
dosis-respuesta de la acetilcolina, el carbacol y la pilocarpina mediante el cálculo de la CE 50
(1.09 x 10−8, 1.14 x 10−8, 2.34 x 10−6 ,respectivamente), de manera que fue posible diferenciar
la respuesta gradual de la cuantal.

Abstract

For the practice “Graded Dose-Response Relationship” the simulator “Organ Bath
Simulation” was used to work with guinea pig smooth muscle tissue. It was determined the
dose-response relationship of acetylcholine, carbachol and pilocarpine by calculation of EC50
(1.09 x 10−8, 1.14 x 10−8, 2.34 x 10−6 ,respectively), so that it was possible to differentiate the
graded response from the quantal one.

Introducción

Aquellas respuestas de un organismo que dentro de ciertos límites, aumentan en magnitud

a medida que se incrementa la dosis del medicamento se denomina de tipo gradual.
Cuando tales respuestas se analizan en un tipo de coordenadas cartesianas, en el cual las
ordenadas representan la magnitud de las respuestas y las abscisas las dosis o los
logaritmos de las dosis, se obtiene un trazo hiperbólico o una curva sigmoidea, que para
fines prácticos puede considerarse como una línea recta.
Para que los fármacos actúen se requiere de sus mecanismos de acción: los efectos de los
fármacos se ven influenciados por la interacción que presentan con las macromoléculas del
organismo, ya que el interactuar modifica la función del componente y con ello se dan los
cambios bioquímicos y fisiológicos que determinan la respuesta al fármaco.

En farmacología generalmente se denomina receptores a las macromoléculas celulares

encargadas directa y específicamente de la señalización química entre células y dentro de
las células. Cuando una hormona, un neurotransmisor, un mensajero intracelular o un
fármaco se combina con uno de estos receptores haciendo uso de un sitio de
reconocimiento, se inicia un cambio en la función celular. Por extrapolación, se utiliza a
veces el término receptor en un sentido más general, pero menos preciso para referirse a
dianas macromoleculares capaces de unir fármacos aunque aquellas no desempeñen un
papel en la transducción de señales mediada por moléculas mensajeras.
En este contexto, se entiende por transducción a los pasos que permiten vincular la unión
de un agonista al receptor con la transmisión de una señal a la célula en la que se
encuentra o entre compartimentos de una misma célula.
La respuesta farmacológica comienza tras la formación de un complejo entre la molécula de
fármaco y su sitio de acción. El elemento crítico que determina la especificidad de esta
respuesta es el reconocimiento, por parte de un receptor celular, de las moléculas del
fármaco, más móviles debido a su menor tamaño y a que se encuentran en disolución.

Hipótesis

Al suministrar acetilcolina, carbacol y pilocarpina al músculo liso de cobayo, aumentará la

magnitud de su respuesta ante incrementos graduales en las dosis de los fármacos.

Objetivo

Comprender la relación dosis-respuesta gradual mediante la determinación de la CE 50 de la

acetilcolina, carbacol y pilocarpina en músculo liso de cobayo con ayuda de un simulador.

Materiales y métodos

Equipo
Computadora personal con el programa Organ Bath Simulation v2.6

Procedimiento

Para iniciar un experimento

1. Presionar el botón New experiment, y seleccionar el tipo de tejido. Existen cuatro
tipos de tejidos dentro del simulador, seleccionar Guinea pig ileum
2. Seleccionar acetilcolina de la lista de fármacos disponibles en la sección de
agonistas.
3. Presionar el botón Record para iniciar el registro. El cuadro del experimento grafica
el tiempo en segundos de la contracción muscular y la fuerza de contracción medida
en gramos. Registrar el estado basal del músculo durante 1 minuto.

Adicionando el agonista
4. seleccionar la concentración stock del agonista. Iniciar con la menor concentración.
5. Ingresar un mililitro en el espacio denominado volumen.
6. Presionar el botón Add to organ Bath. Registrar la reacción durante 20 segundos.
7. Lavar el músculo para retirar la acetilcolina presionando el botón Flush Reservoir
Bath.
8. Permitir que el músculo regrese a su estado basal y permitir que se estabilice por 10
segundos.
Medición de la respuesta del músculo
9. Presionar el botón Stop para detener el registro.
 10. Medir la contracción del músculo recorriendo la barra central al sitio donde se
estabiliza la respuesta del músculo. Realizar tres mediciones y calcular el promedio
de respuesta.

Construcción de la curva dosis-respuesta

11. Repetir los pasos 4 a 10 para cada una de las soluciones stock de acetilcolina y
registrar el promedio de respuesta para cada una de ellas.
12. Calcular la concentración final del baño (CFB) donde se encuentra el órgano para
cada concentración de acetilcolina adicionada al baño
13. Calcule el porcentaje del efecto obtenido de cada concentración de acetilcolina,
utilice la respuesta máxima observada como el 100% del efecto.

Respuesta graduada de carbacol y pilocarpina

14. Repita el procedimiento para los fármacos carbacol y pilocarpina.

Resultados

Acetilcolina
β = 0.5207 Ecuación general
α = 9.1457 UP= β *logC +α
5= 0.5207*logC + 9.1457

Cálculo de DE 50
5−α 5−9.1457 DE 50=10 μ = 10−7.96 = 1.09 x 10−8
50

μ50= = = -7.96
β 0.5207

Carbacol

β = 0.4907 Ecuación general

α = 8.8982 UP= β *logC +α
5= 0.4907*logC + 8.8982

Cálculo de DE 50
5−α 5−8.8982 DE 50=10 μ = 10−7.94 = 1.14 x 10−8
50

μ50= = = -7.94
β 0.4907
Pilocarpina

β = 0.8272 Ecuación general

α = 9.6639 UP= β *logC +α
5= 0.8272*logC + 9.6639

Cálculo de DE 50
5−α 5−9.6639 DE 50=10 μ = 10−5.63 = 2.34 x 10−6
50

μ50= = = -5.63
β 0.8272

Análisis de resultados

Puede apreciarse como en las gráficas de Acetilcolina y Carbacol diseñadas mediante la

utilización del software se da un %E mayor al 94% a una concentración de 0.000001
deduciendo que la interacción que presentan con las macromoléculas del organismo
hipotético interactúa eficientemente así como su modificación en la función del componente
y con ello este resultado culminando en un hipotético cambio bioquímico y fisiológico
(respuesta al fármaco). Por contraparte la gráfica elaborada acerca de la Pilocarpina a
pesar de ser de característica gradual al aumento de la concentración como las anteriores,
no posee la misma capacidad de eficiencia en el Mecanismo de acción y sus interacciones
bioquímicas apreciándose un %E cercano al 97% al utilizar una concentración de 0.0001
indicando que no se desempeña igual en el organismo seleccionado posiblemente por sus
características farmacocinéticas y como se desempeña el fármaco en el organismo,
presentando, como ya se mencionó antes, un aumento gradual menor recordando que: las
respuestas de un organismo que dentro de ciertos límites, aumentan en magnitud a medida
que se incrementa la dosis del medicamento se denomina de tipo gradual.
Por consiguiente se deduce (y a diferencia del caso de la acetilcolina y el carbacol) en el
último caso que la transducción (los pasos que permiten vincular la unión de un agonista al
receptor con la transmisión de una señal a la célula en la que se encuentra o entre
compartimentos de una misma célula) a pesar de presentar un incremento gradual se
requiere de una concentración mayor (diferencia de 10 -2) para alcanzar valores de %E
iguales o comparables a los casos de acetilcolina y Carbacol, posiblemente a causa
también del comportamiento del organismo hipotético al fármaco empleado, donde el
elemento crítico que determina la especificidad de esta respuesta es el reconocimiento por
parte de un receptor celular, de las moléculas del fármaco más móviles y aptas debido a su
menor tamaño y a que se encuentran en disolución así como su especificidad molecular.

Conclusiones

Se registró un aumento en la magnitud de la respuesta del músculo liso de cobayo ante los
incrementos graduales de las dosis suministradas de acetilcolina, carbacol y pilocarpina, y
se determinó la CE50 de los tres fármacos, por lo que fue posible conocer la relación dosis
respuesta gradual de cada uno.

Referencias

1. Lüllmann H. Farmacología. Texto y Atlas. 6ª edición. España: Médica Panamericana;

2010.
2. Mendoza N. Farmacología Médica. México: Editorial Médica Panamericana: UNAM,
Facultad de Medicina; 2008.
3. Remington. Farmacia. 20ª edición. Buenos Aires: Médica Panamericana; 2003.
4. Garrido A, Teijón J. Fundamentos de Bioquímica metabólica. 2ª edición. España:
Editorial Tébar; 2006.