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Informe de Practica Bioligia - Laboratorio01!02!03

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“ESTUDIO DEL MICROSCOPIO” Material: Microscopio simple Microscopio compuesto Información: Etimologías.

- Del griego “micros”, pequeños y “ekopiein”, mirar, examinar. Definición.- Es un aparato óptico que ha sido construido para aumentar el tamaño de la imagen de los objetos muy pequeños. Llámese microscopio simple cuando consta de una sola lente. Sistema de lentes que funciona como una sola. Se une para trabajos elementales que no requieren de amplificaciones de las imágenes. El aumento de las imágenes pueden ser de tres a quince veces el diámetro del objeto. El microscopio compuesto es mucho más complicado que el anterior y es capaz de producir grandes aumentos. Consta por lo menos de dos sistemas de lentes como lo son: el ocular y el objetivo. DESCRIPCION: Para el estudio del microscopio compuesto lo dividiremos en tres sistemas: 1.- Sistema óptico 2.- Sistema de iluminación 3.- Sistema Mecánico 1.- SISTEMA OPTICO: Consta de los siguientes sistemas de lentes: OBJETIVO: El que está cerca del objetivo ocular, colocando cerca del ojo observador. Tiene como función de una imagen real invertida y amplificada del objetivo. OCULAR: Aumenta el tamaño de la imagen dada por el objetivo a una distancia mínima de la visión distinta (20 cm aprox.) la imagen que produce es virtual, invertida con relación a la posición del objeto (derecha con relación a la imagen que dio el objetivo), mayor que el objeto y que la imagen objetiva y del mismo lado del sistema de lentes. 2.- SISTEMA DE ILUMINACION: Formado por el condensador, el diafragma y el espejo. CONDENSADOR: Concentra los rayos luminosos procedentes del espejo. Se hace ascender o descender generalmente por medio de un tornillo especial. DIAFRAGMA: Serie de placas en forma imbricada y del abanico generalmente asociado al condensador, permite la regulación de la cantidad de luz que debe llegar al condensador. ESPEJO: Es el receptor y guía de los haces luminosos que proceden de las fuentes de iluminación. Posee dos caras, una cóncava y otra plana. La primera se utiliza cuando la luz procede de un foco cercano (bombilla eléctrica, por ejemplo) y la cara plana para la luz natural o solar. 3.- SISTEMA MECANICO: Formado por las partes del microscopio que soportan y ajustan los sistemas ópticos de iluminación; sus partes son: tornillos macrométricos o de cremallera, tornillo micrométrico, columna, brazo, platina, tubo, revólver, pié, etc.. TUBO: Lleva en su parte inferior el revólver con dos o más objetivos y en la parte superior encaja el ocular. Tiene movimiento vertical ascendente o descendente por medio del tornillo macrométrico. BRAZO: Soporta el tubo en su parte superior y en su base se articula la platina. COLUMNA: Soporta la parte superior del microscopio y se articula con el brazo por medio de la charnela; el cual permite inclinar el microscopio hasta nuestros ojos.

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PLATINA: Puede ser rectangular o circular: en ella se coloca el portaobjetos con la preparación que se va a observar y en su centro lleva un orificio que permite el paso de los rayos luminosos; lleva un par de pinzas para sujetar la preparación o un carro móvil controlable por tornillos que permiten desplazamientos laterales y anteroposteriores sobre la platina. TORNILLO MACROMETRICO O TORNILLO DE CREMALLERA: Mueve rápidamente el tubo y realiza el enfoque aproximado del objeto del microscopio. TORNILLO MICROMETRICO: Mueve el tubo con gran lentitud y permite realizar el enfoque exacto. Partes del microscopio óptico Parte mecánica: o o o o o o o Sistema de soporte o estativo: Pie Brazo Tubo Platina Revolver Sistema de ajuste: Tornillo macrométrico Tornillo micrométrico

Parte óptica: Fuente de iluminación Condensador y diafragma Lentes: oculares (10x y 12x) y objetivos (4x, 10x, 40x y 100x).

* PIE: Sirve como base del microscopio y tiene un peso suficiente para dar estabilidad al aparato. En los microscopios antiguos tenía forma de herradura o de trípode pero en la actualidad suele ser una plataforma rectangular. En él se integra la fuente luminosa. * BRAZO: Es una columna perpendicular al pie. Puede ser arqueado o vertical y une al pie con el tubo. * TUBO: Es una cámara oscura unida al brazo mediante una cremallera. Tiene el revolver con los objetivos en su parte inferior y los oculares en el extremo superior. * PLATINA: Es una plataforma horizontal con un orificio central, sobre el que se coloca la preparación, que permite el paso de los rayos procedentes de la fuente de iluminación situada por debajo. Dos pinzas sirven para retener el portaobjetos sobre la platina y un sistema de cremallera guiado por dos tornillos de desplazamiento permite mover la preparación de delante hacia atrás o de izquierda a derecha y viceversa. En la parte posterior de uno de los laterales se encuentra un nonius que permite fijar las coordenadas de cualquier campo óptico; de esta forma se puede acudir a el cuando interesa. * REVOLVER: Es un sistema que coge los objetivos, y que rueda para utilizar un objetivo u otro. * TORNILLOS MACRO Y MICROMÉTRICO: Son tornillos de enfoque, mueven la platina hacia arriba y hacia abajo. El macrométrico lo hace de forma rápida y el micrométrico de forma lenta. Llevan incorporado un mando de bloqueo que fija la platina a una determinada altura. * FUENTE DE ILUMINACIÓN: Se trata de una lámpara halógena de intensidad graduable. Esta situada en el pie del microscopio. Se enciende y se apaga con un interruptor y en su superficie externa puede tener una especie de anillo para colocar filtros que facilitan la visualización. * CONDENSADOR Y DIAFRAGMA: El condensador es un sistema de lentes situadas bajo la platina su función es la de concentrar la luz generada por la fuente de iluminación hacia la preparación. En el interior del condensador existe un diafragma (iris) cuya función es limitar el haz de rayos que atraviesa el sistema de lentes eliminando los rayos demasiado desviados (regula la cantidad de luz y ajusta la Apertura Numérica). * OCULARES: Están colocados en la parte superior del tubo. Se denominan así, porque están muy cercanos al ojo. Su función es la de captar y ampliar la imagen formada en en los objetivos. En los modernos microscopios hay dos oculares (microscopios binoculares) que están unidos mediante un mecanismo que permite ajustar la distancia interpupilar. En general los mas utilizados son los de 10X ( producen un aumento de 10 veces ). * OBJETIVOS: Están colocados en la parte inferior del tubo insertados en una pieza metálica, denominada revolver, que permite cambiarlos fácilmente. Generan una imagen real, invertida y aumentada. Los mas frecuentes son los de 4, 10, 40, y 100 aumentos. Este último se llama de inmersión ya que para su utilización se necesita utilizar aceite de cedro sobre la preparación. En la superficie de cada objetivo se indican sus características principales, aumento, apertura numérica, y llevan dibujado un anillo coloreado que indica el número de aumentos (rojo 4X, amarillo 10X, azul 40X y blanco 100X).

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Tipos de microscopios MATERIAL

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Microscopio Portaobjetos Cubreobjetos Cubeta

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Pinzas Escalpelo Verde de metilo acético o azul de metileno Cuentagotas

Agujas enmangadas

Cebolla

Microscopios Ópticos Microscopios Electrónicos Mantenimiento y precauciones - Al finalizar el trabajo, hay que dejar puesto el objetivo de menor aumento en posición de observación, asegurarse de que la parte mecánica de la platina no sobresale del borde de la misma y dejarlo cubierto con su funda. 2- Cuando no se está utilizando el microscopio, hay que mantenerlo cubierto con su funda para evitar que se ensucien y dañen las lentes.Si no se va a usar de forma prolongada, se debe guardar en su caja dentro de un armario para protegerlo del polvo. 3- Nunca hay que tocar las lentes con las manos. Si se ensucian, limpiarlas muy suavemente con un papel de filtro o, mejor, con un papel de óptica. 4- No dejar el portaobjetos puesto sobre la platina si no se está utilizando el microscopio. 5- Después de utilizar el objetivo de inmersión, hay que limpiar el aceite que queda en el objetivo con pañuelos especiales para óptica o con papel de filtro (menos recomendable). En cualquier caso se pasará el papel por la lente en un solo sentido y con suavidad. Si el aceite ha llegado a secarse y pegarse en el objetivo, hay que limpiarlo con una mezcla de alcohol-acetona (7:3) o xilol. No hay que abusar de este tipo de limpieza, porque si se aplican estos disolventes en exceso se pueden dañar las lentes y su sujeción. 6- No forzar nunca los tornillos giratorios del microscopio (macrométrico, micrométrico, platina, revólver y condensador). 7- El cambio de objetivo se hace girando el revólver y dirigiendo siempre la mirada a la preparación para prevenir el roce de la lente con la muestra. No cambiar nunca de objetivo agarrándolo por el tubo del mismo ni hacerlo mientras se está observando a través del ocular. 8- Mantener seca y limpia la platina del microscopio. Si se derrama sobre ella algún líquido, secarlo con un paño. Si se mancha de aceite, limpiarla con un paño humedecido en xilol. 9- Es conveniente limpiar y revisar siempre los microscopios al finalizar la sesión práctica y, al acabar el curso, encargar a un técnico un ajuste y revisión general de los mismos.

Observación de epidermis de cebolla

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TÉCNICA 1. 2. 3. 4. 5. 6. Separar una de las hojas interna de la cebolla y desprender la tenue membrana que está adherida por su cara inferior cóncava. Depositar el fragmento de membrana en un porta con unas gotas de agua. Pon el porta sobre la cubeta de tinción para que caiga en ella el agua y los colorantes. Si es preciso, estirar el trozo de epidermis con ayuda de dos agujas enmangadas. Escurrir el agua, añadir una gotas de verde de metilo acético (o azul de metileno) sobre la membrana y dejar actuar durante 5 minutos aproximadamente. ¡No debe secarse la epidermis por falta de colorante o por evaporación del mismo! Con el cuentagotas bañar la epidermis con agua abundante hasta que no suelte colorante. Colocar sobre la preparación un cubreobjetos evitando que se formen burbujas y llevarla al microscopio. Observa la preparación a distintos aumentos, empezando por el más bajo. Identifica las distintas células del tejido epidérmico y las de las hojas del bulbo de cebolla.

OBSERVACIÓN MICROSCÓPICA DE UN TEJIDO VEGETAL: TEJIDO EPIDÉRMICO DE CEBOLLA MATERIAL

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Microscopio, Portaobjetos, Cubreobjetos Cubeta, Agujas enmangadas , Pinzas , Escalpelo, Verde de metilo acético o azul de metileno, Cuentagotas, Cebolla. TÉCNICA

1. 2.

Separar una de las hojas interna de la cebolla y desprender la tenue membrana que está adherida por su cara inferior cóncava. Depositar el fragmento de membrana en un porta con unas gotas de agua. Pon el porta sobre la cubeta de tinción para que caiga en ella el agua y los colorantes. Si es preciso, estirar el trozo de epidermis ayuda de dos agujas enmangadas. con

3.

Escurrir el agua, añadir una gotas de verde de metilo acético (o metileno) sobre la membrana y dejar actuar durante 5 minutos aproximadamente. ¡No debe secarse la epidermis por falta de colorante o por evaporación del mismo!

Citopla sma Membr ana Núcleo

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4.

Con el cuentagotas bañar la epidermis con agua abundante hasta suelte colorante.

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5. Colocar sobre la preparación un cubreobjetos evitando que se formen burbujas y llevarla al microscopio. Observa la preparación a distintos aumentos, empezando por el más bajo. Identifica las distintas células del tejido epidérmico y las de las hojas del bulbo de cebolla

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CAPÍTULO 1 CÉLULA VEGETAL INTRODUCCION Las células vegetales varían en forma, tamaño y tipo de contenido; sin embargo, siempre son las unidades estructurales y dinámicas básicas de los vegetales, por lo que es necesario conocer los detalles de su estructura y funcionamiento como primera aproximación para comprender cómo viven, crecen y se reproducen las plantas. Todas las células vegetales constan de los siguientes componentes principales: pared celular, protoplasma y vacúolo. La pared celular es una estructura no viva, porosa, semirrígida, que encierra al protoplasma vivo que la forma. Está constituida básicamente por fibras de celulosa, además de hemicelulosas y sustancias pécticas. De acuerdo con sus funciones más específicas, sostén y forma, tiene otras sustancias secundarias: lignina (firmeza), suberina (impermeabilización) y demás. El protoplasma es la unidad viva y está formado por citoplasma y orgánulos como el núcleo, plastidios mitocondrios y otros elementos. Es de naturaleza viscosa y granular; generalmente se encuentra en delgadas capas adyacentes a la pared e interconectando las células (plasmodesmos); aparece limitado por un sistema de membranas (plasmalema y tonoplasto) que también lo recorren internamente (retículo endoplásmico). Su actividad se manifiesta por la presencia de un flujo o corriente direccional de los orgánulos e inclusiones citoplasmáticos que es diferente al movimiento browniano determinado por la energía cinética de las partículas. También pueden encontrarse en la célula vegetal inclusiones inertes de tipo proteínico (granos de aleurona), lipídico o cristalino que en conjunto se denominan paraplasma. Son frecuentes, por ejemplo, los cristales de carbonato u oxalato de calcio. Las áreas no ocupadas por el citoplasma y delimitadas por el tonoplasto reciben el nombre de vacúolos. Contienen el jugo vacuolar que es importante en la turgencia de la célula. Disueltas en él hay sustancias químicas de reserva. Las células jóvenes tienen vacúolos pequeños y separados, en cambio las células maduras contienen un gran vacúolo que comúnmente llena casi toda la célula. Importantes orgánulos del protoplasma son los plastidios: como el cloroplasto, especializado para la fotosíntesis; los mitocondrios, asiento de la actividad respiratoria; los ribosomas, directamente vinculados a la síntesis proteica; el núcleo, fundamental en la duplicación celular a través de los procesos de mitosis y meiosis; los microcuerpos (peroxisoma y glioxisoma); el aparato de Golgi, y otros. célula vegetal ESTRUCTURAS CELULARES OBJETIVOS:

El propósito de este estudio es reconocer los componentes de la célula vegetal, observar el movimiento protoplasmático e identificar algunos de los tipos de inclusiones cristalinas más comunes. EXPERIMENTOS: 1. Estudio de la célula Materiales: Por grupo: microscopio, Generales:

6 portaobjetos y cubreobjetos,

vidrio de reloj,

bulbo de cebolla,

2 flores de tradescantia,

hoja de euforbia,

semillas de ricino;

solución rojo neutro 0.5 % ( ), solución de Lugol (*), solución Sudán III o IV (*), éter de petróleo, tinta china.

Procedimiento: a. En un portaobjeto con una gota de agua coloque un trozo de la epidermis superior del catáfilo de un bulbo de cebolla. (Este tejido se desprende fácilmente de la superficie cóncava del catáfilo usando pinzas; evite que el tejido se enrolle). Coloque el cubreobjeto y examine al microscopio, primero con el menor aumento y luego con el mayor. b. Haga otra preparación de epidermis de cebolla agregándole, en lugar de agua, una gota de rojo neutro al 0.5 %. c. A otra preparación de epidermis de cebolla agréguele una gota de Lugol diluido. d. Monte en un portaobjeto con una gota de agua, los pelos estaminales de tradescantia y observe el movimiento citoplasmático con el aumento mayor. e. Coloque en el portaobjeto una gota de savia de hoja de euforbia y observe el movimiento browniano. f. Haga un corte delgado del endosperma de una semilla de ricino y tiña la preparación con Sudán III ó I V. Observe al microscopio, después agregue gotas de éter de petróleo y vuelva a observar.

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Resultados: a. Dibuje varias células epidérmicas de cebolla. Identifique pared celular, citoplasma y núcleo. b. Haga un diagrama de varias células en que se muestre los diferentes estratos que las separan. Indique dónde se ubican: laminilla media, paredes celulares primaria y secundaria. c. Compare el movimiento browniano de las partículas de tinta china y savia de euforbia. ¿Hay relación entre el tamaño de las partículas y su velocidad? d. Señale dónde actúan los siguientes reactivos y la razón de usarlos: Reactivos Rojo neutro Lugol Sudán I V Eter de petróleo 2. Estudio de cristales Materiales: Por grupo: microscopio, trozo de catáfilo lo café de bulbo de cebolla, pecíolo de hiedra, hoja de gomero y de begonia, 4 portaobjetos y cubreobjetos, hoja de afeitar. Procedimiento: a. Haga una preparación de la epidermis superior del catáfilo café de cebolla en una gota de agua y busque cristales de oxalato de calcio. Observe lo mismo en un corte transversal de pecíolo de hiedra. b. Ubique cristales de carbonato de calcio en un corte transversal de la hoja de gomero. c. En un corte transversal del pecíolo de una hoja de begonia, observe la presencia de cristales de oxalato de calcio. Resultados: Defina y dibuje los siguientes tipos de cristales, según su forma: Cristal Agujas (cristal poliédrico simple de oxalato de calcio): Cistolito (concreción de carbonato de calcio que se forma en el interior de las células): Drusas (conjunto redondeado de cristalitos de oxalato de calcio que se forman en una célula): 3. Estudio de plastidios CLOROPLASTOS Y CROMOPLASTOS Materiales: Por grupo: microscopio, Ubicación Dibujo Tinción Identificación

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hoja de elodea (o musgo), trozo de zanahoria, hoja de afeitar, vaso pequeño y bagueta, 9 portaobjetos y cubreobjetos; Generales: AMILOPLASTOS: tubérculo de papas, semillas de poroto, granos de maíz, fruto verde de plátano, granos de trigo, granos de arroz, hojuelas de avena. Procedimiento: a. Examine al microscopio una hoja joven de elodea y ubique los cloroplastos. Posteriormente acerque la preparación a una lámpara para calentarla levemente. Cuide de que la preparación no se seque. Observe al microscopio la zona cercana a la nervadura. (Para observar el movimiento de cloroplastos en clima muy frío debe mantener las hojas en agua durante la noche a una temperatura cercana a 25°C). b. Haga un corte transversal de zanahoria y observe cromoplastos con cristales de carotina. c. Haga un corte transversal en los siguientes materiales: papa, poroto, maíz, plátano, trigo y arroz. Raspe la superficie y observe los leucoplastos y sus granos de almidón al microscopio. Disminuya la iluminación bajando el condensador o cerrando el diafragma. d. Macere hojuelas de avena y haga una suspensión. Observe al microscopio.

REPORTE DE LABORATORIO. 1. Represente esquemáticamente lo observado al microscopio. ¿Qué conclusiones puede dar sobre el número y la ubicación de los pigmentos dentro de las células de Elodea examinadas? 2. Dibuje un esquema del cromatograma y analice el cromatograma obtenido. Identifique, atendiendo a su coloración, los diferentes pigmentos separados por este método. ¿Por qué la extracción no se realiza con agua? (Anexe el cromatograma obtenido por su equipo) 3. Realice los gráficos de Absorbancia contra longitud de onda para cada uno de los pigmentos analizados. Señale los máximos de absorbancia para cada pigmento y relaciónelos con el color característico de los mismos. ¿Qué papel juega la presencia de diferentes pigmentos captadores de energía luminosa, además de las clorofilas, en los fotosistemas del cloroplasto? BIOQUIMICA. PRACTICA DE LABORATORIO # 2. CLOROPLASTOS INTRODUCCION. Uno de los procesos metabólicos más importantes de las células vegetales lo constituye la Fotosíntesis. Durante la fase luminosa de la misma es imprescindible la participación de diferentes pigmentos fotosintéticos que se encuentran dentro de los plastidios, y que le confieren la coloración característica de las hojas de las plantas. Los pigmentos de mayor importancia son las clorofilas: la clorofila A que tiene un color verde azulado, y la clorofila B de color verde amarillento. También son importantes los carotenoides, de color anaranjado-rojizo, y las xantofilas de color amarillo. El surgimiento de los métodos cromatográficos está marcado precisamente por el estudio realizado por el científico ruso M.S.Tswett, quien en 1903 publicó un trabajo sobre la separación de pigmentos vegetales a través de una columna llena de un compuesto adsorbente (yeso, alúmina, almidón u otro) al aplicar un extracto de plantas preparado con solventes orgánicos (etanol, acetona, benceno, etc.). La separación de estos pigmentos se puede realizar también mediante cromatografía en capa fina o en papel, utilizando diferentes sistemas de solventes. Bibliografía.

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- Chechetkin, A.V. Prácticas del ganado y las aves de corral. Editorial Mir, 1984. - Pequeño Pérez, J. Prácticas de Fisiología Vegetal. Editorial Pueblo y Educación, 1972. - Gott, A Cromatografía en capa fina. ISPH, 1982. PARTE EXPERIMENTAL MATERIALES Y REACTIVOS.

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Microscopio óptico Hojas de Elodea Portaobjetos Hojas de plantas de diferentes Cubreobjetos Colores Mortero Acetona al 85% en agua Tubos de ensayo Etanol al 90% Papel cromatográfico Papel de filtro Espectrofotómetro

PARTE EXPERIMENTAL. PROCEDIMIENTO: Observación de cloroplastos en hojas de Elodea. 1. Coloque en un portaobjetos hojas de Elodea, y cúbralas con el cubreobjetos. 2. Coloque la preparación en la platina del microscopio óptico, y enfoque comenzando con el menor aumento, para observar los cloroplastos. 3. Dibuje un esquema de lo observado en el microscopio. SEGUNDA PARTE Células Vegetales Introducción.La célula es la porción más pequeña de sustancia viva de que están formados los seres orgánicos. Todos los seres vivos, animales y vegetales, están formados por células. La forma de la célula es variada. Generalmente es esférica, pero también puede ser estrellada, ramificada, etc. El tamaño de las células es muy pequeño. Son invisibles a simple vista; es necesario el microscopio para distinguirlas. Para medir una célula se utiliza el micrón, que es igual a una milésima de milímetro.

I. Objetivos.Reconocer los detalles estructurales de la célula vegetal. Establecer comparaciones estructurales entre diversos tipos de células vegetales. Identificar plastidios y sus respectivos pigmentos. II. Materiales.Material Biológico  Cebolla  Tomate  Corcho  Zanahoria III.Procedimiento.a) células de Corcho. Con ayuda de un bisturí cortar una delgada lamina de corcho para después depositarla en un portaobjetos con una gota de agua. Cubrir la muestra con el cubreobjetos y observar la disposición general de las estructuras observadas. b) Epidermis de Cebolla. Realizar un corte en el bulbo de la cebolla y extraer cuidadosamente la membrana transparente y delgada (catáfila) que recubre al mismo. Llevar la muestra extraída a un portaobjetos que contenga una gota de agua. Cubrir con el cubreobjetos y observar al microscopio. Material Químico  Agua  Azul de metilo Equipos y otros  Microscopio óptico compuesto  Porta objetos  Cubre objetos  Aguja enmangada  Navaja

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Realizadas las observaciones respectivas dejar caer una gota de azul de metilo al borde del cubreobjetos, de tal manera que el colorante penetre en la muestra por capilaridad. Eliminar el exceso de colorante y observar. c) Plastidios. C1. Observación de los Cloroplastos. Realizar un corte transversal fino de una hoja de planta. Llevar la muestra a un portaobjetos, colocar una gota de agua y observar. C2. Cromoplastos - Cortar un trozo muy fino de pulpa de tomate, llevarlo al portaobjeto y, sin colocar la gota de agua, cubrir con el cubreobjetos comprimiendo suavemente la muestra. IV. Célula de Corcho. At = 1,6 * 16 * 10 At = 256 Epidermis de la Cebolla. Presenta: Pared celular Formas hexagonales Cavidad citoplasmática Eucoplastos At = 13,2 * 1,6 * 16 At = 337,92 Células de Zanahoria Presenta: Formas rígidas, pigmentación de color amarillo anaranjado. Pared celular At = 10 * 1,6 * 16 At = 256 Células de Tomate. Presenta: pigmentación roja de licopenos, núcleo At = Hoja común At = V. Discusión.Robert Hooke (1665). Observa por primera vez las células, en cortes finos de corcho que pese a que esta se encontraba muerta permanecía la pared celular . Esta observación es aceptada ya que también se observo en el corte fino de corcho que aunque esta célula se encontraba muerta permanecía aun la pared celular y esta era de cavidades vacías amplias y dobles. Brown (1831). Descubrió la presencia del núcleo en todas las células además de diferenciar por primera vez los dos compartimientos principales de la célula: el citoplasma y el núcleo o carioplasma. Esta observación es aceptada pero cuando se observaron las células solo de una permanecía viva el núcleo y citoplasma, porque cuando es observada una célula en el microscopio esta mayormente esta muerta y en ella lo único conservable es la pared celular así que la observación mas aceptada es de Robert Hooke. VI. Conclusiones.Cortar una delgada lamina de zanahoria, llevarla a un portaobjetos con una gota de agua, cubrir la muestra y observar. Resultados.Presenta pared celular con cavidades amplias y dobles.

Se concluyo que las células vistas presentan: Estructura de forma geométrica. Las formas geométricas presentadas son hexagonales, redondas, pentagonales. Cavidades en la pared celular amplias y dobles pero otras de cavidades pequeñas y sencillas. Pigmentos naturales para la coloración de los alimentos. Licopenos encontrados en el tomate para su coloración roja . Carotenos encontrados en la zanahoria para la coloración amarillo – anaranjado. Eucoplastos encontrados en la catafila de cebolla de pigmentación transparente. Presentación de núcleo en la célula de tomate, citoplasma.

Protoplastidios Perdida de clorofila Cloroplastos Ganancia de clorofila

Cromoplastos Cromoplastos

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I.

Discusión y Conclusiones.

Tomas Young (1773 – 1829) afirmaba que la visión de un objeto en un microscopio es un sistema convergente llamado objetivo da del objeto a observarse una imagen muy aumentada real invertida con relación al objeto, examinada por el ojo por medio de un ocular. Esta teoría nos muestra que ya a partir de ese entonces sé tenia el conocimiento de que al ver una imagen por el microscopio esta es una imagen real, invertida y aumentada y por el pasar de los años se la fue confirmando por otros físicos, matemáticos y científicos. Según Carlos Padilla la formación de imágenes cuando el objeto se encuentra situado entre el centro de curvatura y el foco principal es real, invertida y de mayor tamaño que el objeto. Por la practica realizada en el laboratorio se comprobó que la teoría de Carlos Padilla es cierta ya que observamos que la imagen colocada en las pinzas del microscopio era diminuta y que cuando observamos esta imagen estaba real, invertida y de mayor tamaño, por lo tanto esta teoría es apoyada ya que fue comprobada. Por lo tanto Carlos Padilla confirma lo enunciado por Tomas Young y esto es afirmado por la practica realizada . La conclusión que se tuvo que la imagen vista es real, invertida y aumentada pero no virtual. VII. Bibliografía.Becerra, Ma. Nelly – 1992, “Atlas de la estructura vegetal”, Biblioteca. Universidad Autónoma “Gabriel Rene Moreno”, P47, 72,73 Borek, Ernest – 1996, “La célula clave de la vida”, Editorial Limusa Wiley, México P28,29 Rodríguez, Mario – 1998, “Morfología y anatomía vegetal”, Editorial. “Los amigos del libro”, La Paz, Cbba – Bolivia. P78,79,80,82,88 Morales, Luis – 1996, “Biología Celular y molecular ”, M&C Editores, Cbba – Bolivia. P1 Valecillo, Víctor – 1978, “Ciencias de la Naturaleza”, 24ta Edición, Editorial Melsa. Madrid – España, P17 DESCRIPCION El proceso fue dividido en dos partes claramente diferenciadas debido al tiempo, en la primera parte del proceso se utilizaron las muestras de la cebolla, una muestra de epidermis humana y papa a continuación en la segunda parte más compleja con la hoja de Elodea en agua y en solución salina y como otra muestra la frotis de sangre, para llevar a cabo éste proceso en su orden debieron ser utilizados diferentes materiales. En el primer laboratorio se realizo, como primero, el montaje de la cebolla, se tomo una hoja de el bulbo de la cebolla y luego se hizo un corte cuadrado de 1cm x 1cm, con las pinzas se levantó la capa mas externa, la cual es muy delicada y puede rasgarse con mucha facilidad, y esta fue llevada a la lamina en un montaje húmedo. Se procedió a observar el montaje en los tres primeros y mas sencillos aumentos del microscopio de luz (4x, 10x, 40x) observando lo siguiente : Corte de cebolla (4x) Se lograron diferenciar las células vegetales en forma de celdas en cada una de ellas, se lograron notar de forma sencilla el núcleo, la pared celular, la membrana nuclear y el citoplasma celular. Corte de cebolla (10 x) Con los siguientes aumentos las diferencias antes descritas se hacían mas notables, pero aún no se lograban diferenciar las vacuolas, la membrana citoplasmica o los nucleolos. Corte de cebolla (40x) Para el corte de papa se quitó totalmente la cascara que recubre el tubérculo y luego se realizaron varios cortes transversales, estos debían ser muy finos y transparentes al verlos a trasluz, en la caja de petri se enjuago el corte para evitar el exceso de almidón y para lograr notar los diferentes cortes y cual era el mas indicado para realizarlo, una vez puesto en la lamina, a el corte se le agregó una gota de lugol para lograr distinguir alguno organelos de la célula También este corte se observo bajo los tres aumentos principales del microscopio óptico y esto fue lo observado : Corte de papa (4x) En este corte se puede observar por medio del aumento del lente las divisiones que la muestra tiene. Corte de papa (10x) en este aumento se puede determinar más claramente dichas divisiones considerándolas ya como una célula independiente cada una de la otra, logrando apreciar el núcleo, el citoplasma, la membrana nuclear y la pared celular. Corte de papa (40x)

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ya en ésta última etapa podemos observar netamente lo mismo que en la anterior pero con mayor claridad y nitidez, claro esta que es debido al tamaño que éste aumento ofrece. Para el montaje de la epidermis humana se realizó un raspado en el interior de la mejilla con un palillo de abajo hacia arriba, luego se esparció en toda la lamina o portaobjetos y se le agregó una gota de Azul de metileno y se coloco la laminilla para proceder a ser observado, al igual que los dos anteriores, en los tres aumentos principales (4x,10x,40x), en esta se debió enfocar una sola célula, dado que estaban esparcidas por toda la lamina. Luego se realizo el montaje de la hoja de Elodea en condiciones normales, con agua de acuario, y en una solución salina, para lograr notar con mayor facilidad el proceso de homeostasis de la célula. Para ambos montajes se tomo un ramo de Elodea y se separó una hoja de este, luego se le agrego a uno agua de acuario y a otro una solución salina. Esto fue lo observado : Elodea en Agua (4x) En este montaje se vieron fácilmente las divisiones de las células y los cloroplastos, los cuales se encontraban distribuidos por toda la hoja de Elodea Elodea en Agua (10x) En este aumento, en la célula de Elodea se lograba notar la pared celular, pero ninguno de los otros organelos se logran notar aún. Elodea en agua (40x) Tanto en este como en el siguiente aumento no se ve mayor diferencia entre lo observado salvo que los organelos antes mencionados de la célula se logran notar con una mayor claridad. Elodea de Agua (100x) COMPARACIONES Unos de los grandes dilemas de la vida es que aunque exista un gran conocimiento teórico, nunca puede llegar a equilibrar la practica del mismo, por lo tanto la comparación fundamental de la existencia es llevar lo escrito al verbo. En los libros, en el salón de clases y en general las fuentes de conocimiento que fueron utilizadas antes de los procesos realizados representaron un papel fundamental en la correcta elaboración de los procesos experimentales referentes a la célula sin embargo al momento de utilizar el microscopio manual fuimos concientes de las limitaciones que éste representa frente a la completa determinación de los diferentes organelos, aquellos que desafortunadamente no lograron lucir como lo anteriormente investigado, sin embargo fue posible identificar las partes más fundamentales de las células comprobando así que la importancia de la actividad de cada organelo es directamente proporcional al tamaño del mismo.

ANÁLISIS DE LA INFORMACIÓN Hoy en día al igual que desde el comienzo de los tiempos los seres pensantes se han preguntado acerca de la vida y el porqué de ésta, por lo tanto al momento de descubrir la célula o como muchos pueden llamarla, el origen de todo se puede atribuir la gran importancia que merece. Con el transcurrir de los años la información acerca de la célula ha ido avanzando gracias a las invenciones científicas que cada vez hacen más posible hallar el sentido de todo cuanto nos rodea, un ejemplo claro d éste es el hecho de poder identificar las partes fundamentales de la unidad estructural y funcional de los seres vivos (célula), con éste innovador instrumento científico microscopio manual, sin embargo la vida transcurre y con ésta aumenta el interés por saber más, debido a esto se ha creado la inconformidad con la no claridad de que al momento de querer identificar todos los diferentes organelos que conforman la célula no sea posible llegar a hacerlo, por lo tanto surge dentro de la curiosidad de quien aprende el hecho de tomar como nuevo instrumento d trabajo el nuevo microscopio electrónico, el último a saber que ha logrado revolucionar con toda la historia de éste gran invento. Por otro lado la teoría y la practica se hayan encontradas en el momento en el que es comprueba la una en la otra identificando básicamente la congruencia de la fisiología y estructura de los dos tipos de célula, detalles claramente definidos y comprobados, en éste momento dl proceso es interesante y gratificante ver como se puede entender el porqué de lo que aparece consignado en los libros y dejar a un lado la idea de que todo se hace por inercia, ya que todo tiene una razón de ser y esa es la causa del avance tanto del hombre individual y en sociedad, por lo tanto consideramos fundamental entender el hecho d empezar por el comienzo para poder dar un paso adelante. Que claro está es nuestra meta a seguir. Al momento de realizar un proceso es netamente fundamental el hecho de manejar puramente los instrumentos y pasos a seguir dentro del mismo, por lo tanto aprendimos a correlacionar con los medios de trabajo como lo fueron primero que todo La instrumentación brindada de parte del laboratorio al que tenemos acceso y las diferentes ayudas como los colorantes y demás confirmando una vez más lo fundamental de la ciencia en nuestros días. CONCLUSIONES

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Después de haber realizado de una manera óptima los procesos inicialmente planteados , se puede llegar a claras conclusiones en las que se enfatizó en la clara importancia del avance de la ciencia, éste convirtiéndose en un sinónimo del avance personal de quien quiere aprender y acomodarse a las etapas de crecimiento del mundo, por lo tanto en ésta parte de finalización dejaremos claro el grande interés en comprender el porqué de las cosas, en éste caso de la vida misma. Por otro lado llegamos al punto de pensar claramente en la importante posición que la previa preparación de un proceso de éste tipo implica, por lo tanto la teoría sigue y seguirá representando un papel fundamental si se habla de una respuesta óptima que cumpla con todas las expectativas planteadas anteriormente, sin olvidar que las limitaciones del material deben ser superadas en algún momento por alguien que al igual que todos los descubridores quienes se dejan llevar por la curiosidad de llegar a respuestas claramente establecidas pero sin desarrollar. Dejando a un lado las conclusiones generales pasaremos a lo netamente relacionado don el tema de la Célula; es paradójico notar cómo es que las diferencias que nos separan de los vegetales están claramente definidas, ya que desde la unidad más pequeña hasta el momento descubierta se marca claramente, desde su morfología hasta su funcionamiento, las grandes distancias existentes respecto al ser humano tanto como el animal, en éste caso enmarcados en un mismo grupo (célula animal). Es impresionante cómo es que un sencillo aumento de un lente puede abrirnos las puertas a un mundo antes desconocido, gracias a esto es que surge una interrogación muy objetiva respecto a lo que existe pero que aún no ha sido descubierto, quizá más adelante con las otras generaciones, la célula pasará a un segundo lugar en el que existirá una unidad aún no descubierta en la que se resuma el porqué de la existencia, esa es la realidad del avance que ha estado presente desde el comienzo y no terminará hasta que se llegue a destruir el todo por el todo. Plastos Objetivo Observar distintos tipos de plastos en células vegetales. Material de trabajo Microscopio Soporte de tinciones Portaobjetos Cubreobjetos Recipiente con agua Cuentagotas Aguja enmangada Lugol Agua destilada Papel de filtro I. Método Material de estudio Algas filamentosas de Elodea Tomates maduros Patatas

Observación de cloroplastos

1. 2. 3.

Colocar sobre el portaobjetos una peqeña porción de hojas de Elodea (elegir las pequeñas del extremo de los tallos), o un filamento del alga bien extendido. Añadir una gota de agua y poner el cubreobjetos Observar al microscopio a distintos aumentos

Cuestiones y observaciones

1. 2. 3.

Dibuja lo observado y pon nombre a las distintas estructuras.

¿Observas algún orgánulo citoplasmático? Sin teñir el alga sólo se observan la pared y los cloroplastos. Se observan también movomientos vacuolares, intuyendo de esta forma la forma de este orgánulo. ¿Cuál es el pigmento que contienen?¿Qué función tienen? Contienen clorofila. En ellos se realiza la fotosíntesis. En los cloroplastos , la clorofila absorbe la luz. Esta energia luminosa se transforma en energia química que la célula utiliza para la síntesis de azúcares y aminoácidos. II. Método Observación de cromoplastos

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1. 2. 3. 1.

Corar o raspar con un escalpelo , finísimas porciones de pulpa de tomate maduro de la zona situada bajo el epicarpio (piel). Depositar la muesta más fina que se haya obtenido sobre un portaobjetos, colocar encima el cubreobjetos y comprimir suavemente y lentamente. Observar al microscopio

Cuestiones y observaciones Dibujar lo observado

Se puede observar el núcleo, la pared y los cromoplastos( color anaranjado) de las células. Color naranja ¿Qué función tienen los cromoplastos? Sólo tienen la función de colorear el órgano o la estructura del vegetal. El tomate rojo puede ser más apetecible a los animales que consumiéndolo podran dispersar las semillas. III. Método Observación de amiloplastos

2.

1. 2.

Con el escalpelo, rascar muy ligeramente, la superficie del corte de un trozo de patata y depositar el producto obtenido en el portaobjetos. Mezclar este producto con una gota de Lugol, colocar un cubreobjetos y llevar al microscopio (cerrar el diafragma si es preciso)

Cuestiones y observaiones Dibujar lo observado Amiloplastos sueltos . Se observa su forma ovalada y su color oscuro (casi negro) debido al lugol ¿Qué función tienen los amiloplastos? Són plastos que acumulan gran cantidad de almidón. Su función es de reserva energética, ya que el almidón , por hidrólisi, se transforma en glucosa que la célula aprovecha para obtener energia.

1. 2.

PRACTICA N 01 OBSERVACION GENERAL DE LA CELULA VEJETAL 1. - ESTUDIO DE CÉLULAS EPIDÉRMICAS DE CEBOLLA (1) Material Microscopio, Portaobjetos y cubreobjetos, Cuchilla, Pinzas , Bulbos de cebolla Método Mediante una cuchilla y unas pinzas, aislar una parte de la epidermis correspondiente a la zona cóncava de la tercera o cuarta escama de la cebolla y colocarla extendida en un portaobjetos; a continuación se coloca el cubreobjetos y se observa al microscopio óptico. Observación Con el objetivo de menor aumento, se examinará la preparación entera, observando que está formada por células alargadas que encierran el núcleo. La estructura, aunque no se pueda observar en su totalidad con este método, es la típica de una célula vegetal. El límite más externo es la pared celular, que rodea el material vivo de la célula: el protoplasma. La parte que rodea todo el protoplasma y que está en contacto con la pared celular, es la membrana celular. Dicha membrana no es visible en estas células porque está aprisionada contra la pared celular. Próxima a esta pared hay una capa irregular, granular, que constituye el citoplasma. El núcleo aparece homogéneo. 2.- ESTUDIO DE CLOROPLASTOS, CROMOPLASTOS Y LEUCOPLASTOS o amiliplastos Los plastos son orgánulos citoplasmáticos típicamente vegetales. Pueden estar coloreados por pigmentos liposolubles o ser incoloros. En el primer caso se incluyen cloroplastos y cromoplastos y en el segundo los leucoplastos.

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Los cloroplastos son los responsables de la asimilación fotosintética del carbono en las plantas verdes, los cromoplastos lo son del color anaranjado o rojizo de distintas estructuras vegetales (flores, frutos, etc.). Los leucoplastos pueden almacenar almidón, y se denominan amiloplastos; éstos se encuentran en diferentes órganos de reserva (rizomas, tubérculos). Material Microscopio, Cuentagotas,Portaobjetos y cubreobjetos, Lanceta y aguja enmangada,,Lugol ,Algas filamentosas, Pulpa de tomate, Tubérculo de patata Método y Observación Cloroplastos En un portaobjetos se coloca una gota de agua con unos filamentos del alga y se protege con un cubre. Se observa al microscopio con un objetivo de pocos aumentos para localizar la zona que se observe mejor. Pasar a mayores aumentos. La forma y tamaño de los cloroplastos es variable, pudiendo ser acintados, estrellados, etc. Cromoplastos De un tomate maduro y cortado, se coge una pequeña porción de la parte pulposa. Se coloca sobre un portaobjetos sin agua y se protege con un cubre, comprimiendo suavemente la preparación. Al microscopio se observan unas células muy separadas unas de otras, apreciándose en el citoplasma una serie de gránulos rojizos-anaranjados que son los cromoplastos. También se puede ver el núcleo redondeado, y en las zonas poco alteradas por la compresión, grandes vacuolas incoloras. Leucoplastos El reactivo lugol, que se utiliza para observar estas estructuras, es a la vez una fijador (agente químico que destruye las células sin modificar su estructura) y un colorante de algunos tejidos vegetales (celulósicos, lignificados y suberificados), así como de sustancias de reserva (almidón), siendo de gran interés para el reconocimiento de diferentes especies vegetales, pues cada especie, dentro del mismo género, presenta distinta organización de los tejidos y almacena el almidón de forma diferente. Se toma una porción de tubérculo de patata y se raspa con la punta de la lanceta. Se deposita el raspado sobre un porta y se añade una gota de agua y otra de lugol. Se coloca un cubre y se observa al microscopio. Los gránulos de almidón se tiñen de color azul-violeta intenso por el yodo. Se pueden observar las capas de crecimiento excéntricas, que presentan los gránulos de almidón alrededor de un punto central o "hilo".

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