Universidad latina de Panamá

Sede David
Facultad de ciencias de la salud
Licenciatura en tecnología medica

Laboratorio #6

“Características macroscópicas de
cultivos (morfología colonial)”

Nombre: Eyli Espinoza

Materia: Microbiología general

Profesor: Ricardo Saldaña

Grupo#2
2021
 Introducción

Una bacteria que se siembra en un medio de cultivo sólido quedará prácticamente

fija y al reproducirse dará origen a millones de células reunidas en una masa
observable a simple vista, a este conglomerado de bacterias se le conoce como
“colonia bacteriana” y posee características morfológicas útiles para el aislamiento
primario de la bacteria que le dio origen. En este laboratorio el objetivo es
Diferenciar las principales características de crecimiento de los microorganismos
en medios sólidos, semisólidos y líquidos.

Esta evaluación se hace observando las características y el número relativo de

cada tipo de colonia recuperado en medios de agar, así como determinando la
pureza y coloración de Gram y la morfología de las bacterias en cada tipo de
colonia, así como observando los cambios en el medio que rodea dichas colonias,
los cuales reflejan actividades metabólicas específicas de las bacterias
recuperadas. Como resultado se interpretaron diferentes tipos de colonias en
agares de sangre y MacConkey con sus características de cada colonia.
Objetivo

Diferenciar las principales características de crecimiento de los microorganismos

en medios sólidos, semisólidos y líquidos.

Marco teórico

La inspección de cultivos se lleva a cabo sosteniendo la placa en una mano y

observando la superficie del agar, cada placa debe estudiarse con cuidado ya que
las bacterias inicialmente recuperadas de muestras a menudo están en un cultivo
mixto y puede haber una variedad de tipos de colonias, colonias puntiformes de
bacterias que crecen. lentamente pueden pasarse por alto entre colonias más
grandes, en particular si el crecimiento tiene tendencia a diseminarse sobre la
superficie de la placa. Durante el examen las placas deben de inclinarse en varias
direcciones, con una iluminación directa brillante, de modo que la luz se refleje
desde varios ángulos. (Fig. 6.1) se recomienda el uso de una lupa o microscopio
para disección como ayuda para detectar colonias diminutas o inmaduras y
observar mejor sus características.

Las placas de agar sangre también deben examinarse con transiluminación con
una luz brillante por detrás de la placa para detectar reacciones hemolíticas en el
agar, el tipo de hemólisis dependiendo del microorganismo puede ser:

1. Alfa. Se observa como un aclaramiento parcial de sangre alrededor de las

colonias con coloración verde del medio; el contorno de los eritrocitos se
encuentra intacto.

2. Beta. Se observa una zona de aclaramiento total de sangre alrededor de las

colonias debido a la lisis de los eritrocitos

3. Gamma. No hay ningún cambio en el medio alrededor de la colonia; no hay lisis

o coloración de los eritrocitos.
4. Alfa prima. Se observa un halo de lisis incompleta inmediatamente alrededor de
las colonias con una segunda zona de hemólisis completa en la periferia.

LAS CARACTERÍSTICAS MORFOLÓGICAS MÁS IMPORTANTES DE UNA

COLONIA EN AGAR, SON LAS SIGUIENTES:

1. Tamaño: se mide en milímetros.

2. Forma de la colonia: puntiforme, circular, filamentosa, irregular, rizoide, como en

huso.

3. Borde de la colonia: entero, ondulado, lobulado, lacerado, filamentoso, rizado.

4. Elevación: elevada, plana, convexa, pulvinada, embonada, umbilicada. (Fig. 6.3)

5. Superficie: Lisa, brillante, radial, concéntrica, rugosa.

6. Luz transmitida: transparente u opaca.

7. Luz reflejada: brillante o mate.

8. Color de la colonia: depende del medio de cultivo y de las condiciones de

incubación; en algunos casos presentan pigmentación propia como resultado de
su metabolismo, la cual es constante y con valor diferencial.

9. Otras: Las que dependen específicamente del medio.

10. Textura: Seca, viscosa, pastosa, cremosa, algodonosa, etc.

EN MEDIOS DE CULTIVO LÍQUIDO O SEMISÓLIDO, NO HAY FORMACIÓN DE

COLONIAS, LAS CARACTERÍSTICAS DE CULTIVO OBSERVADAS SON:

1. Caldo de nutrientes: Superficie de crecimiento: Floculenta, anillada, peliculada y

membranosa.

2. Siembra por picadura en medio de cultivo sólido o semisólido:

Forma de crecimiento: Filiforme, perlada, papilar, vellosa, arborescente.

 Materiales

• Asa bacteriológica.
• Lupa.
• Mechero
• Cajas de Petri
• Cultivo de bacterias

Procedimiento
Observar y registrar la morfología macroscópica (colonial) de los cultivos
realizados en la práctica anterior, considerando las siguientes recomendaciones:

Situarse en un lugar bien Bacterias gram

La colonia negativas
a observar debe
iluminado, cerca de la flama
estar completamente
Agar MacConky
del mechero y evitando separada de las otras (aislada)
Ilustración Nombres
Escherichia coli
Si alguna característica de la
colonia no se observa claramente
a través de la caja de Petri, esta
última puede abrirse junto a la
flama del mechero.
Salmonella typhi
Para observar el
borde de la colonia
claramente puede
utilizar una lupa.
Características
son de color rojo ladrillo y
están rodeadas por una zona
de bilis precipitada. Este
precipitado biliar se debe a
una caída de pHLa consistencia
alrededor dede la
la colonia debido ase
colonia la determina con
fermentaciónayuda
de la lactosa
del asa estéril.
utilizaran peptona en su lugar,
formando amoníaco, lo cual
incrementa el pH del agar,
formando colonias blancas o
incoloras.
 Kiebsiella pneumoniae son de color rosado y en el
medio Kliger o TSI donde son
Ácido/Ácido, es decir
fermentador de la lactosa más
producción de gas; y en la
fermentación acetónica o
prueba de Voges

Enterobacter cloacae Son colonias fermentadoras

de lactosa, forma de colonias
blancas, rosado y redondas
que se curvan de forma
convexa.

Shiguella sonnei son incoloras y transparentes.

En este medio las colonias de
otros microorganismos que
fermentan la lactosa
(coliformes) son colonias
rojizas.

Proteus vulgaris colonias de

incoloras a color beige,
proliferación inhibida

Ilustración Nombre Características

Bacterias gram positivas

Agar en sangre
 Streptococcus faecalis se observan colonias
pequeñas, lisas de borde
uniforme, de color crema
o blanco y en agar
telurito, se observan
colonias de color negro.

Bacillus anthracis Son de aspecto rugoso,

planas, grises y no
hemolíticas. Bordes
ondulados. Es la única
especie en el genero que
no produce hemolisis.
Streptococcus agalactiae Forman colonias de color
blanco grisaceo de tipo
opaco, rodeadas de una
banda angosta de
hemolisis beta.

Clostridium perfringens Produce colonias

redondas y lisas de 2-3mm
rodeadas.

Discusión de resultados
un cultivo es un método para la multiplicación de microorganismos, tales como lo son
bacterias en el que se prepara un medio óptimo para favorecer el proceso deseado. Un
cultivo es empleado como un método fundamental para el estudio de las bacterias y otros
microorganismos que causan enfermedades en medicina humana.

Un microorganismo se puede sembrar en un medio líquido o en la superficie de un medio

sólido de agar. Los medios de cultivo contienen distintos nutrientes que van, desde
azúcares simples hasta sustancias complejas como la sangre o el extracto de caldo de
carne. Para aislar o purificar una especie bacteriana a partir de una muestra formada por
muchos tipos de bacterias, se siembra en un medio de cultivo sólido donde las células
que se multiplican no cambian de localización; tras muchos ciclos reproductivos, cada
bacteria individual genera por escisión binaria una colonia macroscópica compuesta por
decenas de millones de células similares a la original.

Cuestionario

1. ¿Qué es una colonia?

R: agrupación de un conjunto de microorganismos de un mismo tipo.
Algunos microorganismos que forman colonias son las bacterias, los
hongos y los protozoos o protozoario.
2. Explique cómo se determina la consistencia de una colonia.
R: la caja Petri con el medio de cultivo se coloca a la altura de la cara y con
una asa se toca una colonia (destruir) y se retira la asa con cuidado para
poder observar la consistencia de esta.
3. Diga las diferencias entre las colonias desarrolladas en un medio
enriquecido y en uno selectivo.
R: Medios enriquecidos
Son medios simples o comunes, a los que se le añaden ciertos elementos
como sangre, suero, líquido ascítico, huevo, glucosa, vitaminas, etc. lo que
permite el aporte de factores de crecimiento o sustancias que neutralizan
agentes inhibidores del crecimiento en bacterias exigentes
nutricionalmente.
Medios selectivos
Se consiguen añadiendo al agar nutritivo compuestos químicos nocivos
para algunas bacterias cuyo crecimiento no es de interés o también
mediante una alteración de las condiciones físicas del medio
4. Enumerar las principales características tomadas en cuenta para
determinar un crecimiento colonial.
R: a) tamaño de la colonia: por lo común calculado en mm o descrito en
términos relativos como cabeza de alfiler, pequeño, medio o grande.
B) forma: puntiforme, circular, filamentosa, irregular, rizoide, como huso.
C) elevación: plana, sobreelevada, convexa, pulvinada (con forma de
cojin), umbonada, umbilicada.
D) margen o borde colonial: entero, ondulante, loblado, lacerado,
filamentoso, rizado.
E) color o pigmentación de la colonia: blanco, amarillo, negro, marrón,
anaranjado, etc.
F) superficie: brillante, opaca, roma, transparente.
5. ¿De qué forma observa si un crecimiento en agar sangre presenta
hemólisis?
R: se Observan los halos hemolíticos alrededor de las colonias se
determina el tipo de hemólisis que posee:
alfa: halos verdosos (oxidación de la hemoglobina de los glóbulos rojos a
metahemoglobina en el medio)
beta: halos incoloros (hemolisis total)
 gamma: inexistencia de halos (sin hemolisis)

6. Describa como se observan los siguientes tipos de hemólisis:

a) Alfa: es una hemólisis parcial y la zona de crecimiento aparece rodeada de un

halo de color verdoso.

b) Beta: en este caso la hemólisis es total y el halo que rodea a las colonias es
totalmente transparente.

c) Gamma: el microorganismo en cuestión no es capaz de realizar la hemólisis y

por tanto no existe halo alrededor de la colonia.

d) Alfa prima: Se observa un halo de lisis incompleta inmediatamente alrededor de

las colonias con una segunda zona de hemólisis completa en la periferia.

7. Mencione que otras reacciones se dan en los siguientes medios de cultivo

sólidos utilizados en la identificación de bacterias:

a) Agar sal y manitol: contiene peptonas y extractos de carne bovina, que

suministran los nutrientes esenciales. Una concentración de cloruro sódico de
7,5% tiene como resultado una inhibición parcial o completa de los organismos
bacterianos diferentes de los estafilococos.

b) Agar leche: El medio de agar-leche es utilizado en la selección de

microorganismos productores de proteasas.

c) EMB: Este medio de cultivo permite una diferenciación muy clara entre las
colonias de organismos fermentadores de lactosa y aquellos que no la fermentan;
el contenido de eosina y azul de metileno inhiben en cierto grado organismos
Gram positivos.

8. Describa la morfología colonial de:

a) E. coli en agar EMB: Las colonias de E. Coli en agar E.M.B. (eosina y azul de
metileno) tienen 2 a 4 mm de diámetro, un centro grande de color oscuro e incluso
negro, y tienen brillo verde metálico cuando se observan con luz refleja.
b) S. aureus en agar Sal y manitol: Los estafilococos positivos a la coagulasa (por
ejemplo, Staphylococcus aureus) producen colonias de color amarillo y un medio
circundante de color amarillo, mientras que los estafilococos negativos a la
coagulasa producen colonias de color rojo y no producen cambio de color en el
indicador de rojo fenol1

c) P. aeruginosa en agar nutritivo: su morfología colonial es característica de

identificación en algunos medios de cultivo, por ejemplo, en medio agar Cetrimida,
es un bacilo curvo o recto, aislado o en pareja o cadenas cortas, Gram negativa (-)
esta bacteria tiene motilidad positiva gracias a su flagelo (solo cuenta con uno).

9. ¿De qué forma reporta la luz transmitida de una colonia?

R: opaca (no permite el paso de la luz), Traslucida (deja pasar la luz sin permitir
visibilidad de los objetos observados a través de la colonia), transparente (deja
pasar la luz permitiendo ver claramente los objetos observados a través de la
colonia.)

10. ¿De qué forma reporta la luz reflejada de una colonia?

R: opaca o brillante.

Conclusiones

• Un medio de cultivo son factores de crecimiento y otros componentes que

crean las condiciones necesarias para el desarrollo de los
microorganismos.
• En el agar MacConkey permite el aislamiento exclusivo de bacilos Gram
negativos. Por esta razón es un medio selectivo y además permite distinguir
entre bacilos fermentadores y no fermentadores de la lactosa, lo que lo
hace un medio diferencial.
 • El agar en sangre es utilizado para el aislamiento y cultivo de una amplia
variedad de microorganismos con difíciles características de crecimiento.
• Las colonias de bacterias permiten el uso de técnicas que ayudan a
estudiar en cuanto morfología colonial, identificación, crecimiento y
actividad metabólica de la bacteria.

Bibliografía
EdulabC. (17 de julio de 2019). Obtenido de medios de cultivos: https://edulabc.com.mx/medios-
de-cultivo/

EdulabC. (7 de agosto de 2019). Obtenido de Tipos de hemólisis: https://edulabc.com.mx/tipos-de-

hemolisis/

Microbitos, G. (s.f.). Microbitos Blog. Obtenido de

http://microbitosblog.com/2010/06/14/morfologia-colonial-bacteriana/

Significados.com. (02 de agosto de 2018). Obtenido de colonias:

https://www.significados.com/colonia/

Wikipedia. (12 de enero de 2020). Obtenido de https://es.wikipedia.org/wiki/Agar_sangre