MICROSCOPIO
El microscopio es una herramienta que permite observar objetos que son
demasiado pequeños para ser observados a simple vista. El tipo más común y
el primero que fue inventado es el microscopio óptico. Se trata de un
instrumento óptico que contiene dos lentes que permiten obtener una imagen
aumentada del objeto y que funciona por refracción. La ciencia que investiga
los objetos pequeños utilizando este instrumento se llama microscopía.
El microscopio fue inventado por Zacharias Janssen en 1590. En 1665 aparece
en la obra de William Harvey sobre la circulación sanguíneaal mirar al
microscopio los capilares sanguíneos, y Robert Hooke publicó su
obra Micrographia.
LAS PARTES DEL MICROSCOPIO ÓPTICO Y SUS FUNCIONES
Las partes del microscopio óptico principales son el pie, tubo, revólver,
columna, platina, carro, tornillo macrométrico y micrométrico, oculares, objetivo,
condensador, diafragma y transformador.
SISTEMA MECÁNICO
EL PIE
Constituye la base del microscopio y su apoyo principal, puede tener distintas
formas, siendo las más habituales rectangulares y con forma de Y.
EL TUBO
Tiene forma cilíndrica y por dentro es de color negro para evitar las molestias
del reflejo de la luz. Al final del tubo es donde se colocar los oculares.
EL REVÓLVER
Es una pieza giratoria en la que se enroscan los objetivos. Cuando giramos
este dispositivo, los objetivos pasan por el eje del tubo y se colocan en posición
de trabajo. Se le llama revolver por el ruido que hace el piñón al encajar en un
lugar fijo.
LA COLUMNA O BRAZO
La columna o el brazo, en algunos casos conocida por asa, es la pieza de la
parte posterior del microscopio. Sujeta al tubo en su parte superior y en la parte
inferior se acopla al pie del aparato.
LA PLATINA
La platina es la pieza metálica plana en la que se coloca la muestra a observar.
Tiene un orificio en el eje óptico del tubo que permite que pase el rayo de luz
en dirección a la muestra.
La platina puede ser fija o giratoria. Si es giratoria, mediante tornillos puede
centrarse o moverse con movimientos circulares.
EL CARRO
Permite mover la muestra con un movimiento ortogonal, hacia adelante y atrás,
o de derecha a izquierda.
EL TORNILLO MACROMÉTRICO
El dispositivo enganchado a este tornillo hace que el tubo del microscopio se
deslice verticalmente gracias a un sistema de cremallera. Estos movimientos
permiten que se enfoque rápidamente la preparación.
EL TORNILLO MICROMÉTRICO
Este mecanismo ayuda a enfocar la muestra con un enfoque exacto y nítido a
través del movimiento casi imperceptible de la platina.
Los movimientos son a través de un tambor que tiene divisiones de 0,001 mm.
Y que también sirve para medir el grosor de los objetos acoplados.
PARTES DEL SISTEMA ÓPTICO
OCULARES
Son los sistemas de lentes más cercanos a la mira del observador. Son
cilindros huecos en la parte superior del microscopio provistos de lentes
convergentes.
Dependiendo de si existe uno o dos oculares, los microscopios pueden ser
monoculares o binoculares.
OBJETIVOS
Son las lentes que se regulan mediante el revólver. Son un sistema de lentes
convergentes en las que se pueden acoplar varios objetivos.El acople de los
objetivos se realiza de forma creciente según sus aumentos en el sentido de
las agujas del reloj.
Los objetivos llevan su aumento en un lateral y también están distinguidos por
un anillo coloreado. Algunos de los objetivos no enfocan la preparación en el
aire y necesitan utilizarse con aceite de inmersión.
CONDENSADOR
Es un sistema de lentes convergentes que capta los rayos de luz y los
concentra en la muestra proporcionando mayor o menor contraste.
Tiene un regulador para ajustar la condensación a través de un tornillo. La
localización de este tornillo puede variar dependiendo del modelo de
microscopio
FUENTE DE ILUMINACIÓN
La iluminación está constituida por una lámpara halógena. Dependiendo del
tamaño del microscopio puede tener mayor o menor voltaje.
Los microscopios pequeños más utilizados en laboratorios tienen un voltaje de
12 V. Esta iluminación se encuentra en la base del microscopio. La luz sale de
la bombilla y pasa a un reflector que envía los rayos en dirección a la platina
DIAFRAGMA
También conocido como iris, se encuentra sobre el reflector de la luz.
A través de este se puede regular la intensidad de la luz abriéndolo o
cerrándolo.
TRANSFORMADOR
Este transformador es necesario para enchufar el microscopio a la corriente
eléctrica ya que la potencia de la bombilla es menor que la corriente eléctrica.
Algunos de los transformadores también cuentan con un potenciómetro que
sirve para regular la intensidad de la luz que pasa por el microscopio.
Todas las partes del sistema óptico de los microscopios están formadas por
lentes corregidas para las aberraciones cromáticas y esféricas.
Las aberraciones cromáticas se deben a que la luz está compuesta por
radiaciones que sufren una desviación desigual.
Para que no se cambien los colores de la muestra se utilizan lentes
acromáticas. Y la aberración esférica se da porque los rayos que pasan por el
extremo convergen en un punto más cercano, por eso se pone un diafragma
para permitir el paso a los rayos en el centro.
CULTIVOS
El cultivo es la práctica de sembrar semillas en la tierra y realizar las labores
necesarias para obtener frutos de las mismas.
La agricultura es un arte milenario que tiene el propósito de cultivar la tierra
mediante diferentes tratamientos y alternativas con el fin de obtener vegetales y
frutos que puedan ser utilizados con propósitos alimenticios, medicinales y
estéticos.
Medio de cultivo
un medio de cultivo es una técnica de laboratorio (véase microbiología) que
consta de un gel o una solución que contiene los nutrientes necesarios para
permitir, en condiciones favorables de ph y temperatura, el crecimiento
de virus, microorganismos, células, tejidos vegetales o incluso
pequeñas plantas. según lo que se quiera hacer crecer, el medio requerirá unas
u otras condiciones. generalmente se presentan desecados en forma de polvo
fino o granular antes de ser preparados; ya preparados pueden encontrarse en
estado sólido, semisólido o líquido. el objetivo último del cultivo es
variado: antibiograma, identificación, multiplicación.
UROCULTIVO / ANTIBIOGRAMA
Es un examen de laboratorio para analizar si hay bacterias u otros microbios en
una muestra de orina.
Puede ser utilizado para buscar una infección urinaria en adultos y niños.
CÓMO RECOLECTAR UN UROCULTIVO
El primer punto es asegurarse de que el paciente entienda que la recolección
de orina debe ser estéril. Es esencial impedir la contaminación de la muestra
de orina por bacterias que viven en el medio ambiente y en nuestra piel. Para
ello, se deben seguir algunos pasos:
Limpiar la región genital, sobre todo alrededor del meato uretral (salida
de la uretra). Lo ideal es usar gasas (compresas) estériles para limpiar y
luego secar el área.
El recipiente utilizado para recolectar la orina debe ser estéril.
En la hora de orinar, se debe evitar el contacto de la orina con la piel
circundante, como grandes labios o el prepucio del pene.
El primer chorro de orina es siempre despreciado, ya que solamente
sirve para limpiar las impurezas que se quedan en la uretra.
El urocultivo debe ser llevado inmediatamente al laboratorio después de
su recolección. Solamente hay que refrigerarlo si el tiempo entre la
recolección y la entrega es muy largo.
La mejor orina para el urocultivo es la primera de la mañana, porque durante la
noche es cuando la orina permanece más tiempo en la vejiga, favoreciendo la
multiplicación de bacterias. Sin embargo, esta recolección por la mañana no
siempre es posible porque el paciente generalmente la recolecta justo después
de salir de la oficina del médico.
Tinción de Gram
Bacterias Escherichia coli (gram negativas) vistas al microscopio tras ser
teñidas con la tinción de Gram.
Bacterias Clostridium perfringens(grampositivas).
Bacterias grampositivas de Bacillus anthracis (bacilos morados) que producen
una enfermedad llamada carbunco, encontrados en una muestra de líquido
cerebroespinal. Si hubiera una especie de bacteria gram negativa, aparecería
de color rosa. El resto son los leucocitos que atacan la infección.
Una tinción de Gram en la que se observa un mezclado de Staphylococcus
aureus (coco gram positivo) y Escherichia coli (bacilogramnegativo).
La tinción de Gram o coloración de Gram es un tipo de tinción
diferencial empleado en bacteriología para la visualización de bacterias, sobre
todo en muestras clínicas. Debe su nombre al bacteriólogo danés Christian
Gram (1853-1938), que desarrolló la técnica en 18841. Se utiliza tanto para
poder referirse a la morfología celular bacteriana, como para poder realizar una
primera aproximación a la diferenciación bacteriana, considerándose bacterias
grampositivas a las que se visualizan de color morado, y bacterias
gramnegativas a las que se visualizan de color rosa, rojo o grosella.
PROCEDIMIENTO
1. Recoger muestras para ubicarlas en el microscopio.
2. Hacer el extendido con un palillo de madera.
3. Dejar secar a temperatura ambiente o fijarlas utilizando un mechero.
4. Fijar la muestra con metanol durante un minuto o al calor (flameado tres
veces aproximadamente).
5. Agregar azul violeta (cristal violeta o violeta de genciana) y esperar un
minuto.
6. Enjuagar con agua no directamente sobre la muestra
7. Agregar lugol y esperar un minuto aproximadamente.
8. Agregar alcohol acetona y esperar entre 5 y 30 segundos según la
concentración del reactivo (parte crítica de la coloración). (las gram - se
decoloran, las gram + no)
9. Enjuagar con agua.
10. Tinción de contraste agregando safranina o fucsina básica y esperar un
minuto. Este tinte dejará de color rosado-rojizo las bacterias gram
negativas.
11. Lavar levemente con agua.
UTILIDADES
En el análisis de muestras clínicas suele ser un estudio fundamental por
cumplir varias funciones:
Identificación preliminar de la bacteria causal de una infección.
Utilidad como control calidad del aislamiento bacteriano. Los morfotipos
bacterianos identificados en la tinción de Gram se deben de corresponder
con aislamientos bacterianos realizados en los cultivos. Si se observan
mayor número de formas bacterianas que las aisladas hay que reconsiderar
los medios de cultivos empleados así como la atmósfera de incubación.
A partir de la tinción de Gram pueden distinguirse varios morfotipos distintos:
Los cocos son de forma esférica. Pueden aparecer aislados después de la
división celular (micrococos), aparecer por pares (diplococos), formar cadenas
(estreptococos), o agruparse de manera irregular (estafilococos).
Los bacilos poseen forma alargada. En general suelen agruparse en forma de
cadena (estreptobacilos) o en empalizada.
También pueden distinguirse los espirales, que se clasifican en espirilos (si son de forma
rígida) o espiroquetas (si son blandas y onduladas). Si por el contrario, poseen forma de
«coma» (o curvados) entonces se los designa vibrios.
"Año de la lucha contra la corrupción e impunidad"
PRACTICA Nº 1
CURSO: MICROBIOLOGIA
DOCENTE: DR.
NOMBRE Y APELLIDO: YENIFFER ELIZABETH
VELASQUEZ CORDOVA
